已有样品/n猪传染性胸膜肺炎防控关键技术研究与应用。　　成果简介：华中农业大学和武汉科前动物生物制品有限责任公司完成的“猪传染性胸膜肺炎防控关键技术研究与应用”成果，该成果确定了猪传染性胸膜肺炎在我国的爆发流行及流行的主要血清型，研制了猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗和传染性胸膜肺炎放线杆菌ApxIV-ELISA抗体检测试剂盒，在国际上率先解析了猪传染性胸膜肺炎放线杆菌13个血清型菌株的全基因组序列和基因组生物学特征，鉴定了一批新的毒力相关基因，建立了基于多重耐药性菌株和靶标酶的两种抗菌化合物高通量筛选

研发阶段/n可用于猪胴体性状的遗传改良，在猪的遗传改良中胴体性状的测定需要进行屠宰测定，只有背膘厚度性状可在达到目标体重时进行活体测定，利用这3项专利，可以进行胴体性状的改良（不需要进行屠宰测定），降低背膘厚度，降低板油率和内脂率，提高瘦肉率和腿臀肉骨率。

中试阶段/n该成果公开了一种GLI2基因作为猪初生重性状相关分子标记及制备方法和应用，其步骤：A、用猪序列为模板设计引物，提取猪基因组DNA。1）将猪的肌肉组织在液氮中磨碎；2）将消化后的组织样加入等体积的Tris饱和酚，冷冻；3）加等体积的苯酚/氯仿/异戊醇，转移另离心管中；4）加入等体积的氯仿/异戊醇，冷冻，离心；5）将上清液吸入标记好的离心管中，加入无水乙醇；6）用枪头将DNA沉淀挑出，加入纯水溶解DNA；7）在DNA浓度测定仪上测定其浓度，紫外灯下检测提取的DNA质量；B、设计引物，获得所示

已有样品/n猪肺炎支原体间接ELISA抗体检测试剂盒及应用。　　成果简介：本发明用原核表达纯化的猪肺炎支原体主要免疫原性膜蛋白P46和P65作为包被抗原，建立ELISA方法，并进一步组装成试剂盒。具有特异性强，灵敏度高，检测时间短的特点，能够及时、快速、大规模的监测临床上的猪肺炎支原体抗体，确定猪群感染动态，采取时效性强的药物预防或免疫预防或管理措施。　　应用前景：本发明的试剂盒能直接对猪肺炎支原体进行检测，具有特异性强，灵敏度高，检测时间短的特点；操作简单易行，不需由专业人员操作；其稳定性好、保存

本实用新型涉及一种采用静电层层自组装技术修饰的生物工程猪角膜。目的是提供的生物工程角膜具有促进角膜移植后角膜缘干细胞、角膜上皮细胞迁移，提高植片的存活率，加速植片与宿主角膜的融合，加速眼表重建，促进视功能恢复的特点。技术方案是：一种采用静电层层自组装技术修饰的生物工程猪角膜，其特征在于：该生物工程猪角膜的表面由内而外依次反复沉积有聚阳离子层、透明质酸层及细胞趋化因子层，最外层为细胞趋化因子层。所述聚阳离子层厚度为0.5‑5nm，透明质酸层厚度为0.5‑10nm，细胞趋化因子层厚度为1‑10nm。所述聚阳离子为壳聚糖或聚赖氨酸。

已有样品/n表达副猪嗜血杆菌表面抗原的猪霍乱沙门氏菌减毒疫苗。　　成果简介：利用仔猪副伤寒商品疫苗菌株猪霍乱沙门氏菌C500作为宿主菌株，插入已经蛋白质组学方法筛选鉴定的副猪嗜血杆菌重要免疫原性基因，从而获得副猪嗜血杆菌-猪霍乱沙门氏菌二联基因工程疫苗菌株，重组疫苗菌株能够诱导机体产生良好的体液免疫、细胞免疫以及粘膜免疫，对小鼠的免疫与攻毒试验结果证实二联重组疫苗具有同时抵抗副猪嗜血杆菌病和沙门氏菌病的能力，具有良好的应用前景。　　应用前景：副猪嗜血杆菌-猪霍乱沙门氏菌二联基因工程口服疫苗菌株对小鼠

研发阶段/n可用于猪肉质性状的遗传改良，在猪的遗传改良中肉质性状的测定需要进行屠宰测定，肌内脂肪含量和系水力是两个重要的肉质性状，影响到肌内的口感惬意度和屠宰后胴体出售前贮藏损失，应用到商家的经济利益，这两项专利的使用可以提高肌内脂肪含量，降低屠宰后滴水损失（不需要进行屠宰测定）。

本发明提供了一种新型猪源抗菌肽突变体及其制备方法和应用。本发明通过生物软件对猪源抗菌肽PMAP37的氨基酸序列进行空间结构分析，将其37个氨基酸中的3处氨基酸进行突变（L6K、K20L和L31K），获得一种新型猪源抗菌肽突变体，使其抗菌效力获得显著提高。在此基础上，选用毕赤酵母偏爱密码子，人工合成新型猪源抗菌肽突变体基因，克隆于毕赤酵母中表达，获得新型抗菌肽重组酵母菌株，并将发酵规模放大到发酵罐水平，实现抗菌肽产品的高密度发酵和高效表达。发酵液进一步纯化后可制成粉剂、液体等抗菌肽制剂用于畜禽疾病的预防和治疗。

成果描述：项目针对猪鸡病原菌耐药性导致细菌病难防控、用药量大、产品药残的关键技术难题，取得了重大理论和方法创新成果。 项目揭示了我国近12年猪鸡病原细菌耐药性变化规律，建立菌种库和耐药数据库，创立了5种细菌耐药基因分子检测新方法；改进了7种动物专用抗生素及其制剂的生产工艺和质量；创制了非生素免疫增强剂4种。获国家2类新兽证书6个，3类2个。获国家发明专利12项，实用新型专利1项。主编参编专著6部，发表论文123篇，包括本专业权威SCI论文AAC(IF:4.672)，JAC(IF:4.659)等35篇。成果应用使猪鸡抗生素用量减少30%-70%，细菌病降低50%，节省用药成本30%，为有效控制猪鸡细菌感染及耐药，减少抗生素使用，保障公共卫生和食品安全提供了新的理论和技术。市场前景分析：应用领域：本项目的应用领域主要为兽药、疫苗生产企业以及大中型猪鸡养殖生产企业。可共同企业合作开发新型兽药、生物制品等，同时也可为大中型猪鸡养殖生产企业提供技术支撑，有效降低抗生素的使用，保障产品安全，打造高品质放心品牌。市场需求：猪鸡细菌性疾病严重危害公共卫生和食品安全，如猪链球菌、猪鸡沙门氏菌引起人感染发病的公共卫生事件。在规模化养殖条件下，细菌性疾病呈多发趋势如大肠杆菌等，畜禽因细菌性疾病致死或生产性能下降等造成全国年直接经济损失400亿元（畜牧业年鉴2010）。病原细菌产生耐药性是致细菌疾病难控治、用药量大（每年畜禽抗生素原料药用量多达10万吨）、产品药残高的关键技术难题，如近年来出现耐多种抗生素的结核杆菌、金黄葡萄球菌、大肠杆菌等“超级耐药菌”，引起了极大关注。本项目通过产学研结合12年联合攻关，创立了细菌耐药基因的分子检测新方法，揭示了细菌耐药性变化规律，创新了耐药性控制理论和应用技术，并在安全高效新兽药研发中得到广泛应用（图1），可为保障我国猪鸡养殖健康、公共卫生和产品安全提供了有力的科技支撑，其市场需求极大。与同类成果相比的优势分析：“该项目已在国内多个省市规模化猪场，鸡场、示范区、饲料厂、兽药厂等进行了推广应用，成果应用效益显著。研究成果丰富了病原菌耐药基因的基础理论研究，为病原菌的耐药性分子检测和监测提供了新的技术手段，项目选题技术路线合理，研究手段先进，数据可靠，结果可信，具有先进性、创新性和实用性的特点。其成果总体水平居国内领先、国际先进，部分成果处于国际领先水平”。

二级肥膘经采用本技术加工，可全部转化为猪油和胶原蛋白，其中猪油的得 率可高达 60%，胶原蛋白的得率可高达 20%。投资 800 万元建设一套年处理 3000 吨二级肥膘的装置，可年产猪油 1800 吨，胶原蛋白 600 吨，按猪油 16 元/kg，胶原蛋白 60 元/kg 计，年产值可达 6000 万元以上，利润在 1500 万元以上。