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基于CRISPR/Cas9基因编辑系统的载体组合及其应用
01.成果简介 CRISPR/Cas9是细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统。其工作原理是crRNA通过碱基配对与tracrRNA结合形成tracrRNA/crRNA复合物,此复合物引导核酸酶cas9蛋白在与crRNA配对的序列靶位点剪切双链DNA。经过研究,通过人工设计tracrRNA/crRNA,改造形成具有引导作用的sgRNA,可以引导Cas9蛋白在多种细胞的特定基因组位点上进行切割、修饰,并最终实现基因突变、插入或缺失。因此,CRISPR/Cas9系统已经被广泛应用于基因编辑技术领域。 近年来,CRISPR/Cas9基因编辑系统在真核生物和原核生物中得到了广泛的应用。在大肠杆菌等革兰氏阴性菌中,用一个载体表达cas9基因,同时由于革兰氏阴性菌重组效率低,需要在这个载体上表达λ-RED重组酶;在另一个载体中表达sgRNA和用于同源重组的同源臂序列。两个载体都转入大肠杆菌中时,sgRNA介导Cas9蛋白切割基因组上特定序列,形成双链断裂,刺激同源重组的发生,从而实现基因编辑。 本项成果构建了适用于盐单胞菌的基于CRISPR/Cas9的基因编辑系统。该系统由两个载体组成:第一个载体表达Cas9基因,且不需要表达λ-RED重组酶,实际操作中不再需要诱导λ-RED重组酶的表达,简化了步骤流程;第二个载体表达sgRNA,并含有用于同源重组的同源臂序列。从而实现了基因编辑。本项成果的技术优势包括: (1)基因编辑时间由原有的20余天缩短到7-8天; (2)N个基因编辑时间由原有的N个月缩短到3+5N天; (3)无需表达λ-RED重组酶。                        图1 盐单胞菌TD01进行基因编辑的流程示意图02.应用前景 本项成果可作为CRISPR/Cas9基因编辑系统的载体,广泛应用于基因编辑领域。03.知识产权 本项成果已申请1项发明专利。04.团队介绍 本项目为多团队合作项目,其中一个团队的负责人为清华大学教授,博士生导师,长江学者特聘教授,国家杰出青年基金获得者。主要研究方向为合成生物学、微生物代谢工程、生物材料、工业生物技术。已发表国内外高水平学术论文数十篇,申请专利70余项。05.合作方式 投融资。06.联系方式邮箱:zhangxinrui@tsinghua.edu.cn
清华大学 2021-04-13
种养耦合及其废弃物循环利用关键技术转化应用
上海交通大学 2021-04-13
一种具有保肝作用的化合物及其应用
【发 明 人】陶伟伟;段金廒;唐于平【摘要】本发明公开了一种具有保肝作用的新皂苷化合物。本发明通过对甘草化学成分进行系统深入研究,经过波谱和质谱数据分析表明从甘草根中分离得到一个新的三萜皂苷化合物。经过药理实验研究表明,本发明提供的三萜皂苷化合物,可显著降低CCl<sub>4</sub>致肝损伤模型小鼠、乙醇致肝损伤模型小鼠,D-氨基半乳糖致肝损伤模型小鼠血清ALT、AST活性及肝组织MDA含量,增强肝脏SOD活性,对肝损伤具有明显的保护作用,且经过毒性实验研究表明,本发明提供的具有保肝作用的新皂苷化合物未见显著毒性,可望开发成新的保肝作用的药物或保健品。
南京中医药大学 2021-04-13
一种磁致伸缩导波接收传感器及其应用
本发明公开了一种磁致伸缩导波接收传感器,包括偏置磁化器、 外接收线圈、内接收线圈组件,其中,偏置磁化器用于贴附在管道的 外壁;外接收线圈用于套接在管道的外侧;内接收线圈组件包括内接 收线圈、线圈支撑杆及定位套筒,内接收线圈缠绕在线圈支撑杆上, 定位套筒活动套接在线圈支撑杆上,内接收线圈用于伸入管道内感应 空气中磁通量变化以实现导波接收,定位套筒用于套装在管道内壁上 以与线圈支撑杆配合支撑内接收线圈。本发明的内接收线圈用于感应 管内空气中磁通量变化实现导波接收,与外接收线圈一起配合能够消 除管内空气中
华中科技大学 2021-04-14
一种磁致伸缩导波接收传感器及其应用
本发明公开了一种磁致伸缩导波接收传感器,包括偏置磁化器、 外接收线圈、内接收线圈组件,其中,偏置磁化器用于贴附在管道的 外壁;外接收线圈用于套接在管道的外侧;内接收线圈组件包括内接 收线圈、线圈支撑杆及定位套筒,内接收线圈缠绕在线圈支撑杆上, 定位套筒活动套接在线圈支撑杆上,内接收线圈用于伸入管道内感应 空气中磁通量变化以实现导波接收,定位套筒用于套装在管道内壁上 以与线圈支撑杆配合支撑内接收线圈。本发明的内接收线圈用于感应 管内空气中磁通量变化实现导波接收,与外接收线圈一起配合能够消 除管内空气中
华中科技大学 2021-04-14
用于注射成型的生物质复合材料及其制品
选用来源丰富的废生物质纤维(如木粉、秸秆粉、稻壳、竹粉等),利用预塑化母料法工艺,将其与热塑性塑料复合,通过表面处理、 界面改性、复合及分散等技术,结合配方及设备的优化,最终制 备具有良好力学性能、高耐水性、无甲醛释放、良好加工性能及 能用于注射成型的系列高性能生物质基复合材料。该生物质复合材料适用于一次性用品、汽车内饰件、日用品、家居产品等。该技术水平处于国内领先,符合当前低碳、绿色、循环等可持续发展理念。
华南理工大学 2023-05-08
优质肉鸡新品种京海黄鸡培育及其产业化
先后获得教育部科技进步一等奖、 扬州市科技进步一等奖、中国产学研合作创新成果一等奖、国家科技进步二等奖。在成功育成京海黄鸡的基础上,创建了标准化、绿色化、品牌化生产技术体系和产学研协同联动服务带动型模式,推动了肉鸡产业提质增效。 自 2014 年起,京海黄鸡连续 3 年被农业部确定为全国主导品种,目前已在全国 11个省市推广种苗 2.69 亿只,取得了重大经济、社会和生态效益。
扬州大学 2021-04-14
航空用新一代镍基高温合金及其单晶叶片
项目目标产品是航空用新一代镍基高温合金及其单晶叶片,基于国际先进的超纯净熔炼和镍基单晶涡轮叶片制造技术,广泛应用于航空发动机领域。以江苏省优秀科技创新团队为依托,以国际合作为桥梁,以国家急需、国际前沿为宗旨,通过产学研联合,瞄准航空发动机用单晶高温合金涡轮叶片生产的国际先进水平,以国产大飞机项目为导向,实现具有自主知识产权的航空发动机用镍基单晶高温合金涡轮叶片生产共性关键制造技术突破。本项目所开发的航空用新一代单晶叶片具有在高温度下拥有优异综合性能,适合长时间在高温下工作,能够抗腐蚀和磨蚀,长寿命
江苏大学 2021-04-14
一种多端口直流-直流自耦变压器及其应用
本发明公开了一种多端口直流-直流自耦变压器,用于实现多个 电压等级不同的直流系统之间的互联传输,该自耦变压器包括 2N-1 个 换流器,该 2N-1 个换流器在直流侧依次串联连接,并在交流侧连接到 交流线路,且所述依次串联的所述 2N-1 个换流器中的第 i 个换流器的 正极和第2N-i换流器的负极分别与第i个直流系统的正负极对应连接; 其中,N 为直流系统的个数,i 为换流器的序号。本发明还公开了上述 自耦变压器中换流器的容量设计方法以及上述自耦变压器的控制方 法。本发明可以使得各直流系统之间传输
华中科技大学 2021-04-14
航空用新一代镍基高温合金及其单晶叶片
项目简介项目目标产品是航空用新一代镍基高温合金及其单晶叶片,基于国际先进的超纯净熔炼和镍基单晶涡轮叶片制造技术,广泛应用于航空发动机领域。以江苏省优秀科技创新团队为依托,以国际合作为桥梁,以国家急需、国际前沿为宗旨,通过产学研联合,瞄准航空发动机用单晶高温合金涡轮叶片生产的国际先进水平,以国产大飞机项目为导向,实现具有自主知识产权的航空发动机用镍基单晶高温合金涡轮叶片生产共性关键制造技术突破。本项目所开发的航空用新一代单晶叶片具有在高温度下拥有优异综合性能,适合长时间在高温下工作,能够
江苏大学 2021-04-14
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