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基于CRISPR/Cas9基因编辑系统的载体组合及其应用
01.成果简介 CRISPR/Cas9是细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统。其工作原理是crRNA通过碱基配对与tracrRNA结合形成tracrRNA/crRNA复合物，此复合物引导核酸酶cas9蛋白在与crRNA配对的序列靶位点剪切双链DNA。经过研究，通过人工设计tracrRNA/crRNA，改造形成具有引导作用的sgRNA，可以引导Cas9蛋白在多种细胞的特定基因组位点上进行切割、修饰，并最终实现基因突变、插入或缺失。因此，CRISPR/Cas9系统已经被广泛应用于基因编辑技术领域。 近年来，CRISPR/Cas9基因编辑系统在真核生物和原核生物中得到了广泛的应用。在大肠杆菌等革兰氏阴性菌中，用一个载体表达cas9基因，同时由于革兰氏阴性菌重组效率低，需要在这个载体上表达λ-RED重组酶；在另一个载体中表达sgRNA和用于同源重组的同源臂序列。两个载体都转入大肠杆菌中时，sgRNA介导Cas9蛋白切割基因组上特定序列，形成双链断裂，刺激同源重组的发生，从而实现基因编辑。 本项成果构建了适用于盐单胞菌的基于CRISPR/Cas9的基因编辑系统。该系统由两个载体组成：第一个载体表达Cas9基因，且不需要表达λ-RED重组酶，实际操作中不再需要诱导λ-RED重组酶的表达，简化了步骤流程；第二个载体表达sgRNA，并含有用于同源重组的同源臂序列。从而实现了基因编辑。本项成果的技术优势包括： （1）基因编辑时间由原有的20余天缩短到7-8天； （2）N个基因编辑时间由原有的N个月缩短到3+5N天； （3）无需表达λ-RED重组酶。 图1 盐单胞菌TD01进行基因编辑的流程示意图02.应用前景 本项成果可作为CRISPR/Cas9基因编辑系统的载体，广泛应用于基因编辑领域。03.知识产权 本项成果已申请1项发明专利。04.团队介绍 本项目为多团队合作项目，其中一个团队的负责人为清华大学教授，博士生导师，长江学者特聘教授，国家杰出青年基金获得者。主要研究方向为合成生物学、微生物代谢工程、生物材料、工业生物技术。已发表国内外高水平学术论文数十篇，申请专利70余项。05.合作方式 投融资。06.联系方式邮箱：zhangxinrui@tsinghua.edu.cn
清华大学
2021-04-13
创制转基因技术中带有安全筛选标记的安全转化载体
选择标记转基因作物已成为近年来植物基因工程技术研究的重点之一，随着转基因作物产品的商品化，转基因植物的生物安全性受到公众越来越多的关注，尤其是目前抗生素标记基因在植物遗传转化过程中的广泛应用，使人们对这些标记基因可能带来的潜在危害性心存疑虑，抗性标记基因的存在严重地阻碍了转基因植物的商品化进程和转化技术本身的有效性。 本项目培育的无抗生素标记基因（可视化标记基因）在建立高效、安全、规模化的转基因作物技术体系方面取得突破，以紫色幼芽作为可视筛选标记代替抗生素筛选标记，构建了新型转化载体
南开大学
2021-04-14
创制转基因技术中带有安全筛选标记的安全转化载体
选择标记转基因作物已成为近年来植物基因工程技术研究的重点之一，随着转基因作物产品的商品化，转基因植物的生物安全性受到公众越来越多的关注，尤其是目前抗生素标记基因在植物遗传转化过程中的广泛应用，使人们对这些标记基因可能带来的潜在危害性心存疑虑，抗性标记基因的存在严重地阻碍了转基因植物的商品化进程和转化技术本身的有效性。
本项目培育的无抗生素标记基因（可视化标记基因）在建立高效、安全、规模化的转基因作物技术体系方面取得突破，以紫色幼芽作为绿 脓可视筛选标记代替抗生素筛选标记，构建了新型转化载体并应用于作物，已申请 2 项发明专利。
南开大学
2021-04-13
纳米铝塑板
产品名称：纳米氟碳涂层铝塑板
表面涂层：
铝合金：AA1100series，AA3003series
铝厚：0.3mm,0.40mm,0.45mm,0.50mm
铝厚度：4mm,5mm,6mm
宽度：1220mm,1250mm,1500mm
长度：最长至6000mm,特殊宽度可定制
背涂：
品牌：ALUSHINE
产地：山东临沂
临沂金湖彩涂铝业有限公司
2021-09-02
药物可控时序释放的含多种药物的磷酸钙骨水泥粉末
一种药物可控时序释放的含多种药物的磷酸钙骨水泥粉末，由长期释放药物与磷酸钙骨水泥粉末中的一种成分沉淀共混后，再通过高分子包裹得到包裹物粉末；然后将包裹物粉末与磷酸钙骨水泥粉末中的其它磷酸钙成分以及前期释放药物直接混合制得，或者将包裹物粉末与前期释放药物与磷酸钙骨水泥粉末中的另一种成分的沉淀共混物粉末及磷酸钙骨水泥粉末中的其它成分一起混合制得。该粉末可适合于骨缺损的填充与修复，而且所携载的前期释放和长期释放药物药物，可在骨缺损局部不同时序释放联合给药，并通过协同作用，增强疗效，促进骨愈合，提高临床骨缺损填充和修复的成功率，同时可降低药物对机体所产生的副作用，满足临床对骨填充修复材料的需求。
西南交通大学
2016-10-21
上海仪研YJ-0613G 全自动药物凝固点测定仪
YJ-0613G 全自动药物凝固点测定仪
本仪器按《中华人民共和国药典》2020年版四部 通则 0613凝点测定法要求设计制造，用于检测化学试剂及药物等凝固点。本仪器采用了模块化设计，检测部分采用了先进的传感器，主控部分采用工业级PLC系统，控制性能稳定，制冷采用高性能压缩机，具有降温速度快，使用寿命长等优点。本仪器采用工业控制屏操作，样品装好后，一键开启，自动往返式机械搅拌、自动显示温度曲线、自动判断凝固点、自动打印测试数据。本仪器配有加热和制冷，介质浴温控范围广。
一、技术参数
1、工作电源： AC220V±10% 50Hz
2、依据标准： 2020版中国药典
3、显示方式: 7寸工业级彩色液晶触摸屏，全中文操作界面
4、控制系统： 工业级PLC控制
5、冷浴温度范围： -40～80 ℃，分辨率 0.1 ℃ (也可以选配-70～80 ℃)
6、测温元件: 高精度温度传感器
7、工作单元： 单浴双孔（可独立可同时实验）
8、恒温浴液： 防冻液、水或酒精（依据恒温浴实验要求）
9、搅拌方式： 电机搅拌，60次/min
10、制冷方式: 压缩机制冷
11、数据输入: 触摸屏数据输入
12、数据输出: 微型热敏打印机，自动打印，打印快速、清晰
13、存储数据: 自动储存1000个测定结果，可随时查看或打印历史测试数据
14、环境温度: 5℃～30℃
15、相对湿度： 30～70%RH
二、性能特点
1、7寸工业级彩色触摸显示器，全中文操作界面，实时显示试样凝固点过程的温度曲线。
2、仪器自动搅拌，自动判断凝固点、自动打印测试数据。
3、采用高性能压缩机，低噪音、降温快。
4、采用高精度温度传感器，内置温度校正，检测结果可靠。
5、仪器浴槽为杜瓦瓶材质，耐低温和高温范围宽、
根据实验要求选用适合的温度来实验。
6、采用电机搅拌，特殊机械搅拌装置，搅拌均匀。
仪研智造（上海）药检仪器有限公司
2025-02-20
高效抗MRSA活性药物
已有样品/n该项目的具有抗MRSA活性的曲张链丝菌素（Streptovaricins）产生菌Streptomycesspectabilis M2017417具有完全自主知识产权。其所包含的曲张链丝菌素生物合成基因簇和通过基因定向改造所产生的新结构衍生物及其制备方法已申请国家发明专利。前期的研究结果已经显示曲张链丝菌素及其衍生物对金黄色葡萄球菌标准菌株、MRSA标准菌株，以及MRSA临床分离菌株均表现出高效的抑制活性。抗生素耐药性已成为当今公众健康的严重威胁，其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
武汉大学
2021-01-12
抗血小板聚集的药物
【发 明 人】 卞慧敏 ; 张启春 ; 赵越 ; 彭国平【技术领域】本发明涉及一种药物组合，是一种抗血小板聚集的药物【摘要】 本发明涉及一种抗血小板聚集的药物，包括药物的有效组分和辅料，其特征在于，药物中的有效组分为苹果酸、丁二酸和柠檬酸组成，所述的有效组分的重量比例为苹果酸2~4份、丁二酸1~3份和柠檬酸1~3份。
南京中医药大学
2021-04-13
过敏性疾病治疗药物
成果介绍三月项目的成功研发将有力推动治疗过敏性鼻炎，儿童抑郁症等技术创新点及参数市场上尚无同类药，自身免疫性疾病发病率高市场前景通过增加肠道微生物的多样性和多种益生菌的含量，从而调节肠道微生态的平衡，达到提高免疫力。利用药物医疗，靶向肠道微生物医疗。
东南大学
2021-04-13
化疗药物配药定量输入装置
本实用新型公开了一种化疗药物配药定量输入装置，定量计量管以及抽液机构，所述的定量计量管由呈螺旋状的透明材质的中空管构成，所述的定量计量管的上端设置有用于吸取化疗药物的针头，所述的定量计量管的上端管壁的侧壁面连接有通气管，所述的定量计量管的外壁面自上而下依次设置有若干用于量取液体容量的刻度线，相比传统的输液装置，本实用新型利用螺旋状的定量计量管，使得定量计量管的高度一定时，具有更长的长度，管内空腔较小，使得量取的刻度更精准，同时了利用中空管进行配药，本实用新型操作方便，定量输入化疗药物有效的防止药量控制不精准对患者正常细胞的损坏。
浙江大学
2021-04-13