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氯吡格雷手性前体(R)-邻氯扁桃酸甲酯的酶法制备
氯吡格雷 (Clopidogrel) ,商品名波立维 (Plavix) ,是抑制血小板聚集的药物。年销售额超过百亿美元,是目前世界上排名第二位的重磅炸弹级药物。 (R)-邻氯扁桃酸甲酯是氯吡格雷原料药合成的重要前体化合物,酶促邻氯苯甲酰甲酸甲酯不对称还原是制备 (R)-邻氯扁桃酸甲酯的重要方法,具有转化率高、产品光学纯度好、环境污染小等显著优点。 本项目我们通过广泛筛选,获得一个高立体选择性的羰基还原酶,将其与葡萄糖脱氢酶共克隆表达于大肠杆菌中,使用重组大肠杆菌整细胞在单水相体系中高效催化邻氯苯甲酰甲酸甲酯的不对称还原,使用廉价的葡萄糖作为辅底物,反应体系中无需额外添加价格昂贵的辅酶,反应体系简便,原料成本低廉。底物浓度可高达600 g/L,完全转化,产物 (R)-邻氯扁桃酸甲酯的得率高于90%,光学纯度高于99.9%。具有很好的产业化前景。
华东理工大学 2021-04-13
他汀侧链(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的酶法制备
阿托伐他汀,又名立普妥,能够降低血浆胆固醇和脂蛋白水平,是目前世界销售排名首位的重磅炸弹级药物,年销售额超过百亿美元。 (S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯是阿伐他汀手性侧链合成的重要前体化合物,酶促4-氯-乙酰乙酸乙酯不对称还原是制备 (S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的重要方法,具有转化率高、产品光学纯度好、环境污染小等显著优点。 本项目我们通过广泛筛选,获得一个高立体选择性的羰基还原酶ScCR,该酶可以在有机/水两相体系中高效催化4-氯-乙酰乙酸乙酯的不对称还原,使用廉价的异丙醇作为辅底物,无需额外添加辅酶再生用酶,反应体系简单。使用含该酶的大肠杆菌整细胞作为催化剂,底物浓度可高达600 g/L,完全转化,产物 (S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的得率达96%,光学纯度高于99%。具有很好的产业化前景。
华东理工大学 2021-04-13
α-环糊精葡萄糖基转移酶的制备及酶法生产α-环糊精
环糊精在食品、香料、医药、农药、化工等行业有着广泛的应用。本项目通过基因工程技术构建了高效表达-CGT 酶工程菌,通过发酵优化,发酵液酶活达到 100 U/ml (以-环糊精的生成速率计)以上,70400 U/ml (以水解活性计),具有发酵周期短,工艺简单易控等特点。发酵结束后发酵液过滤除菌可以直接作为酶液进行转化反应。此外,通过蛋白质工程技术改造了酶的产物特异性,当以15%淀粉为底物时,环糊精总转化率达到 55%以上,其中α-环糊精含量达到 85%以上。
江南大学 2021-04-11
200 种重要危害因子单克隆抗体的制备及食品安全快速检测 技术
本项目获 2017 年国家科技进步奖二等奖。 本技术围绕食品危害物低成本、快速发现为核心,将生物识别与结合新型纳 米标记材料相结合,针对目前生物快速检测中存在的稳定性和可靠性问题,利用 自组装技术将多种光、电、磁学信号集于一体,构建具有良好体系相容性和稳定 性的纳米-生物传感界面,提出了基于等离子手性信号的高灵敏检测新技术,发 展了集快速富集与多信号同时测定于一体的多功能传感检测新方法和新器件。 (1)综合运用了化学和生物体系的多尺度模拟和计算,提出了基于粗粒化 模型的抗原抗体亲和性定量分析新方法,设计并研制了 200 余种高亲和性和高特 异性抗原和抗体。 (2)研究了抗体与载体成分(纤维素、磁性纳米材料、硅球等)的表界面 性质,创制了基于相分离的新型分离富集介质,并研制了相关快速富集和分离产 品,大大提高了复杂基质中痕量成分的提取效率。 (3)研制了新型标记材料,解决了“高标记效率”和“生物分子高活性” 无法兼顾的难题,研制了系列高特异性检测探针,为复杂体系中痕量物质的快速 甄别提供了有力手段。 本项目共获得国家发明专利 87 项,实用新型专利 5 项,获美国授权发明专 利 1 项,制订国家食品安全标准 2 项。
江南大学 2021-04-11
目的基因转化甜樱桃的方法及其在甜樱桃原生质体瞬时转化中的应用
本发明公开了目的基因转化甜樱桃的方法及其在甜樱桃原生质体瞬时转化中的应用。本发明公开的甜樱桃转化方法包括:将甜樱桃果肉愈伤组织进行悬浮继代培养,得到悬浮细胞;将悬浮细胞用CPW13M进行处理,得到CPW13M处理的悬浮细胞,CPW13M为向细胞‑原生质体清洗液中加入甘露醇得到的甘露醇质量百分比浓度为11%‑15%的溶液;用纤维素酶和果胶酶酶解CPW13M处理的悬浮细胞得到甜樱桃原生质体;以甜樱桃原生质体为受体进行甜樱桃转化。实验证明,本发明的甜樱桃转化方法可以将目的基因在甜樱桃原生质体中进行瞬时表达,可以用来进行目的基因的功能验证及蛋白质和细胞器的定位,还可用来检测蛋白质互作及细胞代谢。
中国农业大学 2021-04-11
一种基于神经网络的反演大气可降水量的MODIS模型改进方法
本发明公开了一种基于神经网络的反演大气可降水量的MODIS模型改进方法,包括以下步骤:S1:利用MODIS三通道比值法反演大气可降水量PWV,记为PWVMODIS;S2:利用BP神经网络建立测站处的纬度φ、测站处的高程h、年积日doy、PWVMODIS与测站GPS/MODIS反演的PWV残差RES之间的非线性关系;S3:对BP神经网络模型进行训练;S4:将φ、h、doy以及PWVMODIS作为输入参数代入BP神经网络模型,并计算出GPS测站处PWV残差RESBP;S5:利用RESBP补偿PWVMODIS,获得大气可降水量PWV=PWVMODIS+RESBP。本发明有效提高了建模精度。
东南大学 2021-04-11
一种采用超声波振动的连铸结晶器生产高锰钢的方法
(专利号:ZL 201410286150.3) 简介:本发明公开了一种采用超声波振动的连铸结晶器生产高锰钢的方法,属于钢铁冶金技术领域。本发明包括电炉初炼工序、钢包炉精炼工序和中间包板坯连铸工序,所述中间包板坯连铸工序采用水平连铸系统,钢包炉精炼后的钢水从钢包的底部,流经长水口注入到中间包中,中间包内的钢液进入水平连铸结晶器内,同时水平连铸结晶器上产生超声波振动使钢液逐步成型,在二冷段通过冷却,逐渐凝固成连铸高锰钢。本发明中无需依靠结晶器的机械振动,而仅仅依靠超声波振动力使初生坯壳与结晶器内壁自动“脱模”,从而消除或减少高锰钢铸坯表面缺陷的产生;同时能够促进铸坯中等轴晶的发展,进而提高后续金属制品的质量。  
安徽工业大学 2021-04-11
一种基于菌毛多样性的尿路感染大肠杆菌的分型方法
本发明提出了一种基于菌毛多样性的尿路感染大肠杆菌的分型方法,该方法可对尿路感染大肠杆菌进行精细分型,从而对感染菌株的耐药性和毒性进行判断,可为尿道感染的精准诊断与治疗提供参考依据。
天津医科大学 2021-02-01
一种基于三维打印的嵌入预张紧碳纤维的方法和装置
本发明公开了一种基于三维打印的嵌入预张紧碳纤维的方法,包括以下步骤:(1)采用三维打印进行打印结构制造,每制造一层后进行判断是否需要进行纤维丝的铺设,如果需要铺设纤维丝则进入步骤(2),如果不需要则进入步骤(3);(2)将预张紧的碳纤维丝铺设在最新一层的打印结构上;(3)进行三维打印下一层制造;本发明还公开了一种基于三维打印的嵌入预张紧碳纤维的装置;本发明的装置和方法可以快速有效地将预张紧纤维丝嵌入三维打印结构中,有效提高三维打印结构的强度以及实现打印结构具有自监测功能。
浙江大学 2021-04-11
基于拉曼光谱技术的等鞭金藻中胡萝卜素分布的检测方法
本发明公开了一种基于拉曼光谱技术的等鞭金藻中胡萝卜素分布的检测方法,采用拉曼光谱仪,获取活体等鞭金藻藻液样本的拉曼光谱原始信息;以色素中的胡萝卜素为例,结合曼光谱仪获取胡萝卜素标准品的谱线;将获得的等鞭金藻藻液样本的原始拉曼数据进行预处理,结合胡萝卜素的标准品谱线,指认等鞭金藻藻液样本的拉曼谱峰对应的谱峰位置;选取一定区域的藻液样本进行面扫描,将胡萝卜素对应的特征谱峰处的拉曼强度值进行积分,即可得到等鞭金藻藻液中胡萝卜素分布的化学图像。本发明解决了现有检测方法需要对样本进行染色或复杂的化学处理,操作相对繁琐、耗时、耗力的问题。
浙江大学 2021-04-11
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