本发明提供一类具有酪氨酸酶抑制活性的化合物的制备方法，包括六种从桑叶中提取的具有酪氨酸酶抑制活性的多酚类化合物。通过将药材经乙醇水溶液加热提取，浓缩，硅胶柱分离，洗脱，洗脱液浓缩干燥，再用制备液相色谱继续分离，收集溶液，溶液浓缩干燥后得到样品并进行结构鉴定。本发明还提供了从桑叶中分离上述多酚类化合物的方法。本发明提供的六种多酚类化合物具有较强的酪氨酸酶抑制活性，能够有效预防和治疗黑色素合成异常导致的人体色素沉着性疾病、黑色素瘤以及其它需要抑制酪氨酸酶活性的病症，可用于制备治疗此类疾病的药物。

(R)-硫辛酸是一种能消除老化与致病的类似维他命的物质，可以去除机体自由基，促进机体利用葡萄糖合成维生素C，能有效去除黑色素，还可协助辅酶进行有利于机体免疫力的生理代谢，是一种万能抗氧化剂药物，广泛应用于预防和治疗心脏病、糖尿病及老年痴呆症。而近年来欧美国家开始将其应用于食品、保健品及化妆品，应用范围的扩展为其市场增长提供了广阔的空间。目前 (R)-硫辛酸的生产主要是通过化学拆分法合成 (化学拆分法合成途径) ，即先通过化学法合成混旋硫辛酸，再利用苯乙胺作为拆分剂对其进行拆分，得到的右旋硫辛酸苯乙胺盐，经盐酸脱盐得到 (R)-硫辛酸粗品，精制后即可得到合格的 (R)-硫辛酸。但由于该法工艺复杂，需要多次结晶，成本高、理论得率仅为50%。 本技术利用酶法不对称还原8-氯-6-羰基辛酸乙酯制备 (S)-8-氯-6-羟基辛酸乙酯，再结合化学法合成 (R)-硫辛酸的工艺路线 (化学-酶法合成途径) ，可使 (R)-硫辛酸的合成步骤由化学-拆分法的9步缩减到化学-酶法的6步、产品收率提高40%、生产成本降低20%，而且也显著地减少了原料消耗和废物排放，是典型的环境友好的绿色合成工艺。合成的最终产品 (R)-硫辛酸的光学纯度在99%以上，其产业化更具有经济效益、更符合绿色技术的要求。

氯吡格雷 (Clopidogrel) ，商品名波立维 (Plavix) ，是抑制血小板聚集的药物。年销售额超过百亿美元，是目前世界上排名第二位的重磅炸弹级药物。 (R)-邻氯扁桃酸甲酯是氯吡格雷原料药合成的重要前体化合物，酶促邻氯苯甲酰甲酸甲酯不对称还原是制备 (R)-邻氯扁桃酸甲酯的重要方法，具有转化率高、产品光学纯度好、环境污染小等显著优点。 本项目我们通过广泛筛选，获得一个高立体选择性的羰基还原酶，将其与葡萄糖脱氢酶共克隆表达于大肠杆菌中，使用重组大肠杆菌整细胞在单水相体系中高效催化邻氯苯甲酰甲酸甲酯的不对称还原，使用廉价的葡萄糖作为辅底物，反应体系中无需额外添加价格昂贵的辅酶，反应体系简便，原料成本低廉。底物浓度可高达600 g/L，完全转化，产物 (R)-邻氯扁桃酸甲酯的得率高于90%，光学纯度高于99.9%。具有很好的产业化前景。

阿托伐他汀，又名立普妥，能够降低血浆胆固醇和脂蛋白水平，是目前世界销售排名首位的重磅炸弹级药物，年销售额超过百亿美元。 (S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯是阿伐他汀手性侧链合成的重要前体化合物，酶促4-氯-乙酰乙酸乙酯不对称还原是制备 (S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的重要方法，具有转化率高、产品光学纯度好、环境污染小等显著优点。 本项目我们通过广泛筛选，获得一个高立体选择性的羰基还原酶ScCR，该酶可以在有机/水两相体系中高效催化4-氯-乙酰乙酸乙酯的不对称还原，使用廉价的异丙醇作为辅底物，无需额外添加辅酶再生用酶，反应体系简单。使用含该酶的大肠杆菌整细胞作为催化剂，底物浓度可高达600 g/L，完全转化，产物 (S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的得率达96%，光学纯度高于99%。具有很好的产业化前景。

该项目研制了一种能识别甲睾酮的特异性单克隆抗体, 它是由保藏号为CCTCC NO:C201493的杂交瘤细胞株MT9C10所分泌的。形成的检测甲睾酮的酶联免疫技术和试剂盒，与现有技术相比，制备的单克隆抗体可以识别甲睾酮，识别灵敏度高，特异性好，该项目ELISA技术和试剂盒检测灵敏度、准确度高，精密度好。 甲睾酮是一种人工合成的甾体类雄激素，具有环戊烷多氢菲的基本结构，在兽医临床上，甲睾酮被大量应用在畜牧养殖业中，能够促进蛋白质的合成和骨骼肌的生长，通过抑制脂肪的增长，从而使肌肉变发达，并且能够刺激动物对食物的欲望，使动物的日增重提高，同时大大提高了饲料的利用效率。 成果完成时间：2017年

1、成果来源、成果被评价及认定（发明专利授权号）等情况 本项目来源于国家“十二五”科技支撑计划项目“大宗粮食绿色加工技术与 产品”中课题“玉米淀粉加工关键技术研究与示范（2012BAD34B07，479 万元， 研究起止时间：2012.01-2014.12）”和国家自然科学基金“酶法选择性合成单一 类型环糊精的控制策略研究（31101228，25 万元，研究起止时间：2012.01- 2014.12）”，属于农产品深加工科学技术领域。本项目累计申请发明专利 7 项（1 项获授权），发表论文 11 篇（8 篇被 SCI 收录），于 2015 年 7 月通过中国粮油学 会鉴定，获国际先进评价。 2、主要技术内容、作用、对行业的意义，获奖情况 CGT 酶生产环糊精最不利的条件之一是产物特异性差，给产物的分离纯化 带来很大不便。同时，CGT 酶存在的另一大缺陷是其热稳定性较差，由于在环糊 精工业化生产中，底物淀粉首先要经过高温糊化、液化处理，然后降温至适当温 度进行环化反应，若 CGT 酶能够适应更高的反应温度，势必有助于提高反应效率， 因此，有必要改善 CGT 酶的热稳定性，提高其催化效率，进而有效降低环糊精生20 产成本。本项目主要是通过改善 CGT 酶产物特异性和热稳定性，提高该酶的使用 性能，将其应用于环糊精的工业化生产中，能显著降低环糊精的生产成本，促进 环糊精在各个领域的广泛应用。因此，随着环糊精在食品、医药等领域中的应用 越来越广阔，开发改善 CGT 酶使用性能的关键技术显得尤为重要，具有很好的推 广应用前景。 3、成果的技术指标、创新性与先进性 本项目在长期从事淀粉生物转化研究的基础上，针对环糊精工业化生产过程 中 CGT 酶的产物特异性和热稳定性较差问题，通过深入研究和不懈努力，逐步改 善了 CGT 酶的产物特异性和热稳定性，突破了关键技术，并实现了具有理想产物 特异性和热稳定性的β-CGT 酶突变体在酶法生产β-环糊精中的应用。该酶使用 性能改善易操作，具有很好的应用价值，技术位于国际领先水平。与国内外同类 技术相比，具有以下创新： ①针对 CGT 酶产物特异性较差的问题，确定了 CGT 酶的产物特异性与其一级 结构的相关性，获得构建具有理想产物特异性的 CGT 酶突变体的简单可行方法， 为从本质上改善 CGT 酶的产物特异性提供理论基础； ②针对 CGT 酶热稳定性较差的问题，采用定点突变技术阐明了重要氨基酸残 基对 CGT 酶热稳定性产生影响的规律，获得了构建具有理想热稳定性的 CGT 酶突 变体的简单可行方法，为从根本上改善 CGT 酶的热稳定性打下了基础； ③ CGT 酶使用性能的改善方法简单易行，所得到具有理想产物特异性和热 稳定性的酶突变体可直接应用于β-环糊精的工业化生产，能提高β-环糊精的得 率，降低β-环糊精的生产成本。 

随着首个RNA修饰N6-甲基腺嘌呤（m6A）的去修饰酶FTO的发现，RNA表观遗传学/表观转录组学开始兴起并成为表观遗传学新的研究热点。m6A作为首个被发现的可逆RNA修饰，广泛存在于mRNA，依赖修饰酶、去修饰酶和结合蛋白发挥调控功能。已发现m6A具有调控mRNA剪接、出核、稳定性和蛋白翻译等功能，可以参与发育、配子发生、细胞重编程、生物节律、疾病等多种生理和病理过程的功能调控。为了更好地研究m6A生物功能和临床病理研究，开发m6A高通量测序技术一直是研究的热点。 现有m6A测序技术主要依赖于m6A抗体富集技术，包括低分辨率的m6A-seq/MeRIP-seq和联用iCLIP或PAR-CLIP技术的高分辨率m6A测序技术miCLIP 或PA-m6A-seq。抗体存在对特定RNA序列或结构的潜在非特异性结合，为了解决抗体方法的种种问题，研究者们做出了各种尝试，近期开发了两类无需抗体的m6A测序技术，一类为利用对特定甲基化序列（m6ACA）敏感的RNA核酸内切酶MazF辅助的测序方法（m6A-REF-seq or MAZTER-seq），此类方法只能检测16~25%的m6A位点；另一种是在细胞内表达融合m6A-binding domain（YTH）与胞嘧啶脱氨酶（APOBEC1）的融合蛋白实现的m6A测序（DART-seq），但该方法依赖于细胞转染效率且受限于体外样品的使用。 贾桂芳课题组一直致力于开发和利用核酸化学生物学技术研究RNA化学修饰在动植物中的生物功能研究。在本课题中，贾桂芳课题组巧妙地利用m6A的去甲基酶FTO蛋白作为催化剂，将mRNA上化学惰性的m6A转化为高反应活性的中间态产物N6-羟甲基腺嘌呤（hm6A），然后利用二硫苏糖醇（DTT）的巯基与hm6A发生亚胺1,2加成反应，将不稳定的hm6A转化为更稳定的巯基加成产物dm6A。dm6A上的自由巯基可以与甲烷硫代磺酸（methanethiosulfonate，MTSEA）快速反应，实现在mRNA上m6A的位置标记生物素Biotin，最终可被链霉亲和素珠捕获，从而富集含有m6A修饰的RNA片段供后续高通量测序使用。

我校一项科研成果《中国体育发展方式改革研究——由“赶超型”到“可持续发展型”》入选2015年度《国家哲学社会科学成果文库》（以下简称《成果文库》）。2015年《成果文库》共申报378项，经过专家评审和社会公示等程序遴选，最终有58项成果入选。 《成果文库》的设立和评选，是贯彻落实中央关于繁荣发展哲学社会科学精神的重要举措，是推进学术创新、引导学风建设的重要途径，也是国家表彰奖励哲学社会科学研究优秀成果的重要形式。《成果文库》入选成果反映了当前我国哲学社会科学研究相关领域的领先水平，代表着较高的学术荣誉。 《中国体育发展方式改革研究——由“赶超型”到“可持续发展型”》是国家社科重大项目《中国体育发展方式改革研究》的研究成果，课题编号10&ZD053。

产品详细介绍h1 DQP-600型（手提型） 电动气溶胶喷雾器 产品介绍：　本产品应用广泛，是医院、鸡场、鸭场、防疫站、消毒站、机关食堂、车站码头、仓库、轮船车辆等室内条件空气消毒、杀菌、杀虫、除臭、加湿的理想器具。曾在2003年的SARS预防工作方面做出了重要的贡献！在目前全球流行的H1N1流感中也得到了广泛的应用。主要特点：l 携带方便；l 流量可调；l 质量可靠； 技术参数：l电　   源：交流220V 50Hz l功　  率：600W l喷雾流量：0-700毫升/分（可调）l粒谱直径：5-100微米l喷雾射程：5-6米 l药液容量：250毫升或1200毫升 l整机重量：约1.5Kg h2 DQP-800型(臂挎型) 电动气溶胶喷雾器产品介绍：　本产品应用广泛，是医院、鸡场、鸭场、防疫站、消毒站、机关食堂、车站码头、仓库、轮船车辆等室内条件空气消毒、杀菌、杀虫、除臭、加湿的理想器具。曾在2003年的SARS预防工作方面做出了重要的贡献！在目前全球流行的H1N1流感中也得到了广泛的应用。主要特点：l容量大；l携带方便；l喷雾射程远；l在空气中滞留时间长；l流量可调；l质量可靠；技术参数：l电　　源：交流220V 50Hz l功　　率：800W l喷雾流量：0-700毫升/分（可调）l粒谱直径：5-100微米l喷雾射程：7-10米 l药液容量：6-8升l整机净重：约2Kg h3 DQP-1200A型(移动型) 电动气溶胶喷雾器产品介绍：　本产品应用广泛，是医院、鸡场、鸭场、防疫站、消毒站、机关食堂、车站码头、仓库、轮船车辆等室内条件空气消毒、杀菌、杀虫、除臭、加湿的理想器具。曾在2003年的SARS预防工作方面做出了重要的贡献！在目前全球流行的H1N1流感中也得到了广泛的应用。主要特点：　本电动喷雾器是一种新型电动手提移动式多用途的气溶胶喷雾器，喷洒部件采用耐腐蚀的工程塑料制作；雾化效率高，喷出的雾滴细、在空气中滞留时间长粒谱集中，能够杀死附着在空气灰法颗粒上的病毒、细菌；可喷洒氧化性较强的消毒、杀虫制剂(如过氧乙酸等)。更适合于医院、宾馆、机场等公共场所消毒、杀虫、加湿等用途。技术参数：l电动手提移动式多用途气溶胶喷雾器,喷洒部件采用耐腐蚀的工程塑料制作；l金属外壳外加消音套，使噪音小于55dB；l电源：交流220V/50HZ；l功率：1200W；l喷雾射程；8～10m；l喷雾流量：0～700ml/min（连续可调）；l粒谱直径：0-100微米连续可调： 20-50微米，用于喷雾给药； 50-70微米，用于喷雾免疫；　　　　　　　70-100微米，用于喷雾消毒；l药液容量：1.2升；l整机重量：约5.5Kg。  h4 ZR-4010C 电动气溶胶喷雾器产品简介ZR-4010系列药物气溶胶发生器是我公司最新研制的电动气溶胶喷雾设备，通过更换不同的喷嘴可实现吸入治疗和免疫给药、空气消毒、表面消毒等功能。该仪器外观新颖、操作简单、携带方便、喷洒药液效率高，很适合养殖场、各类医院、学校、政府单位、汽（火）车站、礼堂、出入境检验检疫、海关等部门场所的给药、消毒、免疫等。执行标准Q/0212 ZRB002-2010       药物气溶胶发生器技术特点采用气流雾化原理将药液以高速和极微细的雾状颗粒喷出。更换不同的喷嘴，控制喷雾粒径大小，可适应不同的场合及用途。首创的独立过滤器设计，可更换滤芯，保证了该仪器能够在恶劣环境下稳定 工作。外壳采用高强度工程塑料制造，防摔耐磨。技术指标主要参数指标粒谱直径1号喷嘴（10±5）um, 用 于 吸 入 治 疗 和 免 疫 给 药2号喷嘴（20±10）um, 用 于 空 气 消 毒3号喷嘴（50±10）u m , 用 于 表 面 消 毒4号喷嘴（100±10）u m , 用 于 表 面 消 毒喷雾时间1号喷嘴约30 m i n / L2号喷嘴约20 m i n / L3号喷嘴约10 m i n / L4号喷嘴约5m i n / L药液容量C型2.0L静风喷雾射程>6 m工作温度范围（0～40）℃主机尺寸W×D×H（5 2 0 ×1 4 2 × 2 3 0） m m仪器噪声<80dB(A)整机重量约3.5kg工作电源AC220V±10%，50Hz功耗<1000Wh5 DQP-20L型(推车式，药液容量20升) 电动气溶胶喷雾器  1  用途与特点：    本产品是一种可喷洒消毒剂或杀虫剂的电动气力超低量喷雾器。特点是：消毒剂或杀虫剂经过加压装置（动力及连接部件）、释放装置（喷洒部件）在空气中形成悬浮的液态微粒，从而起到对喷洒范围内空气及表面的杀菌消毒作用。    本产品广泛满足医院病房、手术室、无菌室，宾馆客房、厨房、餐厅、储藏室、食品加工间，养殖场、动物房、仓库、温室及轮船、飞机、车辆等场所对喷雾消毒灭菌、杀虫、除臭、加湿的需要。    本产品结构新颖，轻便牢靠，效率高，维护使用方便。动力采用1800W高速气泵。动力部件与喷洒部件之间用波纹软管连接。通过本机特有的喷头操作机构，操作人员只需轻推、拉喷头手柄调整好喷头角度，打开电源开关，就能轻而易举的向你所要喷雾的地方喷雾。若踩下万向轮刹车固定喷雾器后，可实现无人喷洒。需要增大喷雾范围时，抬起万向轮刹车，手把左右转动即可。喷洒部件是采用耐腐蚀工程塑料制造的新型专利产品（专利号为92201249.0），可喷洒氧化性较强的各种水基和油基的消毒剂或杀虫剂。 2  结构及工作原理：2.1整机由四部分组成：?·动力部分：电机壳内装有电动离心风机组件。?·连接部件：由特有的喷头操作机构及波纹管两端的接头组成。?·喷洒部件（专利号9221249.0）：由喷头外罩、端部压盖等部件组成。?·药液箱：由药液箱进风管、输液管、隔板阀组成。2.2工作原理：    工作时，电机带动离心风机旋转产生气流，经气泵出口进入波纹软管，另外有一部分气体通过导气管进入药液箱，把药液通过导液管导进喷洒部件，经雾化组件形成漩涡气流从喷口喷出，喷雾嘴设置在漩涡气流的中心。药液在气压和漩涡气流的吸引下溶进气流中被雾化成微小气溶胶雾粒，随气流一起喷出，形成气溶胶洒向目标空间，达到空气消毒、杀虫的目的。 3  技术参数：3.1 电动推车式多用途气溶胶喷雾器,喷洒部件采用耐腐蚀的工程塑料制作3.2 金属外壳外加消音套，使噪音小于55dB3.3 电    源：交流220V/50HZ3.4 功    率：额定输入功率1800W3.5 喷雾射程；12～15m3.6 喷雾流量：0～1000ml/min （连续可调）3.7 粒谱直径：0-100微米连续可调；              20-50微米，用于喷雾给药；              50-70微米，用于喷雾免疫；              70-100微米，用于喷雾消毒；3.8 药液容量：20L3.9 握持处温度：不大于45摄氏度3.10整机净重：20公斤   毛重：25公斤（含包装）4  使用方法：4.1 检查电源应符合使用要求：220V 50Hz 10A。4.2将配好的药剂加入药液箱或药液瓶，加液完成后盖好密封盖。4.3插上电源，轻推、拉喷头手柄调整好喷头角度，将喷头流量旋钮旋至需要位置（一般旋至最大），打开机箱后面电源开关，就能轻而易举的向你所要喷雾的地方喷雾。若踩下万向轮刹车固定喷雾器后，可实现无人喷洒。需要增大左右喷雾范围时，抬起万向轮刹车，手把左右转动即可。4.5本机可连续工作30分钟。（为保证机器寿命，在室温比较高时喷洒15分钟后应停机休息10分钟。） 5  注意事项：5.1药液桶内有药液时，不可侧放或倒置（包括喷洒完后药液桶内有残液时），以防药液进入电机仓损坏电机。5.2启动电机时，喷头不能对着有人的方向必须向空间。5.3本产品作杀虫用时不能喷洒剧毒农药。5.4本产品是气溶胶级电动气力超低量喷雾器不能喷洒低闪点的油剂，现场禁止有明火。5.5为保证人身安全，在使用本机时请做好个人防护。5.6每次喷液完毕后，务必使用清水对药液箱、管路及喷头进行喷洒清洗。5.7清洁机具外壳及附件，可用沾有肥皂水的软布擦拭，注 意：不要用汽油或酒精等擦拭，不可用水冲洗电器以免引起漏电或短路。 6  故障维修：1、故障名称：电动机不能启动或运行时自动停机。             排除方法：1、检查电源及插头；2、检查电机开关，修理或更换。2、故障名称：电机运转正常、风量正常，但没有水雾喷出。             排除方法：1、拧紧药液桶盖；2、检查喷头中间喷液孔是否堵塞，可用小螺丝刀通开；3、检查进风管或输液管，维修或更换。3、故障名称：电机运转正常，风压不足或喷雾量小。             排除方法：1、检查出风管（黑色波纹管），连接密封或更换； 4、故障名称：电机声音异常或出风有异味。             排除方法：1、更换电机或碳刷。h6 DQP-1200B型(推车式) 电动气溶胶喷雾器产品介绍：　本产品应用广泛，是医院、鸡场、鸭场、防疫站、消毒站、机关食堂、车站码头、仓库、轮船车辆等室内条件空气消毒、杀菌、杀虫、除臭、加湿的理想器具。曾在2003年的SARS预防工作方面做出了重要的贡献！在目前全球流行的H1N1流感中也得到了广泛的应用。主要特点：　本电动喷雾器是一种新型电动推车式多用途的气溶胶喷雾器，喷洒部件采用耐腐蚀的工程塑料制作；雾化效率高，喷出的雾滴细、在空气中滞留时间长粒谱集中，能够杀死附着在空气灰法颗粒上的病毒、细菌；可喷洒氧化性较强的消毒、杀虫制剂(如过氧乙酸等)。更适合于医院、宾馆、机场等公共场所消毒、杀虫、加湿等用途。技术参数：l电动推车式多用途气溶胶喷雾器,喷洒部件采用耐腐蚀的工程塑料制作；l金属外壳外加消音套，使噪音小于55dB；l电源：交流220V/50HZ；l功率：额定输入功率1400W；l喷雾射程；10～12m；l喷雾流量：0～700ml/min（连续可调）；l粒谱直径：0-100微米连续可调： 20-50微米，用于喷雾给药； 50-70微米，用于喷雾免疫；70-100微米，用于喷雾消毒；l药液容量：10升；l整机重量：约7.5Kg。    

本项目涉及阿尔茨海默症基因治疗法与治疗领域。更具体地，本发明涉及利用基因工程技术构建含有 dhcr24 基因的复制缺陷型重组腺病毒，以及这些腺病毒载体在将 dhcr24 基因转移入细胞以及实现 DHCR24 蛋白在神经细胞等细胞中特异性过表达的应用。制备的重组腺病毒有望在阿尔茨海默症以及糖尿病等疾病的基因治疗中获得肯定的疗效。