本发明公开了一种产角蛋白酶的粘金黄杆菌及其分离方法。所述粘金黄杆菌拉丁名为Chryseobac？terium？L99，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC？No.2295。本发明公开了该菌的形态学特征为：菌体杆状，不产孢子，无运动性，革兰氏染色呈阴性。本发明公开了该菌的全细胞脂肪酸主要成份为：十三甲基十四酸47.59％，二羟基-13-甲基十四酸和(或)Ω-7-顺式-13甲基-十五酸15.72％，三羟基-15-甲基十六酸13.91％，Ω-9-顺式-14甲基棕榈酸9.48％。本发明还公开了该菌的16S核糖体DNA(16S？rDNA)全序列。本发明公开的分离方法包括三个步骤：普通营养培养基富集培养，以角蛋白为唯一碳氮源固体培养基初筛，以角蛋白为唯一碳氮源液体培养基的复筛。该方法快捷有效，所得菌种产酶能力强。

该成果提供了用于降解多环芳烃类有机污染物的微生物菌剂，其活性成分为鞘氨醇杆菌菌株，该菌株从石油污染土壤中分离获得，能够快速降解多环芳烃类污染物，尤其是菲、芴、荧蒽、芘和苯并芘等有机污染物。该菌株还具有广泛的pH值（5-9）、盐度和温度（16-37℃）适应能力，是对土壤或环境多环芳烃类有机污染物进行生物修复的优秀微生物材料。 土壤的微生物修复技术已经在石油污染治理、土壤有机农药去除、重金属污染治理以及氮磷营养调节等环境修复过程中得到广泛运用。1972年美国利用生物修复技术清除宾西法利亚州的石油管线泄漏石油是第一次成功运用生物技术进行土壤有机污染物修复，我国也在开始采用微生物修复技术进行石油污染区域的生物修复实践。该技术应用后土地基本恢复耕地功能，修复速度快，使用简单方便且效果理想，预计该技术投放市场可产生巨大的经济效益和社会效益。 转化条件：微生物菌剂生产无需大面积厂房，有发酵罐和灌装车间即可投入生产。 成果完成时间：2017年6月

本发明提供了一株诱变凝结芽孢杆菌及其在生产川芎嗪中的应用，属于生物技术领域。本发明所述诱变凝结芽孢杆菌YB‑2023，分类命名为凝结海恩德里克斯氏菌（Heyndrickxia coagulans），菌株编号为YB‑2023；于2024年3月7日保存于中国典型培养物保藏中心，地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号，菌种保藏号为CCTCC NO:M 2024411；诱变凝结芽孢杆菌YB‑2023的乙偶姻产量可达12.61±0.34 g/L，川芎嗪浓度可达到2.54±0.26 g/L，原始菌株经诱变后，在正常培养条件下以葡萄糖和酵母膏为原料，保留益生菌凝结芽孢杆菌数量的同时提高川芎嗪产量，降低成本，利用可再生生物质生产天然川芎嗪的绿色生产过程具有意义。

本专利菌株为一株鼠李糖乳杆菌，被国家卫生和计划生育委员会列入可用于 食品的菌种名单，可广泛的应用于食品生产中，同时具有很广阔的药用前景。该 菌株具有 α-葡萄糖苷酶抑制活性，可影响葡萄糖转运相关蛋白 SGLT-1 和 GLUT- 2 的表达水平，可有效的预防模型小鼠 II 型糖尿病的发生，有效降低小鼠空腹 血糖和餐后血糖。糖尿病及代谢综合征的发病率在现代社会居高不下，α-葡萄 糖苷酶抑制剂广泛的被应用于糖尿病的治疗，利用具有 α-葡萄糖苷酶抑制活性 的乳酸菌预防及缓解糖尿病尚属首次，鼠李糖乳杆菌在食品中已经得到了广泛的 应用，该菌可被用于大宗食品及功能性食品的生产，开发具有预防及缓解 II 型 糖尿病的膳食补充剂，如乳酸菌饮料、发酵酸乳、发酵酸豆乳以及片剂、胶囊、 冻干粉等药物组合物，具有非常广阔的产业化前景，对于慢性疾病的预防和治疗，29 推动国民健康具有重大的意义，同时也具有巨大的潜在经济效益。

本发明提供了具有抗 EB 病毒和抗 KSHV 活性的化合物及其来源，以及分离纯化方法和应用，具体是从金丝桃属植物地耳草中分离纯化得到化合物 1-18，其中从湖北省蕲春县大别山地区 10 月份采集的地耳草中分离纯化出化合物 1-10，从江西省庐山市庐山地区 8 月份采集的地耳草中分离纯化出化合物 11-18。通过这 18 个化合物对两种致瘤疱疹病毒进行抗病毒活性研究，发现化合物 1、3、4、7 和 8 对 EB病毒的 DNA 复制有抑制活性；化合物 3、6 和 13-17 对卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(K

本发明公开了一种地衣芽孢杆菌分泌的抗菌肽及其制备方法和应用。所述的抗菌肽氨基酸序列为序列表SEQIDNO.1所示，分子量为1290.4道尔顿，等电点5.23。其制备方法是：硫酸铵沉淀培养基中地衣芽孢杆菌分泌的的抗菌肽，利用阴离子交换、分子筛层析和反向高效液相色谱法纯化抗菌肽。该抗菌肽具有显著的抗菌活性，且不会对猪的红细胞产生溶血作用，可用于开发制备饲用抗菌药物。

噬菌体是专门感染细菌的病毒，对宿主具有严格的特异性，大 肠杆菌的噬菌体只感染大肠杆菌。噬菌体通过对细菌的感染，并在其中进行自 身的大量繁殖，最终通过杀死宿主菌得到噬菌体的释放及再感染。大肠杆菌噬 菌体对细菌的杀伤不受细菌耐药性的限制，在宿主菌大量存在的条件下，噬菌 体的数量还可以快速增多，因此该噬菌体制剂对人畜及环境安全，是目前国际 公认的抗生素替代品及绿色环境消毒剂。由大肠杆菌噬菌体专利毒株与特定的 大肠杆菌菌株混合发酵制备成液体噬菌体制剂，制备技术先进、成本低、产品 安全、质量稳定，对鸡场环境消毒及鸡大肠杆菌病防治效果显著。 噬菌体制剂中的活噬菌体含量为 1×l08PFU/ml〜1×l09PFU/mL，4°C 保存。 大肠杆菌噬菌体制剂已在蛋鸡及肉鸡养殖场进行过环境喷雾消毒、饮水添 加等试验，喷雾消毒可明显降低环境中细菌总数及大肠杆菌数量，饮水添加可青岛农业大学科技成果介绍 2017 －31－ 明显降低鸡肠道中大肠杆菌的数量，对鸡大肠杆菌病引起的下痢具有明显的止 泻效果。 该成果提供了一种噬菌体制剂及其制备技术，主要针对鸡大肠杆菌病的防 治。通过对致病性大肠杆菌具有广泛感染及杀菌作用的噬菌体进行环境消毒或 饮水、饲喂等方式，可减少环境及鸡体内致病性大肠杆菌的数量，降低鸡群感 染大肠杆菌病的风险。该噬菌体制剂用大肠杆菌作为宿主菌进行液体培养，制 备成液体无菌制剂，产品主要用于防治鸡大肠杆菌病。技术使用单位主要是肉 鸡养殖场、蛋鸡养殖场和生物制品厂。企业投资主要用于购置规模化微生物发 酵生产的设备，以及配套生产车间改建、原材料和人工等支出。如年产量 2000 吨，预计设备投入约 100 万元。 

已有样品/n表达副猪嗜血杆菌表面抗原的猪霍乱沙门氏菌减毒疫苗。　　成果简介：利用仔猪副伤寒商品疫苗菌株猪霍乱沙门氏菌C500作为宿主菌株，插入已经蛋白质组学方法筛选鉴定的副猪嗜血杆菌重要免疫原性基因，从而获得副猪嗜血杆菌-猪霍乱沙门氏菌二联基因工程疫苗菌株，重组疫苗菌株能够诱导机体产生良好的体液免疫、细胞免疫以及粘膜免疫，对小鼠的免疫与攻毒试验结果证实二联重组疫苗具有同时抵抗副猪嗜血杆菌病和沙门氏菌病的能力，具有良好的应用前景。　　应用前景：副猪嗜血杆菌-猪霍乱沙门氏菌二联基因工程口服疫苗菌株对小鼠

研发有效的内毒素 LPS 脱毒方法具有重要意义，本项目一方面通过 KDO 定量方法检测对 LPS 分子的吸附能力，从发酵食品中筛选到 LPS 吸附能力最强酵母菌株 CSW。证实 LPS 与 Y. lipolytica 细胞共存一段时间后，会产生 LPS 含量降低的现象。通过 18s r DNA 分析，菌株 CSW1 与 1.0 mg/m L 来源于 E. coil O111:B4的 LPS 共存后，可使 LPS 水平降低约 70%，而 S. cerevisiae BY4742 仅使 LPS含量近 30%。 另外一方面，过敲除大肠杆菌 E. coli 染色体基因上与 LPS 合成相关基因，构建了多株能够直接合成新型特殊结构 Kdo2-lipid A 的突变菌株，具有低内毒素，适合用于大肠杆菌表达宿主生产各种蛋白及氨基酸。 关键技术 脂多糖 LPS 是存在于大多数革兰氏阴性菌外膜的主要组成部分，可通过激活宿主细胞内 TLR4 受体信号转导途径等，促进炎性细胞分泌多种细胞因子，进而引发强烈的免疫反应，造成疾病或者死亡，在食品和药品中是重要的毒力因子，因此研发有效的 LPS 脱毒方法具有重要意义。本成果获得了食品级的 LPS 脱毒菌株，具有应用前景。工业发酵中大肠杆菌野生型菌株中内毒素释放，是导致热原污染的重要原因，这增加了分离纯化成本，本成果从源头改造获得低毒性的大肠杆菌平台菌株，避免了发酵工程中热原产生。

盐碱、干旱、高温、冻害和洪涝等逆境胁迫严重影响作物的正常生长发育，是造成农作物减产和品质下降的主要原因之一，严重影响农业的可持续发展。另一方面，对于粮食作物和多数经济作物来说，其功能叶片中的同化产物和衰老叶片中的营养物质不断向产量器官的转运，对作物产量和品质性状的形成具有重要的作用，作物的过早衰老不仅直接影响粮食作物的产量和品质等要素，对于绿叶类作物和观赏花卉还会影响到其货架寿命以及观赏价值等。 克隆叶片衰老和逆境抗性相关基因，并利用生物工程技术调控其在主要经济作物中的表达方式和表达水平，是提高和稳定作物产量、改善作物品质性状的有效手段，具有重大的经济效益和社会效益。然而，很多衰老或逆境抗性相关基因在植物细胞中高表达后，在增强转基因植株对特定胁迫的抗性、延缓植株衰老的同时，往往伴随着对植株正常生长和发育的不利影响，如导致植株矮小、生长迟缓或产量下降等，导致该基因无法直接应用于抗逆作物的培育。如果可以特异性地表达这些基因，让它们在特定的发育阶段或胁迫条件下高表达，而在正常的生长过程中维持在较低的基础水平，可以大大提高它们在基因工程中的应用性。 课题组前期克隆了一个植物叶片衰老的负调控因子。在转基因植物中过表达该基因可以显著延缓植物的衰老，并赋予植物对高盐、干旱等胁迫的抗性，但是，转基因植物的生长发育受到明显抑制，导致该基因无法被直接应用于抗逆作物的育种工作。课题组前期还分离鉴定了一段含有 14 个氨基酸的多肽序列，命名为 WX01。我们对 WX01的功能研究发现其包含独特的蛋白降解信号，能够响应发育与环境信号，在转录后水平调控与它融合的目的蛋白的稳定性，从而使目的蛋白在光下正常旺盛生长的植株中降解、但在启动衰老或者高盐、高温和失水等多种逆境胁迫条件下特异积累。我们利用 WX01 与前述衰老负调节因子构建了融合基因 WX02，并转入模式植物拟南芥中，发现该融合基因可以恢复衰老负调节因子积累造成的植株矮小、生长抑制的表型，但是保留了其延缓衰老、促进光合和提高转基因植物对高盐、干旱等逆境胁迫的抗性的功能。课题组进一步将 WX02 融合基因转入经济作物大豆中进行功能验证，获得了可稳定遗传的多个株系单拷贝纯合转基因大豆材料。对转基因大豆的表型分析同样证明，WX02 转基因大豆对高盐、干旱胁迫的抗性显著提高。上述研究结果表明 WX02 融合基因在抗逆转基因作物新品种培育中具有重要的应用价值。围绕该项目已经申请了 2 项国家发明专利，1 项国际 PCT 专利，其中 1 项国家发明专利已经获得授权。