2020年4月29日，《自然》杂志在线发表了清华大学医学院、免疫学研究所祁海课题组、上海科技大学胡霁课题组、清华大学麦戈文脑科学研究所钟毅课题组的合作论文，题目是“受行为影响的脑活动调控体液免疫应答”（Brain control of humoral immune responses amenable to behavioural modulation）。通过小鼠模型，该研究发现了一条从大脑杏仁核和室旁核CRH神经元到脾内的神经通路——这条通路促进疫苗接种引起的抗体免疫应答，并可通过响应躯体行为刺激对免疫应答进行不同调控。据作者介绍，这是迄今发现的第一条解剖学明确、由神经信号传递而非内分泌激素介导的、中枢神经对适应性免疫应答进行调控的通路，它的发现为神经免疫学研究拓展出了一个新方向。 “勤動”与增强免疫的中枢神经核团与环路 首先，研究者开发了一种新型去除小鼠脾神经的手术，发现这种小鼠在疫苗接种后所能产生的浆细胞（抗体分泌细胞）数量有明显缺陷，暗示了脾神经冲动信号对B细胞应答有促进作用。通过药理学、遗传学实验，他们继而发现B细胞表达乙酰胆碱9受体对脾神经的这个促进作用不可或缺。通过体内细胞剔除实验，研究者发现在肾上腺素能的脾神经和需要感知乙酰胆碱的B细胞之间，最可能起到了“换元”作用的，是新近发现的可感受去甲肾上腺素而分泌乙酰胆碱的T细胞。 进一步，作者通过伪狂犬病毒逆行追踪，发现脾神经与室旁核（PVN）、中央杏仁核（CeA）有连接。这两个区域的功能与应激、恐惧反应紧密相关，而两处共有的一类神经元是表达CRH（促肾上腺皮质激素释放激素）的神经元。CRH神经元是掌控垂体-肾上腺轴的上游神经元，其激活可导致肾上腺大量释放糖皮质激素，调整机体应激，抑制免疫系统活动。这个已知抑制免疫的内分泌功能，不能解释作者看到的免疫增强的现象。但会不会CRH神经元还可以直接操控脾神经，通过神经通路传导免疫增强的信号来促进浆细胞的产生呢？ 为检验这一假说，研究者通过光遗传学实验，发现刺激CeA/PVN的CRH神经元后几秒钟之内就会记录到脾神经的电信号明显加强，证明CeA/PVN与脾间的确有通路连接（图1）。进而，作者通过CRH神经元剔除、DREADD化学遗传学抑制及激活的方法，证明 CeA/PVN CRH神经元活性对应调控了脾内B细胞应答产生浆细胞的过程。 图1 光遗传学实验证明CeA/PVN CRH 神经元与脾神经的连接 自主神经活动可以受外界环境及行为的影响。那么，有没有行为可以刺激这条脑-脾神经轴从而增强免疫应答呢？作者通过监测小鼠在不同行为范式下 CeA/PVN 的 CRH 神经元活动发现，一个他们新开发的“孤立高台站立”（elevated platform standing，如图2和视频）行为可以同时激活这两个核团的CRH神经元。 自主神经活动可以受外界环境及行为的影响。那么，有没有行为可以刺激这条脑-脾神经轴从而增强免疫应答呢？作者通过监测小鼠在不同行为范式下 CeA/PVN 的 CRH 神经元活动发现，一个他们新开发的“孤立高台站立”（elevated platform standing，如图2）行为可以同时激活这两个核团的CRH神经元。 图2 孤立高台站立模式图 更重要的是，抗原接种后第二周里，每天经历这个行为范式两次，小鼠抗原特异的抗体就可以增加约70%。这种行为增强抗体应答的效果，依赖于CRH神经元、依赖于脾神经、并且需要B细胞表达的乙酰胆碱受体。虽然高台站立可以看作是一种应激范式，但并非所有导致应激状态的行为都能增强免疫。作者测试了神经生物学研究中常用的捆绑模型，发现这一范式更强烈而持久激活PVN的CRH神经元，但抑制 CeA 的 CRH 神经元，致使机体持续产生高水平的糖皮质激素，对免疫应答产生了抑制作用。 至此，研究者在这项研究里鉴定、证明了一条对适应性免疫具有增强功能的脑-脾神经轴，揭示了CRH神经元的双重免疫调节功能——经典已知的垂体-肾上腺神经内分泌免疫抑制作用和新发现的经神经环路直接作用于脾的免疫增强作用。 神经免疫学方兴未艾，目前的主要方向包括：以CNS和外周神经为靶器官，研究组织固有的小胶质细胞和招募而至的免疫细胞在系统稳态与病变中的作用；研究中枢及外周神经与淋巴器官和屏障组织（肠上皮等）里固有免疫细胞（巨噬细胞、ILC等）的信号交互与功能互调等。刚刚发表的这一新工作，使研究者认识到淋巴细胞介导的适应性免疫应答也可以受到中枢-外周神经环路的直接调控，以及通过躯体行为正向调节免疫应答的一个生物学基础。 针对最后一点，祁海特别指出，锻炼身体（躯体运动）可以增强“免疫力”，这个几乎所有人或多或少都接受的常识性结论，其背后的科学依据其实远不清楚。他认为，他们发现的脑-脾轴可能为此提供了一个环路方面的解释。我们适度锻炼，可能如同小鼠的EPS，恰到好处地刺激了CeA和PVN的CRH神经元，增进了浆细胞和抗感染抗体的生成。相反，频繁马拉松跑后人们易于感冒，可能是过度应激导致的免疫抑制超越了免疫增强效果。祁海猜测，未来通过神经免疫学的进一步研究，应该可能在特定神经元、神经环路水平定量描述、评价不同锻炼方式、不同躯体运动形式、乃至不同“冥想”“禅修”过程对免疫系统的影响，从而帮助我们为加强“免疫力”而正确选择锻炼或其他增进健康的方式提供更明确的科学依据。这也是题图“勤動”所表达的愿景。 清华-北大生命科学联合中心2013级博士生张旭、清华生命学院2016级博士生雷博、上海科技大学2015级博士生袁媛、清华PTN项目2016级博士生张厉为本文的共同第一作者。该得到科技部和国家自然科学基金委科研基金的支持。祁海课题组还得到北京市科委、清华-北大生命科学联合中心、清华大学免疫学研究所、北京生物结构前沿研究中心、北京市慢性病免疫学研究重点实验室的支持。钟毅课题组得到清华麦戈文脑科学研究所的支持。另外，中国科学院武汉数学物理研究所徐福强课题组、清华大学药学院廖学斌课题组、首都医科大学孙文智课题组为本研究的顺利开展和完成作出了重要贡献。 论文链接： https://www.nature.com/articles/s41586-020-2235-7

研究团队基于cGAMP设计制备了一种肺部仿生纳米颗粒（PS-GAMP）来模拟流感病毒肺部感染，发现其能够在不破坏肺部表面活性剂（PS）和肺泡上皮屏障（AEC）的情况下，激活AMs和AECs，促进疫苗产生高效的体液和CD8+ T细胞保护性免疫反应，以抵抗多种异型流感病毒的攻击。研究结果提示AECs在产生广泛的交叉保护以抵御各种流感病毒方面具有十分重要的作用，表明PS-GAMP可能是一种“通用”流感疫苗的潜在粘膜佐剂。

各种病毒性疫病在世界各地 不断爆发，造成了惨重的损失， 并对人类健康造成了严重威胁。 由于病毒的快速变异，一般的疫 苗会丧失保护作用。

已有样品/n成功构建了新型黑猩猩型腺病毒AdC68和AdC7作为疫苗载体，以此为基础，分别研制了两种新型的埃博拉疫苗，即AdC68-EBOVgp、AdC7-EBOVgp，并在小鼠、非人灵长类动物中都验证其免疫原性及保护性效果。对于埃博拉疫情的控制，目前尚无有效手段，以黑猩猩型腺病毒为载体的新型埃博拉疫苗的研发成功不仅将满足患者的需求，而且将解决这一重大的公共卫生问题，产生巨大的经济效益和重大的社会价值。

本发明公开一种制备热稳定疫苗的方法，特别涉及一种联合使用基因工程和仿生矿化技术制备热稳定疫苗的方法。本发明提供一种利用基因工程技术在疫苗表面引入具有诱导无机物矿化能力的多肽的方法；(1)构建疫苗的基因克隆；(2)将多肽的核酸序列插入疫苗基因克隆中，得到重组克隆；(3)将重组克隆在细胞或大肠杆菌内表达，得到具有自矿化能力的疫苗。本发明还一种制备钙矿化上述制得的具有自矿化能力的疫苗的方法；(1)向有酸根的疫苗液加入Ca2+离子；(2)将体系进行孵育，获得磷酸钙包被疫苗。本发明通过疫苗矿化，高效地解决了疫苗运输和保存中的热失活现象，显著降低疫苗的财政支出，在新型热稳定疫苗生产中有很好的应用。

类风湿关节炎（RA）是临床最常见的高致残性自身免疫病之一，以慢性破坏性关节病变为主要特征，并涉及全身多个脏器。在我国，RA患病率为0.28%，患病人数500万以上，诊误诊误治率高达42.5%，未经治疗者 3 年致残率高达75%，是导致肢体残疾，尤其是女性致残的首要疾病，严重影响家庭、经济发展以及社会和谐。 目前临床常用的RA治疗药物多为对症治疗，患者需要联合用药、终身服药。这些药物或存在副作用，或存在价格昂贵，患者负担重，给药途径受限以及个体反应差别大等问题。开发更加安全、有效、费用较低的新药是目前临床亟待解决的问题。B细胞在RA发病中发挥重要作用，靶向清除B细胞在RA治疗中取得了重大临床成功，但患者面临感染、疫苗接种无应答等风险。 在此基础上，本团队通过分离并进一步灭活RA致病性B细胞，开创性研发了一种B细胞治疗性疫苗，用于皮下注射治疗RA。结果显示，该B细胞疫苗在关节炎模型小鼠中显示了显著的治疗效果，可有效控制关节炎症状，减轻骨侵蚀及关节破坏。此外，该B细胞疫苗对RA患者外周血单个核细胞也展示了明显的抑炎活性，可以降低炎性细胞因子IFN-γ和IL-17A的分泌。

创制出了一种基于细胞悬浮培养技术的血清 4 型禽腺病毒灭活苗。通过悬浮培养技术，该血清 4 型禽腺病毒效价可达到 109 TCID50/ml，是传统鸡胚培养获得的病毒效价的 100 倍。动物免疫效果表明，免疫后 21 天攻毒，非免疫对照组鸡均全部死亡，观察期内发病鸡多表现精神沉郁、羽毛粗乱、食欲不振，剖检可见心包积液、肝脏病变等相关组织病变；免疫组均为 100%保护，观察期内未见任何异常现象，剖检未见腺病毒相关组织病变。高效价血清 4 型禽腺病毒灭活苗的研制可大大降低疫苗的成本，提供疫苗免疫效果，具

猪圆环病毒2型（PCV2）严重危害世界养猪业的健康发展，PCV2广泛分布于世界各地。迄今，世界范围内只有灭活疫苗可资利用，尚无活疫苗面市。研究团队应用基因工程技术，研制成功嵌合型猪圆环病毒活疫苗（C1-233株），该疫苗病毒的滴度、安全性、免疫效力等关键指标优于国外相应的文献报道（国内外无相应产品面市，无法与其产品对照）。该疫苗的制苗毒株应用自主建立的毒株构建方法制备，制苗毒株由研究团队自行分离鉴定，具有完全的自主知识产权。基于实验室前期研究结果，研制的嵌合型猪圆环病毒活疫苗（C1-233株）免疫效

圆环病毒 2 型（PCV2）严重危害世界养猪业的健康发展， PCV2 广泛分布于世界各地。迄今，世界范围内只有灭活疫苗可资利用，尚无活疫苗面市。研究团队应用基因工程技术，研制成功嵌合型猪圆环病毒活疫苗（C1-233 株），该疫苗病毒的滴度、安全性、免疫效力等关键指标优于国外相应的文献报道（国内外无相应产品面市，无法与其产品对照）。该疫苗的制苗毒株应用自主建立的毒株构建方法制备，制苗毒株由研究团队自行分离鉴定，具有完全的自主知识产权。基于实验室前期研究结果，研制的嵌合型猪圆环病毒活疫苗（C1-233

细菌脂多糖可刺激宿主免疫系统产生免疫反应，可利用这一性质开发既无毒性又能刺激免疫系统的类脂 A 分子疫苗佐剂。近年美国 Corixa 公司已开发出可用于乙肝病毒疫苗和过敏治疗的单磷酸类脂 A（MPL）疫苗佐剂。目前 MPL 生产方法是从沙门氏菌的突变株中提取类脂 A 并加以化学处理。本项目根据类脂 A 分 子的合成机理，通过基因工程技术将 pagL、lpxE 和 pagP 单启动子串联共表达，将大肠杆菌中类脂 A 的结构改造成为 MPL，菌株稳定性好，生产方法简单高效。