腈水解酶、腈水合酶在高值精细化工产品的绿色合成中有较高的利用价值。应用代谢工程育种和高通量筛选等技术选育高效生产菌种，提高酶的发酵产量及催化效率；解决腈水解酶的催化效率、稳定性与实用性的共性关键技术问题，改造或构建高效的工程菌株；研究腈水解酶规模化生产的发酵与分离纯化技术，研究腈水解酶的固定化等应用工程技术，实现该酶在化工、医药、饲料等工业领域中的应用。

湖南生物机电职业技术学院是一所具有百余年办学历史的全日制公办普通高等院校，是拥有单独招生资质的湖南省卓越和湖南省示范性高职学院。世界著名杂交水稻专家袁隆平院士为学院名誉院长。 学院前身“湖南私立修业学堂”始建于1903年。民主革命先驱黄兴、教育家徐特立、开国领袖毛泽东是学院早期教师的杰出代表，培养了革命先烈毛泽覃、国家领导人王首道、“国歌之父”田汉等一大批国家栋梁之才。 学院占地面积2470亩，分两区一场一基地，即东湖校区、马坡岭校区、产学研示范场和超级杂交水稻生产示范与人才培养基地。总建筑面积26万平方米，有图书馆2座，带400米标准跑道的足球运动场2个，建筑面积8500平米的大型体育馆1个，篮球、羽毛球、乒乓球、网球等场地30多个，各类实验实训场所117个，教学和生活服务设备设施完备。现有教职工976人，其中教授32名、副教授185名，“双师型”教师占90%以上。全国农业职业教育教学名师6名、国内访问学者14人、湖南省新世纪121人才工程人选3名、省级专业带头人9名，省级优秀教学团队4个。获省级以上教学成果奖39项，省科技进步奖7项，全国农业丰收奖2项，专利98项。 学院设植物科技学院、动物科技学院、机电工程学院、车辆工程学院、经济贸易学院、信息技术学院、人文科学学院、思想政治理论课教学部、体育与艺术课教学部、继续教育学院等八院两部，现有全日制在校学生1万余人。开设农林、制造、车辆、财经、商贸、食品、人文、电子信息八大类共40个专业。有中央财政支持建设专业2个，中央财政支持建设基地1个，国家级精品资源共享课1门，省级示范性特色专业1个，省级特色专业2个、精品专业4个、教改试点专业5个，省级重点实训(教师培训)基地5个，省级校企合作基地1个，省级精品课程2门。 学院与隆平高科、新五丰、三一重工、中联重科等国内外知名企业建立了深层次校企合作关系，建有长沙都市花乡、动物医院、百通机电公司、机电驾校、机动车检测中心、生物产品检测中心、现代农机产品展示推广中心等7个院内生产性实训基地和400多个院外实习实训基地。建有兽医院、畜牧兽医应用技术研究所、食品研究所、藤本植物研究所等技术服务平台，设有国家职业技能鉴定所、国家计算机信息高新技术考试站等职业技能鉴定机构，拥有“农业部现代农业技术培训基地”、“农业部管理干部学院湖南培训基地”、“湖南省现代农业技术培训中心”、“湖南省退役士兵技能培训职业教育基地”、“芙蓉区大学生创业辅导培训基地”等培训平台，是解放军直招士官定点院校，“中国现代农业装备职业教育集团”和“湖南现代农业职业教育集团”的牵头组建和理事长单位。 学院坚持依托行业、对接产业、办好专业、融入企业、服务农业，走产学研深度结合、人才培养与社会服务协同发展的道路。近几年，学院先后获得“全国绿化模范单位”、“全国六五普法先进单位”、“国家级语言文字规范化示范校”、“国家示范职业技能鉴定所”、“全国普通高等学校毕业生预征工作先进集体”、“全国青少年农业科普示范基地”、“全国教科研先进单位”、“全国十佳优秀农民创业培训基地”、“湖南省文明标兵单位”、“湖南省示范性高职学院”、“湖南省依法治校示范校”、“湖南省公共机构节能示范单位”、“湖南省园林式单位”、“湖南省职业教育先进单位”、“湖南省普通高等学校就业工作先进集体”等荣誉称号。学生参加全国职业院校技能竞赛等获全国一等奖十多项，毕业生当年就业率均在95%以上。国内多家权威媒体对学院的改革发展均进行了专题报道。 学院扎根于深厚的文化底蕴之上，遵循“为时养器，器为时用”办学宗旨，励练“务本崇实，修德精业”校训，办学特色和示范作用日益凸现。当前，正在努力建设一流职院，打造一流队伍，培育一流作风，建立一流机制，争创一流业绩，朝着全国一流高职院校的目标稳步迈进!

可以量产/n针对当前工业发展对脂肪酶的大量需求与脂肪酶实际表达水平较低 的技术瓶颈，突破了脂肪酶超高效表达技术关键，建立了真菌脂肪酶高 效表达技术平台，构建的米根霉脂肪酶基因工程菌 10L 发酵酶活力可达 40,000U/ml 以上，为当前报道的最高水平，具有极强的国际竞争力。产 品可用于油脂水解、转酯，食品加工、烘焙，生物柴油制备，饲料添加 剂，再生纸脱墨等广泛用途。建设其发酵生产线预计需要 800-1000 万元，经济效益可观。米根霉脂肪酶可用于油脂水解、转酯，食品加工、烘焙，生物柴油

油脂精炼过程中，脱胶是非常重要的一步工序，脱胶效果的好坏直接影响到油脂精炼的效率和最终产品的质量。传统的脱胶方法常存在产品质量不稳定、消耗大、得率低、“三废”排放量大等问题。酶法脱胶工艺是现代工业生物催化技术在传统油脂行业中的应用，是对现有化学或物理脱胶工艺的改进，以提高其经济性和环保性，有着广泛的发展前景和重要的经济和社会价值。本技术以自行筛选所得菌株BIT-18表达的磷脂酶为对象，开发了该磷脂酶在大豆油、菜籽油等常见油脂酶法脱胶中的应用，已完成了实验室工艺优化，建立了适于工厂规模油脂酶法脱胶工艺

糖化酶是糖化工业的重要酶制剂，但生产上的主要问题是：酶活力低、没有常温条件下的酶产品（使得糖化工艺中需要消耗大量能源）。利用定向进化技术获取较低温度下活力提高数倍~数十倍的新的酶分子、并确定新基因序列，转化受体菌。 我们的技术优势：基因分离技术是我们的优势，已报道全长基因序列15条，在天津基金资助下最近已克隆了糖化酶基因。定向进化是我们目前的主要研究方向之一，在留学回国科研启动基金资助下对谷胱苷肽-S-转移酶脱氯活性进行提高，已有研究进展。

全自动酶标仪318C+广泛用于各大高校科研机构、技术质量监督局、动植物检疫及食品饲料行业等，除开展血液学、免疫学、肿瘤免疫学、传染病免疫学、TORCH感染免疫学、基因检验项目外、还可以对食品安全三聚氰胺、黄曲霉素、农药残留、兽药残留等所有采用酶联免疫吸附试验（Elisa）进行项目检验，并且有相应版本的软件支持。   产品特点： 1、内置嵌入式系统，无需外接电脑即可操作、存储、打印; 2、测量模式：单波长检测，双波长检测，两点法，动力学法，酶抑制率，终点法、速率法。 3、*可选择吸光度、Cut-Off定性计算、单点定标、折线回归、线性回归、指数回归、对数回归、双对数回归、log-logit、幂回归、四参数回归、酶抑制率等计算方法；  4、在同一板上可进行多至12个不同项目的测试，并可同一板检测定性和定量项目。 5、*全面完善的质控功能，包含westguard多规则质控，即刻法质控等多种质控图及质控参数计算，具有质控报警功能。   技术参数： 1、*波长范围： 400-800nm 2、*滤光片配置：10个滤光片位置，标配405nm、450nm、492nm、630nm,选配6定制波长 3、吸光度范围：0.000―4.000A 4、*光通道数：8通道光路检测，另设一个独立参比通道（选配） 5、示值稳定性：≤±0.002A或≤0.5%T/10min。 6、示值误差（准确性）：≤±0.005A或±0.2%T。 7、重复性：≤0.2%或≤0.2%T。 8、灵敏度：≥0.01（L/mg）。 9、通道差异：≤0.01A。 10、波长示值误差：±1nm 11、半宽度：≤8nm 12、分辨率：0.001A（显示），0.0001A（内部计算） 13、*读板速度：单波长≤3秒/96孔，双波长≤6秒/96孔 14、振板功能：速度和时间可调 15、光源类型：进口卤钨灯 16、板条类型：标准96孔或其他型酶标板、条 17、适用孔型：平底、U型和V型 18、显示方式：7寸彩色液晶显示屏显示 19、输入方式：触摸屏输入，可选配鼠标和键盘 20、打印：内置热敏打印机，可外接打印机 21、数据储存：200,000个测试数据，500个以上测试项目（可扩展） 22、接    口： USB(A)口、USB(B)口、串口、并口 23、使用环境：温度5-40℃；湿度15%-80% 24、电源电压：220V±10%，50/60Hz 25、体积：475mm×350mm×210mm（长×宽×高） 27、重量：11.5Kg

低聚异麦芽糖作为一种健康糖源和功能性食品添加剂广泛应用于医药、食品和饲料添加剂行业中。在低聚异麦芽糖的制备过程中，α-葡萄糖苷酶的转糖苷作用是关键步骤。目前国内用于低聚异麦芽糖生产的α-葡萄糖苷酶大多为进口品。本项目获得的-葡萄糖苷酶生产菌株发酵液酶活达到 11 U/mL，为国内外现 有报道中的最高水平，发酵工艺简单易控。重组菌发酵液经过滤除菌并浓缩后可以直接作为酶液进行转化。酶转化生产低聚异麦芽糖转化率与进口酶相似，可以替代进口品。 

本技术首先根据鸭胸软骨的化学组成设计了一种用于提取鸭硫 酸软骨素的新型复合蛋白酶的基础配方，并利用复配酶制备鸭硫酸软骨素，其 工艺包括鸭胸软骨骨粉的制备、鸭胸软骨骨粉的酶解提取、蛋白质的沉降、硫 酸软骨素粉末四个步骤。本发明采用了复配酶解法提取鸭胸软骨的硫酸软骨素， 采用新型复合蛋白酶和胰蛋白酶复配，去掉了碱提这一步，在复配酶使用上也 进行了优化，其收率比其它方法提高了 20%左右，产品纯度达到 90%~95%。用复 合酶代替稀碱或浓碱解离软骨能够大大降低对环境的污染，并且可以有效缩短 生产周期、降低生产成本、增加了产品收率、提高产品质量，填补了该领域的 空白。 技术优点或者效益预测:硫酸软骨素(Chondroitinsulfate，CS)是 D-葡萄糖 醛酸和 N-乙酰氨基半乳糖以β-1,4-糖苷键连接而成的重复二糖单位组成的酸 性黏多糖。硫酸软骨素具有抗凝血、抗炎症、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、降血 脂、防止动脉粥样硬化、调节体内水分、清除自由基和延缓衰老等多种生理功 能，可应用于食品、药品、各种保健品及高档化妆品中。我国是全球硫酸软骨 素产量最大的国家，占全球产量的 80%以上，年平均产量多于 4000 吨；我国硫 酸软骨素主要出口到美国、欧洲、日本等地，其中美国作为我国硫酸软骨素第 一大出口市场，出口份额约占 50%。所以，随着硫酸软骨素生物活性功能不断研 究及其应用领域的不断扩展，硫酸软骨素用途越来越广，具有广阔市场应用前 景。

一、成果简介 小麦胚芽、玉米胚芽和米糠等粮食加工副产物具有丰富的营养，是油脂类或焙烤企业的重要食材。燕麦、小米、薏仁米等杂粮营养丰富、保健作用明显。这些都是消费者日常生活中不可或缺的健康食材。但是，这些 产品有一个共同的特点就是不饱和脂肪酸含量高，脂肪氧化酶活性高，产品极易品质劣变甚至氧化酸败。例如，胚芽或米糠如果不进行灭酶处理，在30℃条件下，24小时即会氧化酸败。燕麦粉的保质期不会超过15

CRISPR/Cas9 (clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated proteins)是目前最常用的基因编辑工具酶，在科研领域被广泛应用，而在临床方面的应用因为其脱靶活性一度停滞不前。它通过guide RNA（gRNA）与靶向DNA序列的配对，从而将Cas9锚定在靶向基因并诱导产生DNA双链断裂（DSB）。在基因编辑诱发的DSB的修复过程中，一定几率会产生基因突变或者外源DNA片段的插入，从而达到基因编辑的目的。在实际应用过程中，一个好的基因编辑酶Cas9需要同时满足高效切割靶位点、低脱靶活性和低染色体异常三个特点。目前在这三个方面，有一部分基于PCR的方法用于估算基因编辑效率，但其结果可靠性有待提高；有一些基于高通量测序的方法可以在体内或者体外检测基因编辑酶的脱靶活性；尚无系统的可定量的测量基因组异常结构的方法。本项目开发了一种新的方法，可以用来同时定量检测Cas9编辑效率和脱靶活性以及编辑引起的染色体异常结构，即primer-extension-mediated sequencing（PEM-seq）。这是对基因编辑和DNA损伤修复等领域都有巨大促进作用的新技术。与此同时，该项目包括了该团队利用PEM-seq筛选出的一个相比于现有Cas9变体具有更低脱靶活性且与野生型Cas9切割效率相当的Cas9变体further enhanced Cas9 (FeCas9)。