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一种新的探针制备方法
01. 成果简介 荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是一种以荧光标记取代同位素标记而形成的新的原位杂交方法。其通过杂交探针序列及其荧光,能提供标记位点在细胞核内的空间位置信息,与基于染色质构象捕获(Chromatin Conformation Capture,3C)等各种生物技术(如4C,5C,HiC,ChIA-PET等)互补,成为研究染色质结构不可或缺的重要技术之一。 传统的荧光原位杂交技术一般以含有目标物种来源的一段完整基因组片段作为模板,通过生物酶的作用进行片段化,之后进行荧光标记做出杂交探针,再固定细胞中,通过碱基互补配对原理对特定的基因组片段进行荧光标记并成像,获得具体的核内空间信息。但是,传统的原位杂交技术受限于模板本身的特性,具有准备时间长、所需模板量大、基因分辨率低、克隆中含有重复片段、需要加入物种特异的Cot-1DNA等缺点。尤其是其分辨率低的特点(分辨率在百kb的数量级),让它在应用中受到了很大的限制。 本项成果提供了一种新的针对目标核酸靶标探针的制备方法(见图1),该方法比传统的FISH技术的分辨率提高了1-2个数量级(见图2),可应用于传统荧光原位杂交因分辨率不够而不能探测、或者被错误探测的地方。该成果的具体步骤(见图1)包括:(1)获取感兴趣的靶DNA序列;(2)使用转座酶将靶DNA序列进行片段化的同时,在片段化的DNA序列两端加上接头序列;和(3)利用所述接头序列,获取所述片段化的DNA序列,以产生探针。本项成果的技术优势在于:快速高效、模板需求量低、基因组分辨率高、且不需要Cot-1DNA。 图1 探针制备方法的具体步骤。 02.应用前景 本项成果是一种快速高效、模板需求量低、基因组分辨率高、且不需要Cot-1DNA的荧光原位杂交方法,可作为现有的传统荧光原位杂交技术的可选替代方案。尤其是该方法的分辨率高,比传统的FISH技术的分辨率高1-2个数量级(见图2),因此可应用于传统荧光原位杂交因分辨率不够而不能探测、或者被错误探测的很多地方。 例如,在基因组的三维结构中,TAD(拓扑结构域)是结构和功能的基本单元。TAD内部和TAD之间的增强子和启动子发生的错误的相互作用,是一些癌症发生的根本原因。而传统的FISH技术因为分辨率的限制,探测不到这些错误的相互作用。因此本项成果在临床有着广泛的应用,可以用于癌症及一些其它疾病的极早期检测。 图2  相比于传统的BAC FISH(图上方绿条,长度为152kb),仅用1.170 kb(红条)长的TN5探针,就可以得到要标记的基因组位点的图像。 图中细胞核(蓝色)中,红色和绿色的点相互重叠,说明Tn5 FISH可以用传统的BAC FISH进行验证。黄色箭头表示用Tn5 FISH(红色通道,左上角插入图)或BAC- FISH(绿色通道,左下角插入图)进行成像。图中比例尺为5μm。03. 知识产权 本项成果已申请1项国内发明专利,目前正在申请国际专利。04. 团队介绍 本项目团队负责人为清华大学教授、博士生导师,国家首批千人。团队的主要研究方向涉及:生物信息学和基因组三维结构新方法的开发,利用细胞超分辨率成像、分子成像和生物信息学的方法进行基因组三维结构和系统生物学的研究选。团队负责人曾多次主持或参与美国NIH的R01科研项目、中国国家自然科学基金及科技部的科研项目,已发表高水平学术论文200余篇。05. 合作方式 专利许可、合作开发。06. 联系方式 邮箱:zhangxinrui@tsinghua.edu.cn
清华大学 2021-04-13
TH DRM 精简的数字版权管理系统
1 成果简介TH DRM 提供了一套完整的跨平台的数字媒体内容版权保护解决方案,并使用精简的数字作品权利对象描述方法和获取协议,解决了在嵌入式、移动设备上运算、存储能力有限的问题。2 技术指标符合中国广播影视数字版权管理论坛( ChinaDRM)标准;支持精简的数字作品权利对象描述方法和获取协议( CROD & CROAP);支持 Windows、 Linux、 Android 等系统;支持同 PC、手机、 STB 等设备进行集成。3 应用说明为新媒体业务提供必要的版权保护,如 IPTV、手机电视等,对应多种灵活的商业模式。4 效益分析保障公共媒体安全,为建立健康的新媒体产业链保驾护航,为内容制作商的合法权益提供必要的技术保障。
清华大学 2021-04-13
面向领域信息服务的智能交互技术
1 成果简介面向领域信息服务的智能交互技术与应用——通过对文本自然语言进行语义抽取,结合领域信息内容和服务特点,向公众提供智能的多回合交互式信息服务,适用于多种本地化生产生活信息查询,以及客户服务咨询。2 应用范围项目成果可广泛应用于网页、手机 WAP、手机短信、即时通讯软件等的后台,从前台接收用户给出的文本内容(关键词或自然语言),自动以合适的形式给出信息回馈。项目成果的应用,可使广大用户在任何时候、任何地方都能方便及时地获取精准的信息,同时又极大地减少后台支持的人力资源成本。项目成果的广泛应用,有利于推进信息数字化建设,随着更多信息服务的推广,逐渐扩大信息服务市场并形成智能信息服务产业,同时推动通讯相关技术和产业的发展。 广东省和大珠三角地区的信息产业、高端信息服务商将直接受益,与数字媒体网络行业相关的企业也可间接受益。3 效益分析每年节省信息服务行业的人力资源成本上亿元,提升信息增值产业的经济效益。促进信息流通,满足公众对信息获取的需求,提升信息获取的满意度。
清华大学 2021-04-13
尿沥康宁片的新药开发研究
本方主治之尿路感染是所有细菌感染中最常见的一类疾病,在中医学称为淋证。根据国内的调查统计,其发病率占总人口的0.91%,女性的发病率可高达2.05%,与美国的报道相近。本病男女老少均可发生,尤以女性常见,约有30%的妇女有过尿路感染的经历,而且约有6%的妇女每年会出现一次症状性尿路感染。该病的男女发病率之比为1∶9,已婚与未婚者发病率之比为12.8∶1。 尿路感染的临床特点主要表现为尿频、尿急、尿痛,亦有少数患者无临床症状而依靠实验室检查才能确诊。 中医学认为淋证的病因与外感病邪、饮食不节、情志失调、劳倦过度等因素有关。上述病因均可导致开节失调,湿热雍结膀胱,膀胱气化不力而成。中医采用辨证分型的方法治疗淋证,祛邪兼顾扶正,改善临床症状的作用较佳,与西药的抗菌药物相比较,虽在抗菌方面的优势不明显,但产生耐药性的机会较小,副作用少,且可调理患者全身状况,提高机体免疫机能,有利于减少复发和再感染。因此, 研制和开发主治淋证的中药新药,具有较好的市场前景。
北京理工大学 2021-04-13
一种煤的脱碱方法
本发明公开了一种煤的脱碱方法,包括以下步骤:(1)将待脱碱 的原煤进行破碎,得到煤粉;(2)将步骤(1)中得到的煤粉与洗脱液进行 混合,得到煤水混合液,所述洗脱液为水溶性有机溶剂的水溶液,其 中水溶性有机溶剂的体积分数在 5%至 20%之间;(3)向步骤(2)中得到 的煤水混合液通入含二氧化碳的气体,在 20~60℃下搅拌浸洗 3~24 小时,使得二氧化碳过量;(4)将经步骤(3)处理的煤水混合液进行固液 分离,得到的固形物干燥后即为脱碱煤。本方法脱碱效果好,反应条 件温和,工艺简单,成本低廉。
华中科技大学 2021-04-13
改进的苦参薄层色谱鉴别方法
本专利(专利号:ZL201310124826.4 ,发明人系荣昌校区教师,长期从事新中兽药的硏发),首次提供了 一种改进的苦参薄层色谱鉴别方法,供试品溶液的制备简单、省时;苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱三种组分 能够在同一薄层板上展开;单一显色剂显色,显色斑点清晰,保留时间长,结果易于判断,且显色剂能够长 期保存使用。根据2010版兽药典中所叙述的通过薄层色谱鉴别方法对苦参的指标成分苦参碱、氧化苦参碱和 槐定碱来判断苦参的真伪,存在以下问题:(1 )供试品溶液的制备采用浸泡法,耗时较长(约需12小 时),指标成分溶出率较低;(2)薄层色谱鉴别需用到两块薄层板,三种展开剂,两种显色剂,进行三次展 开操作和四次显色操作,且两种展开剂的配制需要在10°C以下放置,显色剂碘化祕钾试液在常温下保存易产 生沉淀,需现配现用,整个过程繁琐、耗时;(3)该方法的显色原理实际是先用碘化祕钾试液进行显色,再 用亚硝酸钠乙醇试液进行脱色,在显色和脱色时剂量较难控制,容易造成显色过深或者脱色过度,影响对结 果的判断。
西南大学 2021-04-13
发展循环经济的政府制度创新研究
北京工业大学 2021-04-14
高性能纳米沥青的开发与研究
北京工业大学 2021-04-14
处理染料废水的豆渣吸附剂
北京工业大学 2021-04-14
生产高性能铝材的联合新技术
以传统铝合金为基体,高温熔炼时引入微纳尺度的增强粒子,通过强化基体,制备出微纳粒子强化铝基复合材料;并在熔炼过程中选择性施加电场、磁场、超声场等物理场,制备的材料具有粒子生成效率高、产量大和高弥散分布的特征;进一步在复合磁场下进行连续铸造成型,铸态材料具有致密度高、晶粒细小、粒子弥散、组织差异小的特征。根据铝合金组分含量差异进行差异性后处理:对于铸造铝合金,比如 ZL101 等,按照固溶时效制度处理后进入低温时效循环处理;对于变形铝合金,比如六系列和七系列铝合金,铸造成型后要进行均质处
江苏大学 2021-04-14
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