本发明涉及一种利用噬菌体PhiX174的E基因和葡萄球菌核酸酶A基因转化制备鸭疫里默氏菌前菌影疫苗的方法与应用方法。该方案首先将噬菌体PhiX174的E基因和葡萄球菌核酸酶A基因通过柔性连接臂(Gly4Ser)3连接成串联基因，并进一步构建温控表达载体pBV-E-SN。将pBV-E-SN电击转化进入鸭疫里默氏菌原生质体，筛选阳性克隆28℃增菌培养。分离菌体加保护剂后分装、冷冻干燥。本发明所制备的活菌疫苗经饮水免疫，既可以刺激呼吸道和消化道黏膜的局部免疫，也可以激发体液免疫。

项目研究背景 ：江西省淡水鱼资源非常丰富，生产面广，量大，主要 经济鱼类约有 170 余种。目前，淡水鱼的产量正与日俱增，尽管江西省是 内陆水产品出口排位第一 ,然而出口的品种主要是鳗鱼、美国斑点叉尾鮰、 小龙虾等产品，江西的其它淡水鱼加工却一直未能跟上。 研究内容 ：该项目是以淡水鱼为原料 , 采用了渗透脱水干燥或直接干 制、其中使用了复合抗氧化剂 (自己研制 )防止油脂氧化、干燥脱去部分水

该成果以鸭肠炎病毒弱毒疫苗株C-KCE为载体，运用基因编辑技术细菌人工染色体技术，在UL26和UL27的基因间隙，快速、稳定、精准的插入高致病性禽流感病毒H5N1的主要免疫源性基因血凝素HA。HA蛋白随着C-KCE的复制高效的表达。从而构建了鸭肠炎病毒载体高致病性禽流感病毒基因工程二价疫苗。该基因工程二价疫苗能不但同时抵御高致病性禽流感病毒和鸭肠炎病毒的攻击，而且能有效阻止排毒和散毒。对高致病性禽流感的抵御更是免疫后三天达到100%保护率。有效解决了当前肉鸭饲养周期短，传统的高致病性禽流感病毒灭活免疫不能在饲养周期内产生高水平的抗体，起到保护作用的缺陷。因此，该基因工程二价疫苗不但能用在蛋鸭也能用于肉鸭，减少感染鸭肠炎病毒和高致病性禽流感的风险。 我国具有悠久的水禽养殖的历史，水禽在我们国民经济中占据着举足轻重的地位。水禽是禽流感病毒重要的自然宿主，严重危害了我国水禽养殖业的健康可持续发展。该研究成果能有效的解决水禽感染高致病性禽流感的难题，起到一针防二病，省时省力。还能减少反复免疫对水禽的应激次数。因此，该基因工程二价疫苗具有广阔的市场前景。 转化条件:需建立该产品的GMP生产线。 成果完成时间：2017年12月

本发明的目的在于提供了一种装载具有干扰素诱导活性的聚肌胞苷酸，并加入壳寡糖作为佐剂的鸭疫里默氏菌菌影疫苗。该方案首先构建温控表达载体，电转化入鸭疫里默氏菌原生质体，筛选阳性克隆后28℃增菌培养，然后42℃诱导裂解基因的表达，待OD600不再降低时，加入聚赖氨酸继续作用以充分裂解活菌，然后离心分离菌体。将干燥菌体与6mg/mL的聚肌胞溶液等比例混合，使聚肌胞包埋进入菌影内，然后加入2%壳寡糖水溶液搅拌形成均一的混合物，分装于西林瓶，冷冻干燥，即得到鸭疫里默氏菌新型菌影疫苗。本发明所制备的菌影疫苗经饮水免疫，既可以刺激呼吸道和消化道黏膜的局部免疫，也可以激发体液免疫，对机体的保护效果与注射免疫无明显差异。