细胞互作的原位捕获技术
                                        
                                            	不同细胞之间的相互作用和信息传递在包括	免疫	响应	、	器官	发育、神经传导	在内的众多生命活动中都扮演	着	关键角色	。目前,	研究	细胞互作	的方法	大	都	需要	已知参与	的	细胞类型	,难以在复杂的活体环境下发现或研究未知的细胞	间	相互作用	。	为了解决这一难题,陈鹏课题组	借助“定向进化”技术和“	邻近标记	”策略,实现了	细胞	之间	动态相互作用的	原位捕获。这一被命名为	EXCELL	(	Enzyme-	m	ediated proximal cell labeling	)	的技术,通过将	作者	定向进化得到的分选酶(	mg	SrtA	)	展示在	待研究的	细胞表面,	能够对与其	相互作用	的	细胞	进行原位捕获与鉴定	,为研究细胞	-	细胞相	互作用提供了有力的工具	。	源自	金黄色葡萄球菌	的	分选酶	Sortas	e	 A	 	(	SrtA	)	能够	催化	分选肽	(	LPETG	)	和寡聚甘氨酸	的	共价连接。近期有文献报道将	SrtA	用于监测小鼠体内特定受体	-	配体介导的免疫	细胞互作	过程	1	。但是该方法	需要将	SrtA	与	寡聚甘氨酸分别融合在相互作用	的	配体和受体	细胞	上,	因此需要预知	相互作用的	细胞	类型,并对两类细胞	同时进行	基因	改造	,因此无法捕捉未知的细胞间相互作用	。本研究突破了这一瓶颈,	建立了	对	SrtA	进行定向进化的高通量	荧光	筛选	平台,并成功	获得	了	对单一甘氨酸进行标记的	高活性	SrtA	突变体	-	mgSrtA	,	能够	实现对	任意	细胞类型的有效标记。
                                        
                                        
                                            北京大学
                                            2021-04-11