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一种新的探针制备方法
01. 成果简介 荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是一种以荧光标记取代同位素标记而形成的新的原位杂交方法。其通过杂交探针序列及其荧光,能提供标记位点在细胞核内的空间位置信息,与基于染色质构象捕获(Chromatin Conformation Capture,3C)等各种生物技术(如4C,5C,HiC,ChIA-PET等)互补,成为研究染色质结构不可或缺的重要技术之一。 传统的荧光原位杂交技术一般以含有目标物种来源的一段完整基因组片段作为模板,通过生物酶的作用进行片段化,之后进行荧光标记做出杂交探针,再固定细胞中,通过碱基互补配对原理对特定的基因组片段进行荧光标记并成像,获得具体的核内空间信息。但是,传统的原位杂交技术受限于模板本身的特性,具有准备时间长、所需模板量大、基因分辨率低、克隆中含有重复片段、需要加入物种特异的Cot-1DNA等缺点。尤其是其分辨率低的特点(分辨率在百kb的数量级),让它在应用中受到了很大的限制。 本项成果提供了一种新的针对目标核酸靶标探针的制备方法(见图1),该方法比传统的FISH技术的分辨率提高了1-2个数量级(见图2),可应用于传统荧光原位杂交因分辨率不够而不能探测、或者被错误探测的地方。该成果的具体步骤(见图1)包括:(1)获取感兴趣的靶DNA序列;(2)使用转座酶将靶DNA序列进行片段化的同时,在片段化的DNA序列两端加上接头序列;和(3)利用所述接头序列,获取所述片段化的DNA序列,以产生探针。本项成果的技术优势在于:快速高效、模板需求量低、基因组分辨率高、且不需要Cot-1DNA。 图1 探针制备方法的具体步骤。 02.应用前景 本项成果是一种快速高效、模板需求量低、基因组分辨率高、且不需要Cot-1DNA的荧光原位杂交方法,可作为现有的传统荧光原位杂交技术的可选替代方案。尤其是该方法的分辨率高,比传统的FISH技术的分辨率高1-2个数量级(见图2),因此可应用于传统荧光原位杂交因分辨率不够而不能探测、或者被错误探测的很多地方。 例如,在基因组的三维结构中,TAD(拓扑结构域)是结构和功能的基本单元。TAD内部和TAD之间的增强子和启动子发生的错误的相互作用,是一些癌症发生的根本原因。而传统的FISH技术因为分辨率的限制,探测不到这些错误的相互作用。因此本项成果在临床有着广泛的应用,可以用于癌症及一些其它疾病的极早期检测。 图2  相比于传统的BAC FISH(图上方绿条,长度为152kb),仅用1.170 kb(红条)长的TN5探针,就可以得到要标记的基因组位点的图像。 图中细胞核(蓝色)中,红色和绿色的点相互重叠,说明Tn5 FISH可以用传统的BAC FISH进行验证。黄色箭头表示用Tn5 FISH(红色通道,左上角插入图)或BAC- FISH(绿色通道,左下角插入图)进行成像。图中比例尺为5μm。03. 知识产权 本项成果已申请1项国内发明专利,目前正在申请国际专利。04. 团队介绍 本项目团队负责人为清华大学教授、博士生导师,国家首批千人。团队的主要研究方向涉及:生物信息学和基因组三维结构新方法的开发,利用细胞超分辨率成像、分子成像和生物信息学的方法进行基因组三维结构和系统生物学的研究选。团队负责人曾多次主持或参与美国NIH的R01科研项目、中国国家自然科学基金及科技部的科研项目,已发表高水平学术论文200余篇。05. 合作方式 专利许可、合作开发。06. 联系方式 邮箱:zhangxinrui@tsinghua.edu.cn
清华大学 2021-04-13
桑柏生发搽剂及其制备方法
【发 明 人】吴承艳;吴承玉 【技术领域】  本发明涉及一种治疗脱发病的搽涂的外用药水,特别是一种用医用酒精浸泡中药的用于治疗脱发而有利于生发的外用搽剂。 【摘要】  本发明的桑柏生发搽剂,其有效成分的原料中的主要药物成分为冬桑叶和黄柏,故称桑柏生发搽剂,辅以蔓荆子、升麻、旱莲草和地肤子等中草药,用医用酒精浸泡后进行过滤而得到的清澈透明的药液即为本发明的桑柏生发搽剂。具有配方科学、疗效显著、使用方便、价格便宜、无毒副作用等优点,使用时,用药棉沾搽剂在脱发处反复搽涂,每天2~3次,一般4天后即能见毛孔凸起,新发逐渐长出,且能消脂、祛屑、止痒,更能控制复发。
南京中医药大学 2021-04-13
一种电极材料的制备方法
本发明公开了一种电极材料的制备方法;该方法包括下述步骤: S11 将正硅酸乙酯的无水乙醇溶液与氨水混合,常温反应至完成,离 心清洗并干燥后获得二氧化硅纳米球;S12 将可溶钴盐、可溶碳酸物 和所述二氧化硅纳米球在水中混合,加热反应至完成,清洗并干燥后 获得二氧化硅-钴盐前驱体;S13 将二氧化硅-钴盐前驱体与硫化钠在水 中混合,水热反应至完成,清洗并干燥后获得硫化钴电极材料。本发 明采用模板法制备过渡金属硫化物电极材
华中科技大学 2021-04-14
环孢菌素 T 及其制备方法和应用
我国草地农业发展缓慢,最直接的影响就是造成畜牧业发展也减 速,因而致使每年我国从国外进口的牧草以及购买婴儿奶制品的数量 逐年上升。究其原因主要是因为我国缺少具有抗性的优异牧草品种, 尤其是具有抗植物病原真菌的牧草。每年我国牧草由于植物病原真菌 的危害,造成大面积减产和生长缓慢,并且还影响奶制品的安全。虽 然现阶段化学合成的杀灭植物病原真菌药物在植物病害防治中起着 不可代替的作用。但是,大家对农药毒性和农药对环境的污染
兰州大学 2021-04-14
甘草黄酮分散片的制备方法
糖尿病是一种因胰岛素分泌绝对或相对不足,导致以高血糖为特征的内分泌代谢性疾病。若机体长期处于高血糖状态,可导致失明、肾功能衰竭、神经病变、心脑血管疾病、肢体坏疽等多种并发症。现已成为继心脑血管、癌症之后的严重危害人类健康的第三大疾病。目前对于 I 型糖尿病的治疗,研究方向是开发给药方便、有效的胰岛素制剂及代用品。而对于 II 型糖尿病的治疗,则主要是依靠现有的口服降糖药物进行有限的治疗。
兰州大学 2021-04-14
大蒜素阴道栓剂及其制备方法
妇科炎症是临床上常见病、多发病,多为细菌、真菌、念珠菌、衣原体等病原体的感染,不多为几种病原体的混合感染,且患者多数伴有免疫能力降低。目前用于治疗该疾病的药物多对一种或 2 种病原菌有效,有一定的局限性。大蒜素是天然药物,不但对细菌和各种病原微生物有效,还具有增强免疫能力的作用。本发明研制的大蒜素的妇科栓剂,对于治疗妇科炎症,具有优于现有的现有剂型为口服、注射剂、胶囊剂等,避免口服给药可能产生的肝脏首过效应、对胃肠道的刺激性及静脉给药可能产生的血管黏膜刺激性,降低全身的血药浓度,提高患病的局部浓度,
兰州大学 2021-04-14
石墨复合架空地线及其制备方法
本发明提供了一种石墨复合架空地线及其制备方法,包括由第一复合石墨线构成的内芯、由第二复 合石墨线绕内芯外侧纵向排列构成的次外层和由金属纤维绕次外层编织获得的最外层,次外层完全包裹 内芯,最外层完全包裹最外层;其中,第一复合石墨线由复合石墨带捻合获得,第二石墨线由复合石墨 带绕金属纤维捻合获得,复合石墨带包括两层蠕虫石墨层和敷设于两层石墨层间的骨架纤维、碳纤维, 骨架纤维和碳纤维包覆有粘合剂层。本发明具有重量轻、低电阻、低感抗、低集肤效应的优点,
武汉大学 2021-04-14
一种固体缓蚀剂及其制备方法
本发明公开了一种固体缓蚀剂及其制备方法。所述固体缓蚀剂 包括包衣蜡和固体缓蚀剂颗粒球,包衣蜡均匀包裹在固体缓蚀剂颗粒 球表面,固体缓蚀剂颗粒球与包衣蜡的重量比在 10:1~20:1 之间,固 体缓蚀剂颗粒球含有重量份数 30 至 45 份的含水的水溶性缓蚀剂、40 至 50 份的固体粘合剂、1 至 5 份的增效剂及 5 至 10 份的发泡崩解剂。 其制备方法为:按照配方比例量取各组分物质,将增效剂溶解于水中, 加入固
华中科技大学 2021-04-14
高性能铜基合金及其制备方法
本成果制备的高抗变色金色铜合金金色度高,不含贵金属元素,成本较低,同时加入微量钴,大大提高合金抗脱锌腐蚀性能。通过首创的Cu-Fe合金短流程制备装备及工艺制备出的Cu-Fe合金,经过形变强化、细晶强化以及微米级/亚微米级/纳米级Fe相多尺度协同析出强化等共同作用,使Cu-Fe合金具有高强度、高导电性能。本成果提出一种合金化无氧铜的制备方法,有效解决了现有技术中无氧铜条在进行生产功率模块的热处理工艺时,随着热的输入,晶粒会急剧增大,从而在下一道接合工艺或是与其他零部件接合时发生各种故障问题,进而实现了即使850℃高温时,也可以抑制晶体颗粒增大。
中南大学 2023-08-03
一种石墨烯的制备方法
(专利号:ZL 201410635484.7) 简介:本发明公开了一种石墨烯的高效制备方法,属于纳米技术领域。该方法主要包括:在低于室温条件下,将天然鳞片石墨原料与硝酸钠、浓硫酸和高锰酸钾混合,球磨处理后,稀释,加双氧水反应,用氢氧化钠中和,随后超声处理,得到氧化石墨烯悬浮液;以水合肼和二氧化硫脲为复合还原剂,对氧化石墨烯溶液进行还原,制得单层或几个原子层厚度的石墨烯。本发明在石墨氧化过程中引入球磨过程,提高了石墨的氧化、剥离效率,减少了
安徽工业大学 2021-01-12
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