本发明公开了一种无酶的葡萄糖电化学传感器及其检测方法，该无酶的葡萄糖电化学传感器包括由参比电极、对电极和工作电极组成的三电极体系，所述工作电极由对葡萄糖具有电催化氧化性能的材料制成；使用该无酶的葡萄糖电化学传感器检测葡萄糖的方法，包括如下步骤：(1)电化学预处理工作电极：施加高负电位；(2)电化学氧化葡萄糖：施加葡萄糖氧化所需电位；(3)电化学清洗工作电极：施加正电位。本发明可去除样品pH对检测结果的影响，使原本需要在碱性条件下进行无酶的葡萄糖检测，可在中性及酸性样品中的进行，并且具有电极稳定性好、灵敏度高、重复性好等优点，具有非常广阔的应用前景。

项目研究的背景及用途:乳酸片球菌素(pediocin)由乳酸片球菌产生，抗 革兰氏阳性细菌，具有作为广谱、无毒副作用和安全的天然食品防腐剂的巨大潜 力。 乳酸片球菌素用于食品保藏，可提高食品的保质期、货架寿命和安全性。 食品腐败变质和食源性疾病严重威胁食品安全，使用有效的食品保鲜和 防腐措施是保证食品安全的重要措施之一，其中由于乳酸菌产生的细菌素具有天 然和安全等特点，是国内外研究的热点。安全可靠、无毒副作用、高效的乳酸片 球菌素作为天然食品防腐剂的研究、开发和应用，将具有重要社会效益，同时有 关知识产权的转让将取得可观经济效益，有良好的产业化发展前景。天津大学科技成果选编 技术原理及流程:本项目以自我研制的培养基为主要原料，辅以蔗糖和 无机盐类，制备发酵用培养基，以乳酸片球菌素高产菌种为种子菌经液态发酵工 艺生产乳酸片球菌素。然后通过离心、反向层析、高压液相色谱、凝胶过滤、离 子交换层析、膜过滤等技术分离提取和精制乳酸片球菌素。 成果水平及主要技术指标:技术处于国内外先进水平。 市场分析及效益预测:目前国内市场上尚无乳酸片球菌素的出售，研究 成功后可以及早占领市场，有极大的市场空间，因此盈利前景极其乐观。

1、成果来源、成果被评价及认定（发明专利授权号）等情况 本项目来源于国家“十二五”科技支撑计划项目“大宗粮食绿色加工技术与 产品”中课题“玉米淀粉加工关键技术研究与示范（2012BAD34B07，479 万元， 研究起止时间：2012.01-2014.12）”和国家自然科学基金“酶法选择性合成单一 类型环糊精的控制策略研究（31101228，25 万元，研究起止时间：2012.01- 2014.12）”，属于农产品深加工科学技术领域。本项目累计申请发明专利 7 项（1 项获授权），发表论文 11 篇（8 篇被 SCI 收录），于 2015 年 7 月通过中国粮油学 会鉴定，获国际先进评价。 2、主要技术内容、作用、对行业的意义，获奖情况 CGT 酶生产环糊精最不利的条件之一是产物特异性差，给产物的分离纯化 带来很大不便。同时，CGT 酶存在的另一大缺陷是其热稳定性较差，由于在环糊 精工业化生产中，底物淀粉首先要经过高温糊化、液化处理，然后降温至适当温 度进行环化反应，若 CGT 酶能够适应更高的反应温度，势必有助于提高反应效率， 因此，有必要改善 CGT 酶的热稳定性，提高其催化效率，进而有效降低环糊精生20 产成本。本项目主要是通过改善 CGT 酶产物特异性和热稳定性，提高该酶的使用 性能，将其应用于环糊精的工业化生产中，能显著降低环糊精的生产成本，促进 环糊精在各个领域的广泛应用。因此，随着环糊精在食品、医药等领域中的应用 越来越广阔，开发改善 CGT 酶使用性能的关键技术显得尤为重要，具有很好的推 广应用前景。 3、成果的技术指标、创新性与先进性 本项目在长期从事淀粉生物转化研究的基础上，针对环糊精工业化生产过程 中 CGT 酶的产物特异性和热稳定性较差问题，通过深入研究和不懈努力，逐步改 善了 CGT 酶的产物特异性和热稳定性，突破了关键技术，并实现了具有理想产物 特异性和热稳定性的β-CGT 酶突变体在酶法生产β-环糊精中的应用。该酶使用 性能改善易操作，具有很好的应用价值，技术位于国际领先水平。与国内外同类 技术相比，具有以下创新： ①针对 CGT 酶产物特异性较差的问题，确定了 CGT 酶的产物特异性与其一级 结构的相关性，获得构建具有理想产物特异性的 CGT 酶突变体的简单可行方法， 为从本质上改善 CGT 酶的产物特异性提供理论基础； ②针对 CGT 酶热稳定性较差的问题，采用定点突变技术阐明了重要氨基酸残 基对 CGT 酶热稳定性产生影响的规律，获得了构建具有理想热稳定性的 CGT 酶突 变体的简单可行方法，为从根本上改善 CGT 酶的热稳定性打下了基础； ③ CGT 酶使用性能的改善方法简单易行，所得到具有理想产物特异性和热 稳定性的酶突变体可直接应用于β-环糊精的工业化生产，能提高β-环糊精的得 率，降低β-环糊精的生产成本。 

成果创新点 颗粒溶解素（granulysin, GNLY）是一种存在于人体 细胞毒 T 淋巴细胞（cytotoxic T lymphocytes, CTLs）。 项目组首次发现 GNLY 在体外可显著增加耐药金黄色葡 萄球菌 MRSA 对氨苄西林和头孢菌素的敏感性；对氨苄西林 抗铜绿假单胞杆菌也有抗菌增敏作用。而且，GNLY 具有良 好的安全性和低免疫原性，是一种理想的富有开发前景的 候选抗生素增效剂。

颗粒溶解素（granulysin, GNLY）是一种存在于人体细胞毒 T 淋巴细胞（cytotoxic T lymphocytes, CTLs）。 项目组首次发现 GNLY 在体外可显著增加耐药金黄色葡萄球菌 MRSA 对氨苄西林和头孢菌素的敏感性；对氨苄西林抗铜绿假单胞杆菌也有抗菌增敏作用。而且，GNLY 具有良好的安全性和低免疫原性，是一种理想的富有开发前景的候选抗生素增效剂。 

本发明涉及一种无酶情况下检测葡萄糖浓度的修饰电极的制备方法及应用，首先将碳纳米管修饰在玻碳电极的表面，再通过循环伏安法将铁氰酸镍电化学沉积在碳纳米管修饰的电极表面，得到碳纳米管和铁氰酸镍复合修饰的修饰电极；该修饰电极在无酶情况下对葡萄糖溶液有良好的响应，其对葡萄糖浓度检测下限是1.6×10-6mol/L；当葡萄糖浓度在3.32×10-6M/L～4.95×10-3M？mol/L范围内时，所得的响应电流与葡萄糖的浓度有良好的线性关系，并且所制备电极有良好的抗干扰性能。

由于人们对食品安全性的认识和要求日益提高，多数国家开始大力限制化学防腐剂的 使用，而我国也在防腐剂方面加大了限制力度。乳酸片球菌素（Pediocin）是由乳酸片球菌 （Pediococcus acidilactici）产生的一种类似于Nisin的短肽。Pediocin与Nisin的物理化学性质和用 途类似，耐高低温、耐酸、在人体中可降解，因此安全无毒，且方便使用。Pediocin的抗菌效 果与Nisin类似，但在抗菌谱上有较大差异，能抑制包括白色念珠菌、大肠杆菌、金黄色葡萄 球菌、肉毒芽孢杆菌、耐热腐败菌等在内的大量致病菌。因此Pediocin可以单独用在食品防腐 和医疗上，同时也可以与Nisin互相补充，增强抑菌效果，具有极高的使用价值和应用前景。 ●所属领域：生物 ●项目成熟度：小试 ●应用前景： 实验发现，所产的Pediocin对包括白色念珠菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肉毒芽孢杆 菌、耐热腐败菌等在内的大量致病菌都有显著的抑制效果，因此，具有很高的应用前景；目前 片球菌LH31的菌体密度最高可达OD（600nm）20左右，而Pediocin的效价由最初的1500AU/ml 提高到18000AU/ml，高于Nisin目前的发酵单位。目前，国内外都还没有实现产业化，其类似 产品Nisin在我国已经实现了产业化（年产5吨左右，全球产量最大），年产值10亿元人民币。

所属领域：生物技术与医药成果介绍：自主开发溶析-盐析复合结晶技术，尤其适用于热敏性、生物活性、多羟基类物质的结晶专利情况：申请成熟度：量产创新要点：结晶过程无需外加热量，节能降耗减排，操作条件温和，可有效保护生物活性

一、成果简介 我国葡萄酒主产区多属于大陆季风性气候区，完全不同于欧美国家的地中海气候或海洋性气候条件，这就造成了在酿酒葡萄的品种选择、栽培模式和浆果成熟控制上明显有别于欧美地区。为此,本项目在多年理论研究 的基础上，开发了从优质酿酒葡萄栽培到葡萄酒全程质量控制技术，针对产区气候特点，进行葡萄架式选择，水肥管理、树形管理、采收标准、配套工艺参数等方面，并在多个产区实施，取得令人瞩目的成果。此外，

一、成果简介 葡萄与葡萄酒风味物质主要指与颜色、滋味、涩感、香气等相关的化学组分，它们是决定葡萄与葡萄酒感官质量的物质。风味物质组成与含量不仅取决于葡萄品种、产地和年份，而且受葡萄酒酿造和陈酿工艺等的显 著影响。本项目构建了120多种葡萄与葡萄酒酚类物质、120多种香气物质、40种橡木香气组分的质谱信息库， 建立了高效精准的定性定量分析方法；此外，本项目还建立了快速准确的香气前体物的