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新型冠状病毒创新检测系统
近日,华南师范大学生命科学学院束文圣教授与合作单位广东美格基因团队组织研发骨干力量,在7天内快速研发了针对新型冠状病毒高通量测序的优化技术方案,研制“新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测试剂盒(基于Q-PCR法)”成功。结合团队前期系列技术与产品储备,束文圣教授及其团队美格基因建立了新型冠状病毒创新检测系统,这个新型冠状病毒的整体解决方案,基于快速检测试剂、检测配套的设备、仪器和物联网的荧光定量检测病毒。“拿着这套设备,加上试剂盒,这套系统可以在任何地方随时自行排查,普通人都可以操作。”束文圣表示,该系统简单易用,既是小型化又是便携式,只需人工加入样品,就可以一键式全程自动化检测,并且马上判别是否感染。“以华师为例,可以在宿舍楼、饭堂或者校医院,学生现场通过咽拭子等形式进行采样检测,仅需40分钟即可完成检测,检测一次成本只需几十块钱。”束文圣介绍,该系统可投放到各类需求量大的公共场所,将检测服务覆盖到社区、村落,解决检测系统下基层困难问题。据悉,优化技术方案显著增加了测序结果中病毒序列的占比,甚至可达到50%以上,理想情况下可得到超过90%完整度的基因组,相同样本的基因组覆盖度也得到了极大提升。该项技术,不仅有助于疑似病例的筛查,而且对新冠病毒的溯源、变异和进化等研究具有重要价值。
华南师范大学 2021-04-10
抗阿尔茨海默症抗体药物与诊断试剂
Abeta 寡聚体是引起阿尔茨海默症(Alzheimer’s diseases, AD,又称老年痴呆症)早期认知功能障碍和病理改变的重要因素。本项目为研制识别 Abeta 寡聚体的构象特异性单克隆抗体,目的是获得具有我国自主知识产权的特异性识别不同来源的(包括体外合成、培养细胞分泌和脑组织来源)Abeta 寡聚体,对寡聚体的亲和力为单体的 100 倍以上。目前,我们已经得到几株分别针对 Abeta 低分子量、高分子量寡聚体和原纤维的单克隆抗体,进一步的实验正在进行。 本项目的技术创新点为:可识别 Abeta 寡聚体多个构象性表位。 与同类技术产品或成果比较:目前国内外商品化或处于实验室研发阶段的淀粉样Abeta 肽单克隆抗体已经有一些报道,但是大部分针对线性表位,不能够优先识别寡聚体。某些实验室有构象特异性的单克隆抗体,但是还没有明确的早期诊断和治疗效果。比如,国内外开展 AD 研究常用的单克隆抗体 6E10 和 4D8 等,都是针对线性表位,不能够满足特异性识别 Abeta 寡聚体和构象特异的蛋白形式。 Abeta 单克隆抗体 NU 系列、NAB61、A11 以及 OC 等是国外报道的同类产品,能够分别特异性分辨不同分子量范围的寡聚体、原纤维以及纤维等成分,部分抗体已经应 用到细胞实验和动物实验,初步证明有良好的抵抗氧化应激和改善 AD 转基因动物学习记忆行为障碍的作用。我们获得的单克隆细胞株具有与国外产品相似的生物学活性,可为企业提供大量的不同特异性的单克隆抗体,用于实验室和临床研究。
北京交通大学 2021-02-01
抗阿尔茨海默症抗体药物与诊断试剂
Abeta寡聚体是引起阿尔茨海默症(Alzheimer’s diseases, AD,又称老年痴呆症)早期认知功能障碍和病理改变的重要因素。本项目为研制识别Abeta寡聚体的构象特异性单克隆抗体,目的是获得具有我国自主知识产权的特异性识别不同来源的(包括体外合成、培养细胞分泌和脑组织来源)Abeta寡聚体,对寡聚体的亲和力为单体的100倍以上。目前,我们已经得到几株分别针对Abeta低分子量、高分子量寡聚体和原纤维的单克隆抗体,进一步的实验正在进行。 本项目的技术创新点为:可识别Abeta寡聚体多个构象性表位。 与同类技术产品或成果比较:目前国内外商品化或处于实验室研发阶段的淀粉样Abeta肽单克隆抗体已经有一些报道,但是大部分针对线性表位,不能够优先识别寡聚体。某些实验室有构象特异性的单克隆抗体,但是还没有明确的早期诊断和治疗效果。比如,国内外开展AD研究常用的单克隆抗体6E10和4D8等,都是针对线性表位,不能够满足特异性识别Abeta寡聚体和构象特异的蛋白形式。 Abeta单克隆抗体NU系列、NAB61、A11以及OC等是国外报道的同类产品,能够分别特异性分辨不同分子量范围的寡聚体、原纤维以及纤维等成分,部分抗体已经应用到细胞实验和动物实验,初步证明有良好的抵抗氧化应激和改善AD转基因动物学习记忆行为障碍的作用。我们获得的单克隆细胞株具有与国外产品相似的生物学活性,可为企业提供大量的不同特异性的单克隆抗体,用于实验室和临床研究。 应用范围: 主要应用于阿尔茨海默症的基础研究、临床诊断与早期防治。目前国际上还没有客观的AD实验室诊断指标和疗效确切的AD单克隆抗体药物。除满足AD发病机制的基础研究外,在本项目的基础上,可以形成AD诊断试剂、普查与筛查试剂盒、抗阿尔茨海默症基因工程药物以及疗效检测手段。我国已进入老龄化社会,据有关部门估算,到2050年,用于AD病人的费用将超过100亿元人民币。本项目的开发与应用,将会为我国有效预防和控制老年痴呆症,提供技术基础,带来很大的市场潜力和经济效益。
北京交通大学 2021-04-13
脑-脾神经环路控制抗体免疫应答的新机制
2020年4月29日,《自然》杂志在线发表了清华大学医学院、免疫学研究所祁海课题组、上海科技大学胡霁课题组、清华大学麦戈文脑科学研究所钟毅课题组的合作论文,题目是“受行为影响的脑活动调控体液免疫应答”(Brain control of humoral immune responses amenable to behavioural modulation)。通过小鼠模型,该研究发现了一条从大脑杏仁核和室旁核CRH神经元到脾内的神经通路——这条通路促进疫苗接种引起的抗体免疫应答,并可通过响应躯体行为刺激对免疫应答进行不同调控。据作者介绍,这是迄今发现的第一条解剖学明确、由神经信号传递而非内分泌激素介导的、中枢神经对适应性免疫应答进行调控的通路,它的发现为神经免疫学研究拓展出了一个新方向。 “勤動”与增强免疫的中枢神经核团与环路 首先,研究者开发了一种新型去除小鼠脾神经的手术,发现这种小鼠在疫苗接种后所能产生的浆细胞(抗体分泌细胞)数量有明显缺陷,暗示了脾神经冲动信号对B细胞应答有促进作用。通过药理学、遗传学实验,他们继而发现B细胞表达乙酰胆碱9受体对脾神经的这个促进作用不可或缺。通过体内细胞剔除实验,研究者发现在肾上腺素能的脾神经和需要感知乙酰胆碱的B细胞之间,最可能起到了“换元”作用的,是新近发现的可感受去甲肾上腺素而分泌乙酰胆碱的T细胞。 进一步,作者通过伪狂犬病毒逆行追踪,发现脾神经与室旁核(PVN)、中央杏仁核(CeA)有连接。这两个区域的功能与应激、恐惧反应紧密相关,而两处共有的一类神经元是表达CRH(促肾上腺皮质激素释放激素)的神经元。CRH神经元是掌控垂体-肾上腺轴的上游神经元,其激活可导致肾上腺大量释放糖皮质激素,调整机体应激,抑制免疫系统活动。这个已知抑制免疫的内分泌功能,不能解释作者看到的免疫增强的现象。但会不会CRH神经元还可以直接操控脾神经,通过神经通路传导免疫增强的信号来促进浆细胞的产生呢? 为检验这一假说,研究者通过光遗传学实验,发现刺激CeA/PVN的CRH神经元后几秒钟之内就会记录到脾神经的电信号明显加强,证明CeA/PVN与脾间的确有通路连接(图1)。进而,作者通过CRH神经元剔除、DREADD化学遗传学抑制及激活的方法,证明 CeA/PVN CRH神经元活性对应调控了脾内B细胞应答产生浆细胞的过程。 图1 光遗传学实验证明CeA/PVN CRH 神经元与脾神经的连接 自主神经活动可以受外界环境及行为的影响。那么,有没有行为可以刺激这条脑-脾神经轴从而增强免疫应答呢?作者通过监测小鼠在不同行为范式下 CeA/PVN 的 CRH 神经元活动发现,一个他们新开发的“孤立高台站立”(elevated platform standing,如图2和视频)行为可以同时激活这两个核团的CRH神经元。 自主神经活动可以受外界环境及行为的影响。那么,有没有行为可以刺激这条脑-脾神经轴从而增强免疫应答呢?作者通过监测小鼠在不同行为范式下 CeA/PVN 的 CRH 神经元活动发现,一个他们新开发的“孤立高台站立”(elevated platform standing,如图2)行为可以同时激活这两个核团的CRH神经元。 图2 孤立高台站立模式图 更重要的是,抗原接种后第二周里,每天经历这个行为范式两次,小鼠抗原特异的抗体就可以增加约70%。这种行为增强抗体应答的效果,依赖于CRH神经元、依赖于脾神经、并且需要B细胞表达的乙酰胆碱受体。虽然高台站立可以看作是一种应激范式,但并非所有导致应激状态的行为都能增强免疫。作者测试了神经生物学研究中常用的捆绑模型,发现这一范式更强烈而持久激活PVN的CRH神经元,但抑制 CeA 的 CRH 神经元,致使机体持续产生高水平的糖皮质激素,对免疫应答产生了抑制作用。 至此,研究者在这项研究里鉴定、证明了一条对适应性免疫具有增强功能的脑-脾神经轴,揭示了CRH神经元的双重免疫调节功能——经典已知的垂体-肾上腺神经内分泌免疫抑制作用和新发现的经神经环路直接作用于脾的免疫增强作用。 神经免疫学方兴未艾,目前的主要方向包括:以CNS和外周神经为靶器官,研究组织固有的小胶质细胞和招募而至的免疫细胞在系统稳态与病变中的作用;研究中枢及外周神经与淋巴器官和屏障组织(肠上皮等)里固有免疫细胞(巨噬细胞、ILC等)的信号交互与功能互调等。刚刚发表的这一新工作,使研究者认识到淋巴细胞介导的适应性免疫应答也可以受到中枢-外周神经环路的直接调控,以及通过躯体行为正向调节免疫应答的一个生物学基础。 针对最后一点,祁海特别指出,锻炼身体(躯体运动)可以增强“免疫力”,这个几乎所有人或多或少都接受的常识性结论,其背后的科学依据其实远不清楚。他认为,他们发现的脑-脾轴可能为此提供了一个环路方面的解释。我们适度锻炼,可能如同小鼠的EPS,恰到好处地刺激了CeA和PVN的CRH神经元,增进了浆细胞和抗感染抗体的生成。相反,频繁马拉松跑后人们易于感冒,可能是过度应激导致的免疫抑制超越了免疫增强效果。祁海猜测,未来通过神经免疫学的进一步研究,应该可能在特定神经元、神经环路水平定量描述、评价不同锻炼方式、不同躯体运动形式、乃至不同“冥想”“禅修”过程对免疫系统的影响,从而帮助我们为加强“免疫力”而正确选择锻炼或其他增进健康的方式提供更明确的科学依据。这也是题图“勤動”所表达的愿景。 清华-北大生命科学联合中心2013级博士生张旭、清华生命学院2016级博士生雷博、上海科技大学2015级博士生袁媛、清华PTN项目2016级博士生张厉为本文的共同第一作者。该得到科技部和国家自然科学基金委科研基金的支持。祁海课题组还得到北京市科委、清华-北大生命科学联合中心、清华大学免疫学研究所、北京生物结构前沿研究中心、北京市慢性病免疫学研究重点实验室的支持。钟毅课题组得到清华麦戈文脑科学研究所的支持。另外,中国科学院武汉数学物理研究所徐福强课题组、清华大学药学院廖学斌课题组、首都医科大学孙文智课题组为本研究的顺利开展和完成作出了重要贡献。 论文链接: https://www.nature.com/articles/s41586-020-2235-7
清华大学 2021-04-11
表达猪细小病毒VP2基因的重组伪狂犬病毒及疫苗
研发阶段/n该发明涉及人工构建的伪狂犬病毒(pseudorabiesvirus,PrV)和猪细小病毒(porcineparvovirus,PPV)的主要结构基因VP2。在缺失了主要毒力基因(TK)和病毒增殖非必需基因(gG)的伪狂犬病毒基因组中,定位插入猪细小病毒的VP2基因,使其位于伪狂犬病毒的强晚期启动子下游,插入的外源基因编码的蛋白具有良好的免疫原性,可以刺激猪产生抵抗猪细小病毒和猪伪狂犬病毒两种强毒攻击的保护性免疫反应。该发明还包括重组的伪狂犬病毒Pseudorabiesvirus,Hzau
华中农业大学 2021-01-12
一种猪肌内脂肪含量基因Lpin1的克隆及其应用
研发阶段/n可用于猪肉质性状的遗传改良,在猪的遗传改良中肉质性状的测定需要进行屠宰测定,肌内脂肪含量和系水力是两个重要的肉质性状,影响到肌内的口感惬意度和屠宰后胴体出售前贮藏损失,应用到商家的经济利益,这两项专利的使用可以提高肌内脂肪含量,降低屠宰后滴水损失(不需要进行屠宰测定)。
华中农业大学 2021-01-12
用于艾滋病基因治疗的 CRISPR/Cas9 重组慢病毒载体及其慢病毒
本发明属于医药及生物工程领域,涉及一种可用于艾滋病基因治疗的 CRISPR/Cas9 重组慢病毒载体 及其慢病毒,该重组慢病毒载体由慢病毒载体 lentiCRISPR 用 BsmBI 酶切后,连入带 BsmBI 粘性末端 的 CXCR4 特异靶序列重组而得,获得的 CRISPR/Cas9 重组慢病毒载体能够在艾滋病毒辅助受体 CXCR4 的 4&nbs
武汉大学 2021-04-14
新冠病毒对胰腺的损害研究
在该研究中,收集了公共数据集(大量RNA-seq和单细胞RNA-seq)发现ACE2在胰腺(外分泌腺和胰岛中)的表达和分布。而且,包括轻度和重度COVID-19患者在内的临床数据表明存在轻度胰腺炎。在这67例严重病例中,有11例(16.41%)的患者的淀粉酶和脂肪酶水平升高,有5例(7.46%)的患者显示胰腺影像学改变。在54例轻度病例中,只有一名患者(1.85%)显示淀粉酶和脂肪酶水平升高,而没有影像学改变。该研究揭示了COVID-19患者轻度胰腺损伤的现象和可能的原因。这表明SARS-CoV-2感染后的胰腺炎也应在临床工作中予以重视。
华中科技大学 2021-04-10
中草药碳点抗病毒研究
近日,国际学术期刊Small刊载了华中农业大学理学院梁建功教授课题组和动科动医学院肖少波教授课题组合作发表的题为“Glycyrrhizic‐Acid‐Based Carbon Dots with High Antiviral Activity by Multisite Inhibition Mechanisms”的研究论文,该研究合成了具有高生物相容性及高抗病毒活性的甘草酸碳点,并揭示了碳点的抗病毒机制。中草药在抗病毒领域具有广阔的应用前景,在最近爆发的新型冠状病毒肺炎的治疗过程中,中草药的参与度超过80%。然而,单一成分的中草药抗病毒效果往往不高,且存在一定的毒副作用,如何进一步提高中草药的抗病毒效果,降低其毒副作用,成为该领域需要解决的一个关键科学问题。甘草酸碳点抗病毒机制示意图该研究利用水热合成技术,成功将中草药甘草的活性成分——甘草酸转化为具有良好生物相容性及高的抗病毒活性的甘草酸碳点(Gly-CDs)。研究发现,Gly-CDs不仅可与病毒多靶点结合从而抑制病毒的入侵过程,还可通过刺激细胞天然免疫信号通路、抑制活性氧、调控细胞内宿主限制性因子等途径抑制病毒的复制过程,其对病毒的最大抑制效果可达5个滴度以上。Gly-CDs对猪繁殖与呼吸综合征病毒(动脉炎病毒科)、猪伪狂犬病毒(疱疹病毒科)及猪流行性腹泻病毒(冠状病毒科)均具有良好的抑制效果。华中农业大学理学院/资环学院博士研究生童婷为论文第一作者,梁建功教授、肖少波教授为共同通讯作者。该研究得到了国家自然科学基金(31490602, 31772785)及国家重点研发计划(2016YFD0500105)等基金的资助。
华中农业大学 2021-04-10
新型冠状病毒肺炎诊疗快速指南
2020年1月22日,华中科技大学附属同济医院专家组根据包括华中科技大学附属同济医院在内的武汉各大医疗机构诊治的第一批患者的第一手资料制定了《新型冠状病毒肺炎诊疗快速指南》(简称《指南》)。 《指南》内容包括新型冠状病毒肺炎究竟有什么症状,如何检测,如何确认,如何治疗,怎样做好个人防护,出院后需要注意什么等内容:新型冠状病毒病原学特点;起病以发热为主要表现;发热患者合并哪些症状要怀疑被感染;新型冠状病毒肺炎需要鉴别的疾病;抗病毒药、抗菌药物以及激素应用需要注意;老人、孕产妇病情进展相对更快;出院患者要按时随访。
华中科技大学 2021-04-10
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