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重组大肠杆菌生产磷脂酶D及转酯化产品开发
磷脂酶D(PLD,EC 3.1.4.4)是一类广泛存在于各种生物体的酶,具有水解作用和磷酰基转移作用(见图1)。作为一种酶制剂,PLD的转磷脂酰活性尤为重要,被用于制备具有生物活性的稀有磷脂。其中,以大豆磷脂酰胆碱(PC)为底物,PLD酶法制备磷脂酰丝氨酸(PS),受到广泛关注。PS作为脑健康营养补充剂,相继被美国FDA、日本HBM和中国国家卫生计生委所认证,列为新资源食品。相较于提取自牛脑和植物的PS,生物酶法制备的PS,避免了食品安全和植物源含量低的问题。进一步,一些新的结构和功能磷脂,通过PLD转磷脂酰反应被合成出来,例如,磷脂酰鲨肝醇、磷脂酰葡萄糖、心磷脂类似物、磷脂酰酪醇、磷脂酰萜烯和磷脂酰丝氨醇,它们中一些具有抗癌和抗氧化活性。 直到现在,受限于磷脂酶D来源不足和价格高(链霉菌属PLD,≥150 units/mg,6516.9¥/1000 U,Sigma公司),其工业上的广泛应用受到限制。例如,文献报道的PLD最高产量在104-105U·L-1,而制备转化得到每公斤PS,需要2.6×106U的PLD。这一障碍的主要原因是高水平表达的PLD对宿主的严重细胞毒性,导致细胞死亡。 历经5年时间,从上游到下游整体设计,我们解决了毒性蛋白(磷脂酶D,PLD)异源表达难的问题(质粒不稳定、蛋白合成时间短、细胞生长抑制和裂解),PLD生产达到目前世界最高水平106U·L-1(748 mg·L-1)(提高20倍);同时发展一种简单有效提取重组磷脂酶D的方法(无需破碎、无需添加溶菌酶和有机溶剂、室温进行),PLD生产成本有望降低20倍以上。按照实验室规模的一台5 L发酵罐,年产量可以提供3.5×108U的磷脂酶D,满足100 kg的PS转化需求计算(不计算PLD重复利用率),扩大反应器体积至100-1000 L,PLD产量可满足制备2-20吨PS的需求。
厦门大学 2021-01-12
一种结核杆菌融合蛋白及其制备方法和应用
本发明所构建的融合蛋白EAMM能在大肠杆菌中稳定大量表达,经纯化得到纯度较高的蛋白;构建的亚单位疫苗免疫动物能产生针对结核杆菌特定抗原(ESAT-6、Ag85B、Mtb8.4和PPD)的特异性的细胞免疫和体液免疫应答,具有较强的免疫原性。
兰州大学 2021-01-12
一种枯草芽孢杆菌的简易迭代编辑工具及其应用
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种枯草芽孢杆菌的简易迭代编辑工具及其应用。该工具包括两个质粒:pQ‑Cas9n和pC‑TS。pQ‑Cas9n质粒包含Cas9n基因和诱导型启动子,用于表达Cas9n蛋白。pC‑TS质粒包含温敏性复制蛋白,可以实现质粒的温度筛选消除。该工具实现了高效的基因编辑,显著缩短了编辑周期,并支持多基因的快速打靶和编辑,满足了复杂基因组编辑的需求。同时,本发明采用双质粒系统,通过温敏性复制蛋白实现了质粒的温度筛选消除,简化了质粒消除和再引入的步骤,本发明支持多轮迭代编辑,在编辑完成一个基因后,可以快速消除质粒并引入新的质粒进行新的位点编辑,实现了高效的多轮编辑。
南京工业大学 2021-01-12
山羊肉质及快长、高繁殖性能的研究与推广
根据羊场特定的饲养管理条件及影响因素,建立了种羊的 BLUP 育种模型,用于估测肉用羊早期生长性状的育种值。通过检测分析影响山羊肉质风味和鲜味的硫胺素、肌苷酸、胆固醇等指标在肉中的表达水平,建立了依据肉品质进行的个体选择模型。主要技术(性能)指标:通过该成果的应用,可使得山羊的初生重、周岁重、产羔数、及屠宰率等性能指标达到一定的提高。
扬州大学 2021-04-14
基于稠环双噻吩酰亚胺和双并噻吩酰亚胺的稳定n型有机醌式双自由基材料
具有开壳结构的自由基有着独特的光学、电学和磁学性质,在有机电子学、自旋磁电子学、非线性光学和储能器件等众多领域中具有广泛的应用前景。课题组通过理论计算和顺磁共振结果证明BTICN和QTICN具有双自由基特性,其中具有更大分子骨架的QTICN的双自由基特征指数达到0.67。
南方科技大学 2021-04-14
1080P高清双路DVI采集卡/双路HDMI采集卡
产品详细介绍 1080P高清双路DVI采集卡/双路HDMI采集卡MV-DVI420E (可接DVI、HDMI高清数字信号) 【产品简介】 1080P高清双路DVI采集卡/双路HDMI采集卡MV-DVI420E是维视公司综合技术应用,依据市场导向,针对大屏幕边缘融合、流媒体、多媒体录播系统、大屏拼接、医疗以及科研、检测等领域最新推出的新一代基于PCI-E Express X4总线作为数据存取通道,最大传输速度达到480MByte/s的双通道高速DVI/HDMI接口高端图像采集卡,除具有PCI-E X1接口采集卡的图像还原更真实、色彩画质更细腻、过渡层次更好、采集范围更广、图像细节损失更小等优点外在1920*1200分辨率下双路同时均可达到30FPS,具有帧率高、画面流畅、相对VGA接口画质更好的显著特点,该产品可采集PC机显卡等图形设备输出的DVI/HDMI信号,还可采集非标准逐行RGB分量等图像信号,适用于高精度、高分辨率的图像采集、高清DVI/HDMII视频图像的存储、编码传输等要求。 【产品特点】 1、1080P高清双路DVI采集卡/双路HDMI采集卡MV-DVI420E采集信号接口:双路DVI-I,可做到VGA、DVI、HDMI接口一卡解决; 2、 视频支持DVI single link , DVI dual link; 3、 可采集计算机等图形设备输出的双路VGA、DVI、HDMI接口信号、还可采集非标准双路RGB分量以及Y/Pb/Pr等分量图像信号; 4、1080P高清双路DVI采集卡/双路HDMI采集卡MV-DVI420E采用高端ADC芯片,使用高效Master DMA模式,图像采集过程几乎不占CPU资源,板载RAM内存芯片作为图像缓存; 5、 高精度数模转换,可得到高分辨、高速度、高质量的无损VGA图像及DVI、HDMI数字图像; 6、 支持硬件任意开窗,二级缩放,硬件翻转; 7、 有类似内存映射的功能,多个应用程序/进程可以共享其采集的图像数据; 8、 1080P高清双路DVI采集卡/双路HDMI采集卡MV-DVI420E硬件控制帧率流量,可在实际使用中和其它采集卡配合,更有效提高带宽的利用率; 9、 支持RGB32、RGB24、YUV422、RGB8等采集格式; 10、 亮度、饱和度、对比度多种参数可调节; 11、 1080P高清双路DVI采集卡/双路HDMI采集卡MV-DVI420E 提供丰富的二次开发包; 12、 做工精良,全系采用环保材料以及部分进口元器件,保证了产品的稳定性。 【产品优势】 (一)、技术优势 1、 DVI/HDMI模式:1920*1200/30帧;1920×1080/30帧;1600×1200/30帧;1440×1050/30帧;1280×1024/30帧;1024×768/30帧;800×600/60帧,最高可采集1920*1200分辨率;  2、 双路DVI/HDMI图像采集卡MV-DVI420E VGA模式:分辨率可达2048*1536; 3、 HD模式:可采集1080P 、720P、586P、480P逐行数字信号; 4、 高点频:直接采用高性能采集芯片,点频可达220M,目前市场很少有厂家达到; 5、 高传输速率:采用PCI-E Express X4总线架构设计,兼容X8、X16传输速率更高; 6、 高带宽利用率:独有的硬件带宽利用技术,使PCI-E总线得到真正意义上的有效使用; 7、 Microvision自有技术,无信号时不蓝屏、死机; 8、 1080P高清双路DVI采集卡/双路HDMI采集卡MV-DVI420E 全自动行场频检测:具有全自动行场频自适应能力和信号自检测能力,信源端信号的变化不需要用户调节,完全适合无人值守应用; 9、 采用标准的WDM、VFW驱动,支持标准的Directshow进行开发,提供完整的二次开发包SDK。也可提供基于VC、VB、Delphi等的二次开发包演示程序和源代码; 10、 1080P高清双路DVI采集卡/双路HDMI采集卡MV-DVI420E可使用微软的AmCap, VidCap, Windows Media Encode, Window Movie Maker、第三方提供的LabView等应用软件; 11、 兼容性好:支持国内大多数大多数视频会议软件、视频监控软件、P2P采集端软件、直播软件。 (二)、综合优势 1、 性价比高 产品均为维视自主开发,具有多年相关产品开发经验,掌握核心领域技术,合理灵活的市场定位及价格,高性能低价格有绝对优势,为用户减少产品成本。 2、 产品服务 西安、北京、深圳、上海等地拥有自己的分公司及服务部,为产品销售和维护提供保障,可提供强有力的技术支持,第一时间为客户解决问题。 3、 性能稳定 产品性能达到国内领先水平,图像行业多年的技术积累及市场考验使产品具有很高的稳定性,故障率低,为客户的售后维护减少成本。 4、 持久合作 用户不必担心产品的更新换代所带来的问题,我们会提供完善的解决升级方案,以解客户后顾之忧。 【开发工具】   ● 操作系统支持:Windows 2000、XP、win7、Vista。  ● SDK支持:VC、VB、Delphi。提供演示程序及演示程序源代码!  ● 驱动支持:WDM、VFW、DirectX、OpenCV、Matlab、LabView、Halcon、MIL。 【应用领域】  1、教育课件录制、多媒体录播录像、会议录制、视频会议,远程教育培训;  2、大屏幕边缘融合系统、大屏幕拼接、电视墙行业、虚拟演播室、虚拟现实、工控、游戏机等设备;  3、安检X光机、雷达图像信号、VDR纪录仪;  4、医疗X光机、CT机、胃肠机等;
维视数字图像(北京)有限公司 2021-08-23
不锈钢管列置双TIG电弧高效低能耗焊接生产技术
广泛应用于汽车、锅炉及装备制造等行业的不锈钢焊管是我国钢铁行业重点发展的高端不锈钢精品深加工产品,其由钢带卷制成管而由钨极氩弧焊接(TIG)而成,但在高速焊接生产过程中会出现咬边和驼峰焊道成形缺陷,成为不锈钢管高效焊接生产的技术“瓶颈”和行业技术发展的堵点、难点。基于此,通过研究揭示不锈钢管TIG焊接生产提速后出现的咬边、驼峰焊道表面成形缺陷形成机理,提出利用辅助TIG电弧对熔池进行热力联合调控抑制高速TIG焊接过程中咬边和驼峰焊道的形成,发明了列置双TIG电弧(Tandem TIG)高效低能耗焊接工艺,将咬边和驼峰焊道缺陷防止在萌芽状态;与单TIG焊相比,焊接速度提高1倍以上,能耗降低20%以上,很好地解决了焊接高质量和高效率难平衡的问题;开发了钨极烧蚀在线监测系统和不锈钢管在线固溶热处理系统,实现了不锈钢管高效、低能耗、低成本焊接生产,提升了不锈钢焊管行业技术水平。在此基础上,基于相同热力调控理念开发了TIG电弧辅助MIG/MAG电弧高速焊接工艺,焊接速度提高75%。项目累计授权发明专利5件,制定团体标准2项,工信部认定节能技术1项,获中国专利优秀奖等科技奖励6项。项目成果推动和引领不锈钢焊管生产向高效、低能耗方向发展,具有显著的技术优势和应用前景。 (a)工艺原理 (b)列置双TIG电弧和熔池图像 图1 列置双TIG电弧高速焊接工艺原理 (c)铁素体不锈钢焊管 (d)奥氏体不锈钢焊管 图2 不锈钢管列置双TIG电弧高速焊接生产 图3 钨极烧损在线监测系统 图4 奥氏体不锈钢管高速焊接生产过程中在线固溶热处理工艺流程
山东大学 2025-02-08
猪圆环病毒 2 型-副猪嗜血杆菌多联多价灭活疫苗
本成果是将人工合成的表达猪圆环病毒 2 型 Cap 蛋白的核苷酸 序列克隆到杆状病毒表达载体中,构建重组杆状病毒,接种 Sf9 昆虫细胞,经 过悬浮培养、收获、过滤,二乙烯亚胺 BEI 灭活病毒液后,加入适宜的佐剂混 合乳化制成。并利用自主分离鉴定副猪嗜血杆菌病多价流行菌株,通过优化培 养工艺,提高副猪嗜血杆菌培养密度,成功研制了猪圆环病毒 2 型-副猪嗜血杆 菌多联多价灭活疫苗。 
青岛农业大学 2021-04-11
结核杆菌蛋白酶体调控复合体ATPase作用机理
Mpa六聚体除了与真核生物蛋白酶体调节颗粒Rpt1-Rpt6蛋白六聚体以及古细菌PAN蛋白六聚体具有一定的结构同源性之外,还具有一些明显不同的结构特征:(1)结核杆菌Mpa具有形成双环的两个串联寡核苷酸/寡糖结合(OB)结构域,而古细菌蛋白酶体相关ATPase调控颗粒(PAN)和真核生物蛋白酶体ATPase调控颗粒复合体(Rpt1-6)每个蛋白亚基都只具有单个OB结构域;(2)Mpa在具有蛋白酶体活化功能的C末端之前具有一个泛素样的β-grasp结构域,而古细菌PAN和真核生物Rpt1-6蛋白复合体并不具有这样的一个β-grasp结构域 由于β-grasp结构域的存在,Mpa六聚体中各个蛋白亚基C末端被埋在结构核心中而没有暴露在蛋白复合体结构的表面,这就影响了C末端的GQYL基序与20S 蛋白酶体复合体的对接,从而阻碍了六聚化的Mpa与七次对称的28聚体的蛋白酶体相互作用。我们通过功能研究进一步解释了为什么单独的Mpa六聚体在体外情况下不能有效结合蛋白酶体核心颗粒并启动蛋白质特异性降解,结合晶体结构域功能研究,我们提出了结核杆菌蛋白酶体ATPase调控颗粒Mpa与20S蛋白酶体复合体这一分子量超过1100KDa蛋白质机器的作用模型
南方科技大学 2021-04-13
益生优良芽孢杆菌发酵关键技术研究开发与应用
益生优良芽孢杆菌是一类能对热、紫外线、电磁辐射等有强抗性的微生物。其独特优势可用来制成新型、高效、低残留的微生态制剂,广泛应用于工业、农业、医学等研究领域。目前,国内外益生芽孢杆菌产业化关键技术存在诸多问题。如:产品中活菌数低;有效期内活菌含量低造成货架期短;研发与生产脱节,研发单位工程技术应用相对滞后。针对当前问题,本技术攻克了芽孢杆菌发酵集成技术,包括: (1)N+离子诱变结合荧光探针追踪:利用低能离子注入技术对芽孢杆菌进行改良,筛选出性状优良的菌种。通过荧光探针追踪芽孢杆菌培养
南京工业大学 2021-04-14
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