一、项目分类 显著效益成果转化 二、技术分析 本成果依托江苏省农业科技自主创新项目“功能性安全生物发酵饲料关键技术研发与应用”研发，通过大量实验筛选出的有益微生物对饲料原料进行发酵，用于动物生产。 选用优质饲料原料利用筛选分离的有益微生物经发酵工艺制成，能提高动物饲料的营养吸收，提升免疫和抗病能力，促进养殖动物肠道健康；发酵过程中生长的有益微生物强化肠道健康；发酵产生的风味物质有助于提高饲料适口性以及对养殖动物诱食性。有助于提高饲料适口性利于动物肠道健康，促进动物生长，降低饲料成本。

产品用途：改善肠道菌群，降低肠道有害菌的毒性作用。 产品特点：ＰＢ６的芽孢杆菌属细菌当作为益生菌给予时可用于治疗抗生素相关性腹泻（ＡＡＤ）、艰难梭菌相关性腹泻（ＣＤＡＤ）。另外，可有效治疗免疫相关疾病如炎症性肠病（ＩＢＤ）。共同开发单位：江苏师范大学江苏省药用植物生物技术重点实验室、比利时Kemin(凯敏)药业有限公司。

本实用新型涉及一种益生菌培养装置，包括透明的箱体、与箱体铰接连接的透明箱门、培养装置和营养液提供装置，培养装置包括培养皿和设置于培养皿底部的凸轮，培养皿内底部设置有电热恒温加热板，培养皿两端活动固定在箱体内两侧壁上的固定杆上，凸轮驱动培养皿摇晃，营养液提供装置包括储液筒、泵体、输液管和设置于输液管上的喷嘴，储液筒连接输液管，输液管上设置泵体；本实用新型通过将益生菌接种在培养皿中，箱体确保培养皿始终处于无菌环境中，避免杂菌感染，凸轮驱动培养皿均匀的摇晃，使得培养皿内益生菌都能获得均匀的光照和营养液，电热恒温加热板使得培养皿的温度始终处于37℃左右，营养液从喷嘴喷洒到培养皿内。

进入到21世纪，世界人口老龄化问题不断凸显，我国作为人口大国，老龄化问题也正在不断加剧，预计2025年，六十岁以上人口将达到3亿，成为超老年型国家。其中，骨质疏松症已成为威胁中老年人健康的主要疾病之一，越来越多的人受到该病症的危害。课题组从我国传统发酵食品中筛选获得一株植物乳杆菌AR495，具有良好的缓解骨质疏松功能，具体表现如下：（1）AR495能够显著提高骨矿物质含量，增加骨密度以及骨弹性模量，通过降低胫骨中RORα与RORγ基因的表达，调控RANK/RANKL/OPG骨代谢通路，降低骨质流失，从而缓解骨质疏松；（2）AR495能够提高肠道屏障完整性，减少骨质疏松引起的炎症反应；（3）具有良好的耐酸耐胆盐特性，能够高存活率通过胃肠道。 相关技术指标： 植物乳杆菌AR495能够显著改善因为雌激素缺乏导致的骨质疏松，提高股骨骨密度、骨体积分数、骨小梁数目、骨小梁厚度以及弹性模量，并且骨小梁厚度与弹性模量恢复到正常水平。 技术创新点： 骨质疏松对于中老年人健康影响非常大，目前用于治疗骨质疏松的药物存在潜在并发症风险并且副作用也较为明显。本技术提供的益生菌植物乳杆菌AR495能够有效降低骨质流失，缓解骨质疏松，并且益生菌的安全性非常好，能够制作成多种食品制剂进行长期食用，对于骨质疏松患者来说有重要的意义。

一、成果简介 近年来益生菌相关制品需求量巨大，但相关产品及生产技术依赖进口，造成益生菌产品价格较高，严重制约我国益生菌产业的发展。团队在国家科技部“十二五”、863计划课题资助下，经过多 年技术攻关，先后从健康人群肠道、传统发酵制品中分离筛选乳酸菌600余株，初步建立了益生菌 资源库；获得长双歧杆菌BBMN68、青春双歧杆菌BBMN23、动物双歧杆菌A6、干酪乳杆菌L9、 

成果创新点 以我国百岁及以上老人粪便为实验材料，用改良的 MRS 培养基在厌氧条件下分离培养双歧杆菌，筛选出消化道逆 环境耐受性强、抑菌能力强和粘附力好的菌株，并以此开 发出适合老年人的益生菌产品。 应用范围 本项目以开发老年益生产品为主，用于改善老年人体 质，维护老年人健康。 技术成熟度 已筛选出一株双歧杆菌，完成了菌种鉴定、菌株毒力 检测和全基因组测序，目前

以我国百岁及以上老人粪便为实验材料，用改良的 MRS 培养基在厌氧条件下分离培养双歧杆菌，筛选出消化道逆环境耐受性强、抑菌能力强和粘附力好的菌株，并以此开发出适合老年人的益生菌产品。 

益生菌是能够提高人、动物和植物健康水平的活菌、代谢产物和酶的总称。经过 30 多年的连续研发积累，在双歧杆菌、乳酸菌、芽孢杆菌、酵母菌和光合细菌等一系列益生菌的筛选、功能评价特别是优化培养控制方面取得了一系列研究成果，均获得了超高细胞浓度的微生物培养物，为企业节约成本高效获得微生物细胞和代谢产物奠定了坚实的基础。

本项目获 2015 年中国专利金奖，2015 年江苏省科学技术奖一等奖。 从上世纪 90 年代起开展了益生菌的大规模分离和筛选，得到了 20 多株具有重要益生功能和自主知识产权的专利菌株。课题组应用以上优良菌种和核心技术， 陆续研发了畅优发酵乳、畅优 ST-III 乳酸菌饮料、莫斯利安常温酸奶等新型发酵乳制品，市场增长率达到 50%，实现销售收入 120 多亿元，不仅创造了良好的 经济效益，而且树立了科技创新、引领中国乳业健康成长的标杆。成果的技术指标、创新性与先进性 （1）系统评价了 26 株专利菌株及其发酵乳的保健功能，植物乳杆菌 ST-III 对胆固醇的去除率为 45.17%，乳酸片球菌 P9 对李斯特菌的抑制率达 48.2%；对15 株典型益生菌菌株进行了全基因组测序和精细图谱绘制，覆盖率达到 260 倍以上，完成 10 株典型菌株的比较基因组分析，发现 ST-III 的耐酸和耐盐的分子机制等。 （2）开发氢氧型弱碱性阴离子交换、细胞微囊固定化高密度培养技术，活菌数分别达到 1.0×1011 cfu/mL 和 2.7×1011 cfu/g 以上，开发陶瓷微滤膜浓缩装置，浓缩倍率达 50 倍以上。 （3）开发新型液氮深冷发酵剂，实现超浓缩发酵剂的瞬时造粒，菌体存活率达 99%；液芯包囊新型发酵剂，4℃保藏一年菌体浓度达 1011 -1012cfu/g；生物膜载体新型发酵剂，热风干燥的菌浓度达 1010 cfu/g。 （4）开发高剪切粘度损失控制和二次巴杀技术，打破酸奶无法长期常温存 放的难题，实现酸奶常温下 5 个月以上的货架期；开发益生菌协同发酵技术，首创了国内植物乳杆菌发酵乳制品，成为全球销量最大的植物乳杆菌发酵乳制品。针对优良菌株进行了系统的功能评价和二次开发，解析了专利菌的益生性状、 生理特性、遗传背景及环境因子作用规律。基于终产物抑制解除、损伤修复、生物膜培养和胶囊化保护等机制开发了载体保护、反馈抑制解除、抗环境胁迫等高密度培养技术，并开发了液氮深冷、液芯包囊、生物膜载体等新型发酵剂产品。 以产业化生产为导向，攻克了益生菌协同发酵、低温长时发酵、高剪切粘度控制及质构保持、二次巴氏杀菌等新型发酵技术及生产工艺。形成了益生菌发酵乳制品的系统生产技术体系，开发出了系列新型益生菌发酵乳产品并实现了产业化生产

益生菌是能够提高人、动物和植物健康水平的活菌、代谢产物和酶的总称。经过 30 多年的连续研发积累，在双歧杆菌、乳酸菌、芽孢杆菌、酵母菌和光合细菌等一系列益生菌的筛选、功能评价特别是优化培养控制方面取得了一系列研究成果，均获得了超高细胞浓度的微生物培养物，为企业节约成本高效获得微生物细胞和代谢产物奠定了坚实的基础。