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无需抗体的酶辅助化学标记N6-甲基腺嘌呤(m6A)测序技术
随着首个RNA修饰N6-甲基腺嘌呤(m6A)的去修饰酶FTO的发现,RNA表观遗传学/表观转录组学开始兴起并成为表观遗传学新的研究热点。m6A作为首个被发现的可逆RNA修饰,广泛存在于mRNA,依赖修饰酶、去修饰酶和结合蛋白发挥调控功能。已发现m6A具有调控mRNA剪接、出核、稳定性和蛋白翻译等功能,可以参与发育、配子发生、细胞重编程、生物节律、疾病等多种生理和病理过程的功能调控。为了更好地研究m6A生物功能和临床病理研究,开发m6A高通量测序技术一直是研究的热点。 现有m6A测序技术主要依赖于m6A抗体富集技术,包括低分辨率的m6A-seq/MeRIP-seq和联用iCLIP或PAR-CLIP技术的高分辨率m6A测序技术miCLIP 或PA-m6A-seq。抗体存在对特定RNA序列或结构的潜在非特异性结合,为了解决抗体方法的种种问题,研究者们做出了各种尝试,近期开发了两类无需抗体的m6A测序技术,一类为利用对特定甲基化序列(m6ACA)敏感的RNA核酸内切酶MazF辅助的测序方法(m6A-REF-seq or MAZTER-seq),此类方法只能检测16~25%的m6A位点;另一种是在细胞内表达融合m6A-binding domain(YTH)与胞嘧啶脱氨酶(APOBEC1)的融合蛋白实现的m6A测序(DART-seq),但该方法依赖于细胞转染效率且受限于体外样品的使用。 贾桂芳课题组一直致力于开发和利用核酸化学生物学技术研究RNA化学修饰在动植物中的生物功能研究。在本课题中,贾桂芳课题组巧妙地利用m6A的去甲基酶FTO蛋白作为催化剂,将mRNA上化学惰性的m6A转化为高反应活性的中间态产物N6-羟甲基腺嘌呤(hm6A),然后利用二硫苏糖醇(DTT)的巯基与hm6A发生亚胺1,2加成反应,将不稳定的hm6A转化为更稳定的巯基加成产物dm6A。dm6A上的自由巯基可以与甲烷硫代磺酸(methanethiosulfonate,MTSEA)快速反应,实现在mRNA上m6A的位置标记生物素Biotin,最终可被链霉亲和素珠捕获,从而富集含有m6A修饰的RNA片段供后续高通量测序使用。
北京大学 2021-04-11
甲苯-2,4-二氨基甲酸甲酯(TDC)生产技术
一、项目简介TDC为白色粉末状结晶,是一种重要的有机化合物。本项目是碳酸二甲酯(DMC)与2,4-二氨基甲苯(TDA)催化合成2,4-甲苯二氨基甲酸甲酯(TDC), 本工艺所用原料毒性低、污染小,反应条件温和,并且只有副产物甲醇。该工艺过程既可以直接用于制备TDC作为杀虫、杀菌和解热镇痛的药物,更主要的是由TDC制备TDI。二、市场需求与前景我国对甲苯二异氰酸酯(TDI)的需求很大,而且需求量呈逐年增长的趋势。主要依靠进口。而国内仅有的几家生产厂家,均是引进国外的光气法生产技术,使用有毒的光气、副产物氯化氢腐蚀设备且污染环境。新的TDI合成技术不仅可以顶替进口、填补国内空白,而且可以使我国在该领域处于世界先进水平,形成具有自主知识产权的TDI生产技术。本项目在温和反应条件下DMC与TDA催化合成TDC,后续工艺使TDC分解即得到TDI。此工艺所用原料毒性低、污染小,反应容易控制,只有副产物甲醇。甲醇又是气相氧化羰基化生产DMC的原料。因此两工艺相结合,可构成“零排放”的绿色合成工艺路线。本项目对于环境保护和化工生产安全具有重要意义,TDI有非常好的市场前景,项目投产后可望获得较高的经济效益。三、规模与投资年产500吨TDC,设备投资120万元。四、生产设备反应釜、过滤机、蒸发器、干燥器、换热器、精馏塔。五、效益分析本项目对于环境保护和化工生产安全具有重要意义,投产后可望获得较高的经济效益。
河北工业大学 2021-04-13
对-乙酰氨基苯乙酸(阿克他利)的合成工艺
项目研究背景 :风湿性及类风湿性关节炎( Rheumatoid Arthritis, RA ) 为一种常见易发病,较难治愈,致残率很高。流行病学调查显示我国的类 风湿关节炎患病率为 0.3 - 0.45%,估计此病患者约有 350-500 万之多。 对-乙酰氨基苯乙酸(阿克他利) ,系日本新药与三菱化成两公司共同 开发的疾病修饰性抗风湿新药 ,于 1994 年 5 月在日本首次推出,它是用
南昌大学 2021-04-14
年产1万吨绿色合成氨基甲酸酯项目
氨基甲酸酯可应用于医药、农药、染料、精细化工中间体,合成异氰酸酯、聚氨酯,工业涂料、可在许多过程替代剧毒的光气,在纤维改性、新材料合成方向发展很快。但由于国内却大部分企业工艺技术落后,生产成本高。存在三废、污染环境等问题,导致国内供不应求,每年进口2万余吨。 本课题组开发了绿色清洁生产新技术,过程安全、环保,成本降低40%以上,产品质量优异,优级品含量大于99.5%,具有很强的国际市场竞争力。 年产1万吨氨基甲酸酯,总投资4962 万元。
华东理工大学 2021-04-13
γ-氨基丁酸工业生产菌代谢工程系统改造
本项目分别从乳酸菌和大肠杆菌出发,通过基因工程和代谢工程改造菌株,并优化菌株发酵条件和发酵策略,提高了生物合成 GABA 的产量和生产效率, 1 L以玉米芯水解液为碳源的培养基中的培养的 L. buchneri WPZ001 细胞通过静置发酵和静息细胞转化累计可得到 GABA 117 g。主要创新点结论如下:发现 L. buchneri WPZ001 可利用木糖或玉米芯水解液为碳源生长并通过静置发酵高产 GABA;发现 E. coli BL21(DE3)/pET20b-torA-gadB 在信号肽 TorA 引导下可有效分泌表达 GadB 并可用于高效生产 GABA;发现在大肠杆菌中表达 Weimberg 途径可将木糖合成 GABA 的精简为 7 步反应;E. coli JWZ08/pWZt7-g3/pWZt7-xyl 以木糖直接合成 GABA 产量是此前葡萄糖直接合成 GABA 的报道的 3 倍。 
江南大学 2021-04-11
间三烷氧基苯基二烷基膦四氟硼酸盐及其合成和应用
本发明涉及间三烷氧基苯基二烷基膦四氟硼酸盐及其合成方法和在钯催化的碳-氯键活化后的Suzuki偶联反应中的应用。本发明的间三烷氧基苯基二烷基膦四氟硼酸盐,在反应体系中与钯催化剂进行配位,可以高选择性的激活惰性碳-氯键,并与体系中的有机硼酸发生Suzuki偶联反应,得到对应的偶联化合物。本发明简洁一步合成在空气中能稳定存在的三烷氧基苯基二烷基膦四氟硼酸盐,与其他已知的用于碳-氯键活化的配体的合成方法相比,本发明的合成方法路线短,操作简单。
浙江大学 2021-04-11
乙酰水杨酸的合成方法
乙酰水杨酸的合成方法,涉及化学合成技术领域,先将ZrOCl2·8H2O固体溶于去离子水中,再加入偏钨酸铵水溶液,尿素水溶液,回流后冷却,以氨水调节pH值,经超声处理并陈化后抽滤洗涤,干燥后经焙烧制得WO3/ZrO2固体超强酸催化剂;再在反应容器中加入水杨酸,乙酸酐和催化剂,加热,待反应结束后趁热抽滤;取滤液经水解过量乙酸酐,静置冷却,析出白色晶体,以冰水冷却至完全结晶;将白色晶体经抽滤,冷水洗涤,得到乙酰水杨酸粗品,再用乙醇和水混合溶剂重结晶得到乙酰水杨酸.本发明改进了WO3/ZrO2固体超强酸的制备工艺,引入超声处理,催化剂回收再生容易,可保持高活性重复使用,对环境友好.
扬州大学 2021-05-07
从橡胶种子中提取制备植酸
植酸 (Phytic acid) 又名肌醇六磷酸酯,其分子式为C6H18O24P6,广泛地应用于食品、化工 等工业。植酸可以有效地抑制油脂的氧化酸败,用植酸配制海鲜产品和其他水产品保鲜剂效果 非常明显,如鲜虾经植酸处理后,保质期大大延长。植酸对果蔬同样有良好的保鲜效果,如植 酸应用于草莓保鲜,可以延缓果实中维生素C的降解等作用。若用植酸代替硝酸盐加入酱制品 中,可保持色泽,而没有硝酸盐对人体的危害。 
华东理工大学 2021-04-11
生物法制备核苷酸及其应用
核苷酸是一类十分重要的具有生理活性的生化物质,广泛应用于医药、乳业等行业。本项目技术在生物法生产核苷酸的关键技术上取得了重大突破,(1)筛选得到新的产核酸酶P1的菌株,并首次利用气升式生物反应器高效制备核酸酶P1,酶活较国内水平提高近10倍,达到了5000 u/mL;(2)利用反应-分离耦合新技术催化RNA降解,核苷酸浓度较国内其他单位高2-3倍,达到了30 g/L;(3)采用高效的吸附/膜分离集成技术分离核苷酸,分离收率达到90%以上,较其他方法提高5-10%,能耗、污染物排放大幅度降低;(4)发明了醇析和盐析的复合结晶新技术及反应结晶新技术,结晶收率达到90%以上,较其他方法提高5-10%,产品质量符合国际标准。应用领域: 广泛应用于医药、乳业等行业。
南京工业大学 2021-04-13
铝酸铈纳米棒电子封装材料
简介:本发明公开了一种铝酸铈纳米棒电子封装材料,属于结构材料技术领域。本发明铝酸铈纳米棒电子封装材料的质量百分比组成如下:铝酸铈纳米棒65‑80%、聚乙二醇3‑6%、聚丙乙烯3‑6%、木质素磺酸钠0.05‑0.5%、甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷3‑8%、乙烯‑四氟乙烯共聚物10‑15%,铝酸铈纳米棒的直径为30‑100nm、长度为1‑2μm。本发明提供的铝酸铈纳米棒电子封装材料具有耐老化及耐腐蚀性能优良、易加工、绝缘性好、热膨胀系数小、导热系数高等特点,在电子封装领域具有良好的应用前景。
安徽工业大学 2021-04-13
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