油脂精炼过程中，脱胶是非常重要的一步工序，脱胶效果的好坏直接影响到油脂精炼的效率和最终产品的质量。传统的脱胶方法常存在产品质量不稳定、消耗大、得率低、“三废”排放量大等问题。酶法脱胶工艺是现代工业生物催化技术在传统油脂行业中的应用，是对现有化学或物理脱胶工艺的改进，以提高其经济性和环保性，有着广泛的发展前景和重要的经济和社会价值。本技术以自行筛选所得菌株BIT-18表达的磷脂酶为对象，开发了该磷脂酶在大豆油、菜籽油等常见油脂酶法脱胶中的应用，已完成了实验室工艺优化，建立了适于工厂规模油脂酶法脱胶工艺

糖化酶是糖化工业的重要酶制剂，但生产上的主要问题是：酶活力低、没有常温条件下的酶产品（使得糖化工艺中需要消耗大量能源）。利用定向进化技术获取较低温度下活力提高数倍~数十倍的新的酶分子、并确定新基因序列，转化受体菌。 我们的技术优势：基因分离技术是我们的优势，已报道全长基因序列15条，在天津基金资助下最近已克隆了糖化酶基因。定向进化是我们目前的主要研究方向之一，在留学回国科研启动基金资助下对谷胱苷肽-S-转移酶脱氯活性进行提高，已有研究进展。

全自动酶标仪318C+广泛用于各大高校科研机构、技术质量监督局、动植物检疫及食品饲料行业等，除开展血液学、免疫学、肿瘤免疫学、传染病免疫学、TORCH感染免疫学、基因检验项目外、还可以对食品安全三聚氰胺、黄曲霉素、农药残留、兽药残留等所有采用酶联免疫吸附试验（Elisa）进行项目检验，并且有相应版本的软件支持。   产品特点： 1、内置嵌入式系统，无需外接电脑即可操作、存储、打印; 2、测量模式：单波长检测，双波长检测，两点法，动力学法，酶抑制率，终点法、速率法。 3、*可选择吸光度、Cut-Off定性计算、单点定标、折线回归、线性回归、指数回归、对数回归、双对数回归、log-logit、幂回归、四参数回归、酶抑制率等计算方法；  4、在同一板上可进行多至12个不同项目的测试，并可同一板检测定性和定量项目。 5、*全面完善的质控功能，包含westguard多规则质控，即刻法质控等多种质控图及质控参数计算，具有质控报警功能。   技术参数： 1、*波长范围： 400-800nm 2、*滤光片配置：10个滤光片位置，标配405nm、450nm、492nm、630nm,选配6定制波长 3、吸光度范围：0.000―4.000A 4、*光通道数：8通道光路检测，另设一个独立参比通道（选配） 5、示值稳定性：≤±0.002A或≤0.5%T/10min。 6、示值误差（准确性）：≤±0.005A或±0.2%T。 7、重复性：≤0.2%或≤0.2%T。 8、灵敏度：≥0.01（L/mg）。 9、通道差异：≤0.01A。 10、波长示值误差：±1nm 11、半宽度：≤8nm 12、分辨率：0.001A（显示），0.0001A（内部计算） 13、*读板速度：单波长≤3秒/96孔，双波长≤6秒/96孔 14、振板功能：速度和时间可调 15、光源类型：进口卤钨灯 16、板条类型：标准96孔或其他型酶标板、条 17、适用孔型：平底、U型和V型 18、显示方式：7寸彩色液晶显示屏显示 19、输入方式：触摸屏输入，可选配鼠标和键盘 20、打印：内置热敏打印机，可外接打印机 21、数据储存：200,000个测试数据，500个以上测试项目（可扩展） 22、接    口： USB(A)口、USB(B)口、串口、并口 23、使用环境：温度5-40℃；湿度15%-80% 24、电源电压：220V±10%，50/60Hz 25、体积：475mm×350mm×210mm（长×宽×高） 27、重量：11.5Kg

通过微生物育种和基因工程手段相结合，获得了一株脯氨酸高产菌株黄色短杆菌。发酵培养 65~68 h， L-脯氨酸产量高达 100 g/L，葡萄糖得率为 45%左右。 关键技术 (1)本研究以玉米浆为氮源，有效的降低了发酵成本； (2)以葡萄糖和味精为原料生产 L-脯氨酸的高转化率发酵，该法绿色、环保、可持续，具有经济竞争力，有很好的产业应用前景。

γ-聚谷氨酸（Poly-γ-glutamic acid）是一种重要的天然聚合物，由 于其具有良好的性质已被广泛应用于食品，化妆品，医药，材料等领 域。解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）LL3 是一株谷氨酸 非依赖型 γ-PGA 合成菌。为了提高其 γ-PGA 产量，项目组采用无痕 基因编辑技术对菌株进行了代谢工程改造。包括三部分：模块化代谢 通路改造；蔗糖代谢途径改造；谷氨酸合成途径改造。 B. amyloliquefaciens LL3 是项目组从发酵食品中分离得到，它能 够从蔗糖出发合成 γ-PGA。利用模块化通路改造策略对 γ-PGA 合成 相关的八个代谢通路进行改造包括：γ-PGA 降解相关途径；细胞呼吸 链；胞外蛋白及胞外蛋白酶合成途径；细菌多糖合成途径；次级小分 子代谢产物合成途径；细胞自诱导因子合成途径；谷氨酸合成途径以 及 γ-PGA 合成途径。最终整合获得的最优基因工程菌株 NK-anti-rocG （敲除了 epsA-O 操纵子（负责胞外多糖合成），sac 操纵子（负责果 聚糖合成），lps（脂多糖合成相关），pta（乙酸合成相关），pgdS（γ-PGA 降解酶），cwlO（细胞壁水解酶），luxS（AI-2 合成）以及表达 anti-rocG sRNA（抑制谷氨酸脱氢酶表达））γ-PGA 摇瓶发酵产量从 3.8 g/L 提高到 11.04 g/L，较对照菌株提高了 2.91 倍。γ-PGA 产物纯度也 从 78.6%提高到 95.2%。5-L 罐补料分批发酵实验得到 NK-anti-rocG 菌株产量可达 20.3 g/L。分子量 450,000 Dal，纯度 95%以上。 项目特色： 1. 菌种（Bacillus amyloliquefaciens）LL3 是谷氨酸非依赖型 γ-聚谷 氨酸合成菌株；发酵生产主要原料为蔗糖； 2. 补料分批发酵产量为：20.3 g/L。 3. 授权专利号为：ZL200810053900.7 市场应用前景： γ-聚谷氨酸（Poly-γ-glutamic acid）是一种重要的天然聚合物，由 于其具有良好的性质已被广泛应用于食品，化妆品，医药，材料等领 域。本项目采用谷氨酸非依赖型 γ-聚谷氨酸合成菌做为发酵菌种，以 蔗糖为原料发酵法生产 γ-聚谷氨酸，可产生巨大的经济效益和社会效 益。

项目简介 作为一种主要的蛋白质翻译后修饰，赖氨酸侧链乙酰化及乙酰赖氨酸侧链去乙酰化 已在近年证明能有效地调节多个关键生命过程，并且也已证明是发展人类疾病药物（特 别是癌症）的新型生物靶点。本成果发展了两个 Fmoc 保护的乙酰赖氨酸类似物（即 Fmoc硫乙酰赖氨酸和 Fmoc-甲磺酰赖氨酸）的有效制备方法及其成功应用于基于 Fmoc 化学的 固相多肽合成。本课题组的前期工作已表明含有这两个乙酰赖氨酸类似物的肽及肽类化 合物能作为发展下一代抗癌药物的全新起点以及作为更近一步研究蛋白质乙

用本方法制出的反刍动物饲料添加剂瘤胃保护性赖氨酸盐酸盐微胶囊包衣产品，可减少了赖氨酸在瘤胃中的降解，增加了小肠中赖氨酸的数量，克服了赖氨酸盐酸盐防潮性能差和存贮不便的缺点。本方法具有时间短、包衣效率高、制粒均匀等优点。

低聚异麦芽糖作为一种健康糖源和功能性食品添加剂广泛应用于医药、食品和饲料添加剂行业中。在低聚异麦芽糖的制备过程中，α-葡萄糖苷酶的转糖苷作用是关键步骤。目前国内用于低聚异麦芽糖生产的α-葡萄糖苷酶大多为进口品。本项目获得的-葡萄糖苷酶生产菌株发酵液酶活达到 11 U/mL，为国内外现 有报道中的最高水平，发酵工艺简单易控。重组菌发酵液经过滤除菌并浓缩后可以直接作为酶液进行转化。酶转化生产低聚异麦芽糖转化率与进口酶相似，可以替代进口品。 

本项目针对上述问题，从分子、细胞和个体水平三个层面上研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)生物学行为及相关技术的临床应用，旨在提高儿童肿瘤疗效。 1、主要科技内容和技术特点： 1） 率先在国内外建立RT-PCR和实时定量RT-PCR检测hTERT法，该法简便、快速、经济、安全，适用于临床推广应用。该项技术已经应用于儿童恶性肿瘤诊断、监测和指导个体化治疗，提高了儿童肿瘤的诊疗水平。 2）首次在国内外研究体内造血干细胞hTERT的生物学行为，证明了hTERT与促红细胞生成素的关系，并系统研究了恶性肿瘤细胞hTERT的生物学行为， 探讨肿瘤细胞中Aurora A与hTERT及端粒酶表达的相关性，提出hTERT与细胞因子网络紊乱相互作用促进肿瘤发生和发展的新观点，为恶性肿瘤在分子水平上的监测和以hTERT为靶点的生物工程治疗提供了依据。 3） 在国内外首次阐明端粒酶重建对成纤维细胞迁移能力和生物节律的调控，把端粒酶、hTERT生物学行为和生物节律与肿瘤择时治疗有机结合，为肿瘤治疗提供了一条新路径。实践证明，在该理论指导下进行化疗，可明显提高肿瘤化疗效果，且毒副作用明显减少。

CRISPR/Cas9 (clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated proteins)是目前最常用的基因编辑工具酶，在科研领域被广泛应用，而在临床方面的应用因为其脱靶活性一度停滞不前。它通过guide RNA（gRNA）与靶向DNA序列的配对，从而将Cas9锚定在靶向基因并诱导产生DNA双链断裂（DSB）。在基因编辑诱发的DSB的修复过程中，一定几率会产生基因突变或者外源DNA片段的插入，从而达到基因编辑的目的。在实际应用过程中，一个好的基因编辑酶Cas9需要同时满足高效切割靶位点、低脱靶活性和低染色体异常三个特点。目前在这三个方面，有一部分基于PCR的方法用于估算基因编辑效率，但其结果可靠性有待提高；有一些基于高通量测序的方法可以在体内或者体外检测基因编辑酶的脱靶活性；尚无系统的可定量的测量基因组异常结构的方法。本项目开发了一种新的方法，可以用来同时定量检测Cas9编辑效率和脱靶活性以及编辑引起的染色体异常结构，即primer-extension-mediated sequencing（PEM-seq）。这是对基因编辑和DNA损伤修复等领域都有巨大促进作用的新技术。与此同时，该项目包括了该团队利用PEM-seq筛选出的一个相比于现有Cas9变体具有更低脱靶活性且与野生型Cas9切割效率相当的Cas9变体further enhanced Cas9 (FeCas9)。