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一种结核杆菌融合蛋白及其制备方法和应用
本发明所构建的融合蛋白EAMM能在大肠杆菌中稳定大量表达,经纯化得到纯度较高的蛋白;构建的亚单位疫苗免疫动物能产生针对结核杆菌特定抗原(ESAT-6、Ag85B、Mtb8.4和PPD)的特异性的细胞免疫和体液免疫应答,具有较强的免疫原性。
兰州大学 2021-01-12
一种枯草芽孢杆菌的简易迭代编辑工具及其应用
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种枯草芽孢杆菌的简易迭代编辑工具及其应用。该工具包括两个质粒:pQ‑Cas9n和pC‑TS。pQ‑Cas9n质粒包含Cas9n基因和诱导型启动子,用于表达Cas9n蛋白。pC‑TS质粒包含温敏性复制蛋白,可以实现质粒的温度筛选消除。该工具实现了高效的基因编辑,显著缩短了编辑周期,并支持多基因的快速打靶和编辑,满足了复杂基因组编辑的需求。同时,本发明采用双质粒系统,通过温敏性复制蛋白实现了质粒的温度筛选消除,简化了质粒消除和再引入的步骤,本发明支持多轮迭代编辑,在编辑完成一个基因后,可以快速消除质粒并引入新的质粒进行新的位点编辑,实现了高效的多轮编辑。
南京工业大学 2021-01-12
一株可裂解多重耐药铜绿假单胞菌的噬菌体及其治疗感 染的应用
噬菌体由和 Twort 在 1907 年和 D,Herelle 在 1909 年发现。凡存 在细菌的场所就可能有相应的噬菌体存活。20 世纪初,由于抗生素 的发现及临床应用为治疗细菌感染提供了有效途径,以至于对噬菌体 生物制剂的研究放缓了步伐。但随着多重耐药致病菌威胁的不断加 大,人们需要寻找抗生素以外的疗法治疗感染性问题。因此,噬菌体 疗法又引起人们广泛关注。 噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的
兰州大学 2021-04-14
猪圆环病毒 2 型-副猪嗜血杆菌多联多价灭活疫苗
本成果是将人工合成的表达猪圆环病毒 2 型 Cap 蛋白的核苷酸 序列克隆到杆状病毒表达载体中,构建重组杆状病毒,接种 Sf9 昆虫细胞,经 过悬浮培养、收获、过滤,二乙烯亚胺 BEI 灭活病毒液后,加入适宜的佐剂混 合乳化制成。并利用自主分离鉴定副猪嗜血杆菌病多价流行菌株,通过优化培 养工艺,提高副猪嗜血杆菌培养密度,成功研制了猪圆环病毒 2 型-副猪嗜血杆 菌多联多价灭活疫苗。 
青岛农业大学 2021-04-11
结核杆菌蛋白酶体调控复合体ATPase作用机理
Mpa六聚体除了与真核生物蛋白酶体调节颗粒Rpt1-Rpt6蛋白六聚体以及古细菌PAN蛋白六聚体具有一定的结构同源性之外,还具有一些明显不同的结构特征:(1)结核杆菌Mpa具有形成双环的两个串联寡核苷酸/寡糖结合(OB)结构域,而古细菌蛋白酶体相关ATPase调控颗粒(PAN)和真核生物蛋白酶体ATPase调控颗粒复合体(Rpt1-6)每个蛋白亚基都只具有单个OB结构域;(2)Mpa在具有蛋白酶体活化功能的C末端之前具有一个泛素样的β-grasp结构域,而古细菌PAN和真核生物Rpt1-6蛋白复合体并不具有这样的一个β-grasp结构域 由于β-grasp结构域的存在,Mpa六聚体中各个蛋白亚基C末端被埋在结构核心中而没有暴露在蛋白复合体结构的表面,这就影响了C末端的GQYL基序与20S 蛋白酶体复合体的对接,从而阻碍了六聚化的Mpa与七次对称的28聚体的蛋白酶体相互作用。我们通过功能研究进一步解释了为什么单独的Mpa六聚体在体外情况下不能有效结合蛋白酶体核心颗粒并启动蛋白质特异性降解,结合晶体结构域功能研究,我们提出了结核杆菌蛋白酶体ATPase调控颗粒Mpa与20S蛋白酶体复合体这一分子量超过1100KDa蛋白质机器的作用模型
南方科技大学 2021-04-13
益生优良芽孢杆菌发酵关键技术研究开发与应用
益生优良芽孢杆菌是一类能对热、紫外线、电磁辐射等有强抗性的微生物。其独特优势可用来制成新型、高效、低残留的微生态制剂,广泛应用于工业、农业、医学等研究领域。目前,国内外益生芽孢杆菌产业化关键技术存在诸多问题。如:产品中活菌数低;有效期内活菌含量低造成货架期短;研发与生产脱节,研发单位工程技术应用相对滞后。针对当前问题,本技术攻克了芽孢杆菌发酵集成技术,包括: (1)N+离子诱变结合荧光探针追踪:利用低能离子注入技术对芽孢杆菌进行改良,筛选出性状优良的菌种。通过荧光探针追踪芽孢杆菌培养
南京工业大学 2021-04-14
结核分枝杆菌融合蛋白 EAMMH、其构建、表达和纯化 方法及其应用
本发明成功将 EAMM 蛋白和抗原 HspX 在基因水平进行融合构 建了新的融合蛋白 EAMMH,并将该不带标签的融合蛋白成功进行表 达和纯化。EAMMH 融合蛋白以可溶形式表达,明显改善了 EAMM 以包涵体进行表达的状况。此外,EAMMH 蛋白融合了结核分枝杆菌 主要的生长期抗原和休眠期抗原,并可诱导较强的针对各期抗原的特 异性细胞免疫和体液免疫应答。小鼠结核分枝杆菌气雾攻击模型证 明,该新的融合蛋白疫苗具
兰州大学 2021-04-14
结核分枝杆菌融合蛋白EAMMH、其构建、表达和纯化方法及其应用
本发明成功将EAMM蛋白和抗原HspX在基因水平进行融合构建了新的融合蛋白EAMMH,并将该不带标签的融合蛋白成功进行表达和纯化。EAMMH融合蛋白以可溶形式表达,明显改善了EAMM以包涵体进行表达的状况。此外,EAMMH蛋白融合了结核分枝杆菌主要的生长期抗原和休眠期抗原,并可诱导较强的针对各期抗原的特异性细胞免疫和体液免疫应答。
兰州大学 2021-01-12
益生优良芽孢杆菌发酵关键技术研究开发与应用
益生芽孢杆菌因其独特的优势可用来制成新型、高效、低残留的微生态制剂,广泛应用于工业、农业、医学等科学研究领域。目前,国内外益生芽孢杆菌产业化关键技术存在诸多问题。如:活菌数低、出芽率低、货架期短、生产工艺研究不够深入、产品稳定性差等。 项目组在完成系列国家及省部级项目基础上,经过十几年的研究,攻克了芽孢杆菌发酵集成技术,主要包括:N+诱变结合荧光探针追踪,筛选出性状优良的菌种;多阶段发酵与高密度培养结合,大幅提高菌体密度、芽孢出芽率及菌体适应环境能力;构建图像采集,发明新型反应器,进一步优化菌体生长条件;将反应分离耦合技术应用于发酵,解除发酵过程中产物对菌体生长及体内酶活力的抑制作用,实现高浓度的发酵、提高芽孢出芽率、降低产物分离能耗、简化产物分离过程。 创新优势: 项目组采用专利技术生产研发系列益生芽孢杆菌:蜡样芽孢杆菌活菌数由2亿cfu/g提高到8亿cfu/g,符合市售要求并高于农用微生物菌剂国家标准(GB20287-2006)3倍以上;芽孢形成率达到了89.02%,比国内最高提高33.6%,发酵周期21天,比国内最短时间缩短38.2%;凝结芽孢杆菌活菌数由0.5亿cfu/g提高到12亿cfu/g;地衣芽孢杆菌活菌数由10亿cfu/g提高到13亿cfu/g。筛选出海藻糖、聚乙二醇400、吐温80、谷氨酸钠及甘油5种芽孢保护剂,延长芽孢半衰期45%以上,对菌体活性起到良好的保护效果。在示范区内应用,病害抑制率达89%。项目生产的蜡样芽孢杆菌粉参照标准WS-10001-(HD-0902)-2002,检验为类白色粉末,干燥失重为3.3%,小于7.0%,异常毒性符合规定,霉菌小于10个/克,低于标准规定100个/克,未检出控制菌,活菌数为731亿/克,达到国家规定的质量检测标准。 申请国家发明专利17项,授权14项;发表论文59篇,SCI收录43篇;出版专著5部。
南京工业大学 2021-01-12
一株副蕈状芽孢杆菌及其在硒氧化中的应用
本发明公开了一株副蕈状芽孢杆菌及其在硒氧化中的应用,属于农业微生物技术领域。本发明从华中农业大学硒营养试验田的土壤中筛选分离得到一株副蕈状芽孢杆菌(Bacillus paramycoides)H1,已于2023年6月27保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCCNO:M 20231107。经实验验证发现,该菌株能够同时氧化单质硒和有机硒。本发明利用该菌株可以将有机硒和单质硒转化为利于促进植物吸收的水溶性硒,为制备安全且成本低廉的植物富硒菌剂、硒氧化剂奠定科学基础,这对硒转化模式菌株的科研工作和农业培育具有重要意义。
华中农业大学 2021-01-12
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