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基于可切割自聚集标签的
多肽
表达纯化方法
01. 成果简介 本项成果提供了一种多肽的合成方法,利用了自聚集短肽诱导目标多肽的聚集,使得生物合成的多肽以沉淀形式保护下来,从而避免降解;然后通过体外切割,获得目标多肽,优化了多肽合成和分离的工艺,操作简便且不受多肽的长度限制,有望为多肽药物的高效制备提供一种解决方案。 具体的,在目标多肽的N端或C端融合一段自聚集短肽,这两者之间采用一个连接肽将两者融合。这个连接肽可以是化学切割、酶切割的识别序列或自切割肽(内含肽)。通过分子克隆,将这三段肽(目标肽、连接肽、自聚集短肽)克隆并转化至表达菌株(如大肠杆菌BL21(DE3))中进行表达。随后通过离心或过滤收获菌体,利用高压、超声波等技术进行细胞破碎;再通过离心或过滤收集不可溶部分(聚集体);在简单洗涤后,根据所选的连接肽的属性进行切割,如化学切割,蛋白酶切割或诱导自切割;再通过离心或过滤去除不可溶部分,收集上清即可得到粗纯多肽产品。如下图所示: 02. 应用前景 基于本项技术可以合成糖尿病仿制药利拉鲁肽、矮小症仿制药生长激素(hGH)等。03. 知识产权 相关成果已授权3项中国发明专利及1项美国专利。04. 团队介绍 团队主要研究领域为合成生物学和生物制药(包括他汀类化学药物和多肽药物),负责人林章凛博士为教授、博士生导师,教育部长江学者,广东省“珠江人才计划”科技领军人才。先后承担973、863、国家重点研发计划专项、国家自然科学基金等科研项目,发表SCI论文50余篇,申请专利20余项。05. 合作方式 商务合作。06. 联系方式 lijiaoli2016@tsinghua.edu.cn biyangxf@scut.edu.cn
清华大学
2021-04-13
蛋白
质模型
蛋白
质演示模型XM-856
XM-856蛋白质演示模型 XM-856蛋白质演示模型显示蛋白质分子结构形态。 尺寸:放大,28×19×45cm 材质:PVC材料
上海欣曼科教设备有限公司
2021-08-23
结合IGF-1C
多肽
的可注射性水凝胶
本发明涉及一种结合胰岛素样生长因子C结构域多肽(IGF-1C)的壳聚糖水凝胶,其具有良好的细胞相容性和生物活性。这类活性水凝胶具有可注射性,能够作为载体材料,促进干细胞对组织损伤的治疗效果。其为移植干细胞提供适宜的组织再生微环境,从而提高移植干细胞的存活率。增加干细胞在损伤区内的存活及驻留,促进移植细胞存活、增殖,减少凋亡,促进损伤部位血管新生以及功能恢复,进而提高干细胞移植治疗组织损伤的治疗效果。此外,移植后水凝胶并没有促进干细胞发生不良分化。
南开大学
2021-04-10
一种酶法制备有机菜籽
多肽
的方法
其他成果/n一种酶法制备有机菜籽多肽的方法,包括:菜籽蛋白的制备;将菜籽蛋白与蒸馏水按一定料液比混匀,并进行超声辅助湿热处理,得到湿热菜籽蛋白浆液;向湿热菜籽蛋白浆液中加入三聚磷酸钠进行超声辅助磷酸化处理,得到磷酸化菜籽蛋白浆液;调节磷酸化菜籽蛋白浆液的pH和温度,并加入碱性蛋白酶进行超声辅助酶解,得到一次酶解液;调节一次酶解液的pH和温度,并加入复合风味蛋白酶进行超声辅助酶解,得到二次酶解液;对二次酶解液进行微波灭酶处理,得到灭酶酶解液,将灭酶酶解液离心得到菜籽多肽清液,再进行冷冻干燥处理,即得成品的有机菜籽多肽。该酶法制备有机菜籽多肽的方法,工艺安全、制备便捷。
武汉轻工大学
2021-04-11
一种牛骨胶原
多肽
的生产方法
其他成果/n种牛骨胶原多肽的生产方法,包括如下步骤:将牛骨胶原蛋白溶液与磷酸盐溶液混匀,并加热一定时间,得到牛骨胶原蛋白浆液;通入交流电流处理一定时间,切断电源后再通入恒压反向电流处理一定时间,切断电源后再通入恒压正向电流处理一定时间,得到牛骨胶原蛋白混合液;对牛骨胶原蛋白混合液加入一次复合酶进行超声辅助酶解,得到一次酶解液;再加入二次复合酶进行超声辅助酶解,得到二次酶解液;再进行微波灭酶处理,将灭酶酶解液静置冷却,离心取上清液后再进行冷冻干燥处理,即得成品的牛骨胶原多肽。该牛骨胶原多肽的生产方法,
武汉轻工大学
2021-01-12
一种肿瘤靶向
多肽
光敏剂键合物
本发明公开了一种肿瘤靶向多肽光敏剂键合物,属于生物医药领域。所述的肿瘤靶向多肽光敏剂键 合物的结构为 A-B-C-D,其中,A 为光动力学治疗光敏剂,B 为含正电荷的细胞穿膜肽片段,C 为基质 金属蛋白酶特异性识别多肽片段,D 为含负电荷的多肽片段。本发明公开的多肽光敏剂键合物可以显著 提高光动力学治疗光敏剂在生理条件下的稳定性,极大的减少光动力学
武汉大学
2021-04-14
胶原
蛋白
/PVA复合纤维
在崇尚自然、保护环境的当今社会, “绿色”型健康舒适纤维制品越来越受到人们的青睐。其中,蛋白纤维以其在生物降解性,人体皮肤亲合性等方面特有的优异性能倍受关注。胶原蛋白/PVA复合纤维不仅秉承了蛋白纤维的优点,还克服了一般蛋白纤维力学性能、耐热水性能不佳的缺点,且具有良好的吸湿透气性能及染色性能。 按一定配方制备胶原蛋白/PVA复合纺丝溶液,通过湿法纺丝得到初生纤维,再经后处理
四川大学
2021-04-14
高功能涤纶
蛋白
复合面料和粘胶纤维
蛋白
复合面料
涤纶织物虽具有良好的挺阔性、褶皱弹性,但不亲水,对人体皮肤不友好,没有保健功能。粘胶纤维织 物具有 良好的吸湿、抗静电,但对皮肤没有保健功能。 开发的全新改性接枝技术,可以在涤纶纤维和涤纶织物表面接枝各种动植物蛋白,如蚕丝蛋白、牛奶蛋 白、大都蛋白、花生蛋白、蚕蛹蛋白等等。从而制备各种高功能涤纶蛋白复合面料。 改性接枝的涤紛蛋白复合面料,蛋白质都分布在涤纶纤维表面上,在服用时,与人体皮肤相接触的全是 各种动植物蛋白,对人体皮肤具有良好的保健作用。同时,织物的吸湿性、抗静电性都得到很好的改善;褶 皱弹性、挺阔性保持良好。 高功能涤纶复合蛋白面料,适宜制备高档涤纶面料,具有很高的附加值,生产工艺流程较短、成本较 低,无需投资购买新设备。该技术也同样适用于粘胶蛋白复合面料。粘胶蛋白复合面料对人体皮肤具有良好的保健作用
西南大学
2021-04-13
多肽
水凝胶在疫苗佐剂和抗体制备方面的应用
多肽水凝胶具有生物相容性高、可降解、具有生物活性等特点和 优点,它在生长因子和药物的缓控释、组织工程和再生医学等领域具 有很高的应用前景。目前有较高转化前景的项目是多肽水凝胶在疫苗 佐剂和抗体制备方面的应用。癌症、艾滋病、丙肝等重大疾病疫苗的 研制具有重要的意义。在这些疾病的预防性和治疗性疫苗研制中,关 键的一环是可激活人体细胞免疫的佐剂的发现。 本项目开发出一种多肽水凝胶,具有极强地激发细胞免疫的功能。 对比于现有的几种可激活细胞免疫的佐剂(CpG,MPL 等),我们的 水凝胶佐剂具有以下优势: 1)成本低,1mgCpG 价格为 5000-8000rmb,1mgMPL 价格为 2000- 4000rmb,我们的短肽实验室合成成本 1g 低于 500rmb; 2)操作简单,仅需物理混合就可实现与抗原复合; 3)适用于蛋白、短肽、DNA、灭活癌细胞等各类抗原,通用性 高; 4)短肽结构简单,可大量制备,实验室一天内一次性即可合成10g 以上该多肽,可用于制备 10000 瓶以上 1mL 的水凝胶(临床用的 疫苗每次注射量是 0.5-1mL),可以很容易的实现中试级别的化合物 合成及疫苗制备。基于这些优点,该佐剂具有极强的应用前景,该研 究获得科技部重大国际合作项目资助。 由于本项目的水凝胶可制备短肽抗原的抗体,它在抗体定制中具 有极高的应用前景。目前抗体制备的技术为第一步将短肽连接到载体 蛋白 BSA、KLH 等上,然后打动物 6-10 周。现有技术操作复杂(需 偶联蛋白)、耗时长(6-10 周),而且很多时候还未能产生有效的抗体。 我们想发展的技术相比于现有技术来说具有明显的优势:操作简单, 仅需物理混合短肽抗原;抗体产生迅速,4-6 周即能生成抗体;抗体 滴度高,由于无需使用载体蛋白,短肽的特异性抗体滴度更高;对于 磷酸化抗体来说,本项目的水凝胶能减少磷酸化短肽被体内磷酸酶去 磷酸化,从而提高磷酸化短肽抗体的比例。
南开大学
2021-04-13
一种金枪鱼骨胶原
多肽
的制备方法
其他成果/n一种金枪鱼骨胶原多肽的制备方法,包括如下步骤:将金枪鱼骨蛋白与蒸馏水混匀,并进行加热加压处理,得到金枪鱼骨蛋白浆液;调节金枪鱼骨蛋白浆液pH,并加入木瓜蛋白酶进行酶解,得到酶解液;将酶解液灭酶得到灭酶酶解液;将灭酶酶解液静置冷却,离心取上清液后再进行超滤处理,得胶原多肽粗液;将胶原多肽粗液依次加入到阴离子交换树脂层析柱中洗脱,葡聚糖凝胶柱层析中洗脱,采用高效液相色谱进行纯化处理,即得金枪鱼骨胶原多肽。该金枪鱼骨胶原多肽的制备方法,工艺安全、制备便捷。
武汉轻工大学
2021-01-12
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