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一种结核杆菌融合蛋白及其制备方法和应用
本发明所构建的融合蛋白 EAMM 能在大肠杆菌中稳定大量表 达，经纯化得到纯度较高的蛋白;构建的亚单位疫苗免疫动物能产生 针对结核杆菌特定抗原(ESAT-6、Ag85B、Mtb8.4 和 PPD)的特异 性的细胞免疫和体液免疫应答，具有较强的免疫原性。EAMM 亚单 位疫苗加强免疫后的结核菌载量明显少于 PBS 组和仅 BCG 免疫组， 表明清除结核分枝杆菌的能力较强。从组织切片 HE 染色
兰州大学
2021-04-14
重组大肠杆菌生产磷脂酶D及转酯化产品开发
磷脂酶D（PLD,EC 3.1.4.4）是一类广泛存在于各种生物体的酶，具有水解作用和磷酰基转移作用（见图1）。作为一种酶制剂，PLD的转磷脂酰活性尤为重要，被用于制备具有生物活性的稀有磷脂。其中，以大豆磷脂酰胆碱（PC）为底物，PLD酶法制备磷脂酰丝氨酸（PS），受到广泛关注。PS作为脑健康营养补充剂，相继被美国FDA、日本HBM和中国国家卫生计生委所认证，列为新资源食品。相较于提取自牛脑和植物的PS，生物酶法制备的PS，避免了食品安全和植物源含量低的问题。进一步，一些新的结构和功能磷脂，通过PLD转磷脂酰反应被合成出来，例如，磷脂酰鲨肝醇、磷脂酰葡萄糖、心磷脂类似物、磷脂酰酪醇、磷脂酰萜烯和磷脂酰丝氨醇，它们中一些具有抗癌和抗氧化活性。
直到现在，受限于磷脂酶D来源不足和价格高（链霉菌属PLD，≥150 units/mg，6516.9¥/1000 U，Sigma公司），其工业上的广泛应用受到限制。例如，文献报道的PLD最高产量在104-105U·L-1，而制备转化得到每公斤PS，需要2.6×106U的PLD。这一障碍的主要原因是高水平表达的PLD对宿主的严重细胞毒性，导致细胞死亡。
历经5年时间，从上游到下游整体设计，我们解决了毒性蛋白（磷脂酶D，PLD）异源表达难的问题（质粒不稳定、蛋白合成时间短、细胞生长抑制和裂解），PLD生产达到目前世界最高水平106U·L-1(748 mg·L-1)（提高20倍）；同时发展一种简单有效提取重组磷脂酶D的方法（无需破碎、无需添加溶菌酶和有机溶剂、室温进行），PLD生产成本有望降低20倍以上。按照实验室规模的一台5 L发酵罐，年产量可以提供3.5×108U的磷脂酶D，满足100 kg的PS转化需求计算（不计算PLD重复利用率），扩大反应器体积至100-1000 L，PLD产量可满足制备2-20吨PS的需求。
厦门大学
2021-01-12
一种结核杆菌融合蛋白及其制备方法和应用
本发明所构建的融合蛋白EAMM能在大肠杆菌中稳定大量表达，经纯化得到纯度较高的蛋白；构建的亚单位疫苗免疫动物能产生针对结核杆菌特定抗原（ESAT-6、Ag85B、Mtb8.4和PPD）的特异性的细胞免疫和体液免疫应答，具有较强的免疫原性。
兰州大学
2021-01-12
一种枯草芽孢杆菌的简易迭代编辑工具及其应用
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种枯草芽孢杆菌的简易迭代编辑工具及其应用。该工具包括两个质粒：pQ‑Cas9n和pC‑TS。pQ‑Cas9n质粒包含Cas9n基因和诱导型启动子，用于表达Cas9n蛋白。pC‑TS质粒包含温敏性复制蛋白，可以实现质粒的温度筛选消除。该工具实现了高效的基因编辑，显著缩短了编辑周期，并支持多基因的快速打靶和编辑，满足了复杂基因组编辑的需求。同时，本发明采用双质粒系统，通过温敏性复制蛋白实现了质粒的温度筛选消除，简化了质粒消除和再引入的步骤，本发明支持多轮迭代编辑，在编辑完成一个基因后，可以快速消除质粒并引入新的质粒进行新的位点编辑，实现了高效的多轮编辑。
南京工业大学
2021-01-12
一种治疗小儿肺炎的中药巴布膏剂和制备方法及其应用
【发 明 人】 程建明；葛婷婷；戴小斌；崔小兵；余黎【技术领域】 本发明涉及一种具有清热止咳作用的中药制剂及其制备方法，尤其涉及一种治疗小儿肺炎，具有发热咳嗽症状的中药巴布膏剂及其制备方法，属于中药制药领域。【摘要】 一种治疗小儿肺炎的中药巴布膏剂和制备方法及其应用，该巴布膏剂包括药物提取物及水溶性基质两组分按一定配比制成，其中药物提取物由麻黄、杏仁、仙鹤草、鱼 腥草、荆芥、丹参、桃仁、石膏、甘草九种中药按一定重量分配比制成，水溶性基质由卡波姆、聚丙烯酸钠、甘油、梭甲基纤维素钠、聚维酮K30、明胶、氮酮、丙二醇、 尼泊金乙酯及水按一定配比制成，然后将药物浸膏及基质按一定比例混合均匀制成巴布膏剂，涂于无纺布上，冷却后切割制成。具有载药量大，对皮肤相容性好;基质材料性 能稳定、不与主药发生反应，无毒副作用;粘性、弹性适中，可反复揭帖;经药效学试验结果表明，对小儿肺炎引起的发热咳嗽具有显著的清热解毒、止咳化痰作用。
南京中医药大学
2021-04-13
一种治疗小儿肺炎的中药巴布膏剂和制备方法及其应用
【发 明 人】王明明【摘要】本发明提供一种用于治疗儿童期单纯肥胖症的中药组合物及中药免煎颗粒剂，涉及中药领域。所述中药组合物，由下述重量配比的中药原料制成：苍术颗粒8-12重量份、焦山楂颗粒8-12重量份。本发明中药组合物灌胃治疗后，大鼠肥胖模型的体重、体长、李氏指数、脂肪湿重、脂肪系数、血糖、甘油三酯、胆固醇、瘦素、胰岛素均下降，高密度脂蛋白上升，说明本发明组合物能够治疗儿童期单纯肥胖症。
南京中医药大学
2021-04-13
金松双黄酮在制备防治糖尿病药物中的应用
【发 明 人】陈建伟；李祥；薛平；汤彬；姚晓【技术领域】本发明涉及一种金松双黄酮，具体涉及金松双黄酮在制备防治糖尿病药物中的应用。【摘要】本发明公开了金松双黄酮在制备防治糖尿病药物中的应用。经实验研究表明，金松双黄酮具有很好的治疗糖尿病的作用，对糖尿病及其糖尿病合并心脏病和糖尿病合并高脂血症等相关性疾病均具有非常好的治疗效果，且实验过程中，未表现出副作用等不良反应，有望开发成为新一代安全有效，用于防治糖尿病及其并发症的药物。
南京中医药大学
2021-04-13
口蹄疫与伪狂犬病二价基因工程疫苗
研发阶段/n口蹄疫（FMD）是引起的人及偶蹄动物共患的一种烈急性、高度接触性、发热性传染病。FMD在世界上许多国家流行，造成重大的经济损失和政治影响。口蹄疫病毒（FMDV）属于小RNA病毒科（Picornaviridae），口蹄疫病毒属（Aphthovirus），该病毒为单股正链小RNA病毒，基因组长约8500个核苷酸，主要由结构基因（P1区）和非结构基因（P2、P3区）等构成。该发明具体涉及一种新的含有口蹄疫病毒主要免疫原性基因的重组伪狂犬病弱毒疫苗株，该毒株属于猪伪狂犬病毒：Pseudorabi
华中农业大学
2021-01-12
雄黄微生物转化液（抗白血病、抗肿瘤）
雄黄本身是一种水不溶性硫化砷矿，具有剂型单一、生物利用率低、临床用量大等缺点。基于此，我们以甘肃优质道地矿物药雄黄为主要原料，成功的借助特定微生物的生物化学催化作用，建立起一套成熟的针对雄黄的微生物转化技术，将雄黄中的砷溶解出来，得到一种新型砷剂。通过药理药效实验证实，该新型砷剂可以有效的通过阻滞细胞周期，在体内外诱导小鼠腹水瘤S180和肝癌细胞H22发生凋亡。同时，对荷瘤小鼠的毒副作用较小，对肿瘤组织具有很强的选择性。尤其对多种（多药耐药）白血病有良好的体外抑制作用。目前实验证实，与雄黄相比
兰州大学
2021-04-14
华西青年同志感染艾滋病风险评估量表
我国艾滋病流行状况日趋严重，男性同性间的传播上升速度十分迅速，尤其青少年学生面临着更大的风险。2009年我国男男性行为导致的艾滋传播已占到传播总数的32.5％，在一些地区，其艾滋病感染率超过10%。 降低男性同性恋人群艾滋病感染率，必须“关口前移”，需要识别出具有男性性倾向的个体，需要具有男性性倾向青年中筛查出具有感染艾滋病风险的个体和人群，针对性地开展干预。
四川大学
2016-05-03