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基于聚乙烯亚胺的靶向非病毒纳米基因载体的设计与构建
基因治疗现已成为攻克肿瘤最具希望,也是研究最为活跃的领域。基因导入系统是基因治疗的核心技术。现阶段面临的最大难题在于尚未找到理想的基因载体,治疗基因的导入仍然是肿瘤基因治疗的瓶颈。非病毒载体近年来发展迅速,其中聚乙烯亚胺(polyethylenimine PEI)是近年来研究最为广泛的阳离子多聚物非病毒基因载体。 本项目针对聚乙烯亚胺(PEI)转基因载体使用中存在的转染效率与细胞毒性相矛盾及靶向性差等问题,采用生物可降解技术、金属离子配位技术等连接低分子量聚乙烯亚胺(LMW PEI),得到多分枝状或网状结构的高分子量PEI衍生物,进而选择肿瘤主动靶向多肽RGD、tLype-1等,与细胞穿膜肽TAT(49-57)、核定位信号肽NLS连接,合成具有多功能的数种功能肽RGDC-TAT、RGDC-TAT-NLS、tLype-1-NLS等,利用交联技术将多功能与PEI衍生物偶联,从而构建新型非病毒基因载体系统,旨在保证较高转染效率情况下,降低PEI细胞毒性,增加其对肿瘤的靶向性,克服当前非病毒基因载体的瓶颈问题,为基因治疗探索一条有效途径。 本项目受国家自然科学基金、上海市科委国际学术合作项目及上海市教委科研创新项目资助,发表学术论文数十篇,申请发明专利10项,其中授权7项。
上海海洋大学 2021-05-11
牛传染性鼻气管炎ΔTK/ΔgE基因缺失标志活疫苗
已有样品/n牛传染性鼻气管炎ΔTK/ΔgE基因缺失标志活疫苗。  成果简介:本成果属于动物传染病基因工程技术领域,具体涉及一种牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)ΔTK/ΔgE基因缺失标志活疫苗及制备方法。所述的重组牛传染性鼻气管炎病毒毒株缺失了TK和gE基因。制备的牛传染性鼻气管炎ΔTK/ΔgE基因缺失标志活疫苗毒力大大降低,潜伏的病毒也不易被激活,具有很高的安全性。此外,除了被缺失的TK和gE基因,该缺失毒株仍能表达其他所有毒力基因,具有很好的免疫原性。本成果适用于奶牛、肉牛、耕牛等牛传染性鼻气管炎
华中农业大学 2021-01-12
用种子蛋白质基因工程改良超大穗小麦的品质
本项目是采用种子蛋白质基因工程手段,将富含赖氨酸的豌豆球蛋白基因(Vicilingene)转入超大穗小麦体内并令其表达,以期大幅度提高超大穗小麦的种子蛋白质含量和赖氨酸含量,改良超大穗小麦的营养品质和加工品质,使超大穗小麦尽快成为大面积推广种植的超高产优质小麦良种。其次,本项研究将丰富分子遗传学理论并开辟一条高蛋白品质育种的新途径,所
西安交通大学 2021-01-12
猪WFIKKN2基因作为胴体性状相关的分子标记及应
研发阶段/n可用于猪胴体性状的遗传改良,在猪的遗传改良中胴体性状的测定需要进行屠宰测定,只有背膘厚度性状可在达到目标体重时进行活体测定,利用这3项专利,可以进行胴体性状的改良(不需要进行屠宰测定),降低背膘厚度,降低板油率和内脂率,提高瘦肉率和腿臀肉骨率。
华中农业大学 2021-01-12
伪狂犬病TK-/gE-/gI-基因缺失标志活疫苗
研发阶段/n该发明属于动物病毒学技术领域。利用基因工程方法和DNA重组方法将PrV的主要毒力基因TK和糖蛋白基因gI、gE编码区删除,导致PrV毒力下降,公开了一种三基因缺失的重组伪狂犬病毒(Pseudorabiesvirus,PrV)毒株的构建、用该毒株制备的疫苗、构建该毒株的方法以及制备该疫苗方法说的重组伪狂犬病毒株缺失了TK、gE、gI基因,且不含外源基因。所说的疫苗属于含有该发明的病毒液和明胶制成的冻干活疫苗。发明的重组-突变株遗传稳定,不会返强。该发明还包括将所说的活疫苗接种于仔猪、育肥猪
华中农业大学 2021-01-12
腺病毒载体表达西妥昔单抗基因用于肿瘤免疫治疗
已有样品/n成功将全长的西妥昔单抗基因分别克隆至腺病毒载体AdC68和Hu5,构建重组腺病毒AdC68-CEb和Hu5-CEb,通过WesternBlot4证明成功表达了西妥昔单抗;我们进一步通过夹心ELISA对表达的西妥昔单抗进行了定量,产量分别为639g/L和522g/L;同时,我们通过间接免疫荧光证明了所表达的西妥昔单抗与EGFR结合的特异性;并通过MTT实验证明了AdC68-CEb和Hu5-CEb显著抑制结直肠癌细胞的生长,而对正常细胞没有抑制作用;动物实验显示,用AdC68-CEb和Hu5
中国科学院大学 2021-01-12
转基因骨髓间充质干细胞结合支架修复退变椎间盘技术
已成功构建Ad-GDF-5和Ad-GFP;已成功构建小肠粘膜下层和壳聚糖-聚己酸内酯支架;目前已完成动物椎间盘退变模型的制作,间充质干细胞的提取,分离,培养和鉴定;已制备转基因MSCs,完成转基因MSCs的细胞特性,其和支架之间的相互影响。
四川大学 2016-04-26
地方品种鸡种质特性的分子评估与优质基因的挖掘利用
一、成果简介 拥有鸡基因组细菌人工染色体(BAC)文库,基因组覆盖率10倍以上,100~300kb基因组插入率达到90%以上,文库的嵌合体率为5%~6%,为功能基因的研究提供了重要的资源和平台。对鸡重要经济性状QTL座位的大尺度定位,在10条染色体发现19个QTL座位影响体重性状;在18条染色体上发现52个QTL座位影响不同的屠宰性状和屠体测量性状;在12条染色体发现21个QTL座位影响胫长性状。开展了包括茶花鸡在内的鸡蛋白质组功能基因表达研究,通过
中国农业大学 2021-04-14
揭示植物基因表达在染色质水平调控的新机制
利用模式植物拟南芥为研究对象,通过对染色质结合的RNA的纯化及测序分析(CB-RNA-seq),研究团队的工作显示共转录剪接在目前已检测的物种中是普遍模式。同时,植物的共转录剪接存在几个重要的特征:首先, 共转录剪接的效率与特定内含子到基因3’端的距离正相关,与一些激活型的组蛋白修饰(H3K4me3/H3K9ac)负相关,暗示快速的转录起始及延伸不
南方科技大学 2021-04-14
一种鸭坦布苏病毒基因工程亚单位疫苗
本发明的目的是提供一种鸭坦布苏病毒基因工程亚单位疫苗,即采用生物技术对鸭坦布苏病毒E蛋白进行抗原表位分析、拼接,获得一种鸭坦布苏病毒新型融合蛋白DE,并以该融合蛋白作为抗原来制备鸭坦布苏病毒基因工程亚单位疫苗。本发明中鸭坦布苏病毒新型融合蛋白DE,其编码蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:1;其中一种核苷酸序列为SEQ ID NO:2。本发明利用pET28a(+)表达性载体构建了能表达鸭坦布苏病毒新型融合蛋白DE的大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌。将重组表达的蛋白纯化后制备成基因工程亚单位疫苗,可使免疫后鸭群获得免疫保护。
青岛农业大学 2021-04-13
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