l 一种高效的痕量临床病人样本的高通量全蛋白组学定量分析方法。中国发明专利申请号：CN201710155263.3.基于二代测序和蛋白质组学的高效价特异性抗体基因工程生产和制备。

 肝细胞肝癌（简称肝癌）是我国高发的恶性肿瘤，生长快，易转移，多数患者就医时已错失根治性切除机会。分子靶向药物索拉非尼是晚期肝癌患者的一线治疗药物，但价格昂贵，且治疗效果并不尽人意，仅能延长晚期未手术肝癌患者3个月生存时间。目前尚无指示索拉非尼疗效的标志物可用于临床。生命科学学院庄诗美教授团队联合附属肿瘤医院、附属第三医院、第二军医大学东方肝胆医院及广州医科大学附属肿瘤医院的研究团队，通过多中心病例对照研究发现：给予肝癌手术切除后复发的患者索拉非尼治疗，可显著降低肝癌组织中具有肿瘤包绕血管（Vessels that encapsulate tumor clusters，VETC）症状的患者的死亡风险，并延长其总生存和复发后生存时间，但对于不具有VETC结构的肝癌患者则无显著疗效，这提示VETC血管结构可能作为索拉非尼临床用药的标志物。       庄诗美教授团队于2015年首次揭示VETC血管能够帮助癌细胞在血管内皮包裹中成团入血转移，为肝癌提供不依赖于运动侵袭的新型高效转移模式。该研究同样作为封面论文发表于Hepatology，并获同期亮点推介及专家评述。揭示了肝癌血管生成和转移的新机制。

发现了一系列p53 在维持干细胞基因组稳定性及干性的重要功能及机制 （Lin et al., 2005, Nat. Cell Biol. 7, 165-171; Song et al., 2007, Nat. Cell. Biol. 9:573-80; Liu et al., 2010, Nat. Cell Biol. 12:993-8; Song et al., 2010, Cell Stem Cell 6, 180-89; Xiong et al., 2015, J Cell Biol. 208:513-20）。本研究成果解释了p53在某些肿瘤里突变率很高，但在肝癌里突变率很低的原因，为临床上治疗肝癌提供了新思路；同时对当前肿瘤药物的研发起到了警示作用，比如通过增强癌症患者p53功能的药物可能会在无意中导致肿瘤的生长。

在唾液中敏感地检测到肝细胞癌变过程中释放出来的标志物。通过不断技术创新，患者仅需通过唾液就能检测早期肝癌，无需采取血液样本，无创高效，敏感性超过80%、特异性接近98%，远远高于血液AFP检测，适合于原发性肝癌早期预警、早期诊断、术后疗效评估与复发监测，更适合于大规模社区人群普查。

在国内率先研究发现肝移植后乙肝复发是肝癌复发的预测因素，并针对肝移植术后乙肝复发的防治开展了一系列研究，将乙肝复发率降至1%以下。（四）全面系统地总结了肝移植后肝癌复发的治疗策略，提出复发后 个体化综合治疗的观点，并在国内率先组织同行专家达成共识。对肿瘤免疫微环境、免疫抑制状态下肝 癌侵袭转移机制等开展了一系列基础及应用基础研究。相关研究获973课题、科技重大专项课题、国家自 然科学基金多项；先后举办了七届羊城肝脏移植高峰论坛和多次学习班；出版专著4部（移植肝脏病学、 腹部器官移植手术学等）；获国家发明专利1项；发表论文115篇，其中SCI论文42篇（影响因子10分以上2 篇，5分以上5篇），他引频次达400多次；本项目的关键技术向国内20多家常规开展肝癌肝移植的移植中 心推广并取得良好效果，不仅推动了肝脏移植的发展，也提升了我国肝脏移植的国际地位。

本项目是基于PPP1CA生物标志物，进行肝癌早期筛查和诊断试剂盒开发及产业化的项目，开发PPP1CA胶体金肝癌早期筛查试剂盒，用于肝癌早期普筛。 一、项目进展 创意计划阶段 二、负责人及成员 姓名 学院/所学专业 入学/毕业时间 李昱洁 药学院/药学专业 2018/2022 赵祖一 药学院/药学专业 2020/2024 刘楚熠 药学院/药学专业 2020/2024 赵博韬 公共卫生学院/预防医学专业 2018/2025 于悦 人文学院/历史学专业 2020/2024 沈佳敏 经济学院/经济统计专业 2019/2023 韩一诺 生命科学学院/生物科学 2019/2023 魏翘楚 公共卫生学院/预防医学专业 2020/2025 赖欣 药学院/药学专业 2020/2024 赵书悦 药学院/药学专业 2020/2024 谭清 法学院/法学专业 2020/2025 尹洁 医学院/临床医学专业 2019/2024 杨梦娇 经济学院/金融工程专业 2019/2023 三、指导教师 姓名 学院/所学专业 职务/职称 研究方向 李良成 药学院/药学专业 厦门大学药学院副教授 肿瘤、自身免疫性疾病和糖尿病的发病机理及药物开发研究 洪万进 药学院/药学专业 新加坡分子与细胞生物学研究院院长、厦门大学药学院教授 分子与细胞生物学、病毒学和癌细胞生物学 蓝伟光 化学系/化学专业 厦门大学材料学院讲座教授 生物膜技术 徐陈芳 药学院/药学专业 厦门大学药学院辅导员 药物分析 四、项目简介 早期肝癌发病隐匿，最初癌变细胞与正常细胞几乎无差异，人体不会感到不适。问题在于，目前临床检测肝癌的生物标志物—甲胎蛋白（AFP）存在特异性差、灵敏度低等的缺点，早期患者不能被及时发现，治愈率低、死亡率很高，所以肝癌的早期筛查对于提高患者生存率具有至关重要的临床意义。 前期研究中利用原代培养的肝癌细胞分泌的外泌体，结合蛋白组学和生物信息学技术，寻找到PPP1CA作为肝癌肿瘤标志物，使肝癌检测的灵敏度和特异性均达到90%以上，优于目前市面上的检测试剂盒（以甲胎蛋白为生物标志物，灵敏度为18-60%）。 本项目是基于PPP1CA生物标志物，进行肝癌早期筛查和诊断试剂盒开发及产业化的项目，开发PPP1CA胶体金肝癌早期筛查试剂盒，用于肝癌早期普筛；同时也将开发PPP1CA免疫化学发光检测试剂盒，用于肝癌分期检测，并积极推进其商业化生产与应用。

疟疾是世界上流行最广、发病率和死亡率最高的热带寄生虫传染病。据了解，全球现有25亿人处于疟疾的威胁之中，每年发病人数3亿―5亿，因此而死亡的人数达200万―300万，其中大部分为5岁以下儿童，以非洲、东南亚和中南美洲最为严重。疟疾的流行给发展中国家带来了巨大的经济损失，防治疟疾成为这些国家消除贫困的主要内容。世界卫生组织因此把遏制疟疾列为21世纪前十年首要

精氨酸脱亚胺酶（Arginine deiminase，EC 3.5.3.6，ADI）因其可以作为 精氨酸营养缺陷型肿瘤细胞（如：肝癌、黑素瘤）的靶向治疗药物而受到广泛关注。目前，进入癌症临床研究的仅有支原体来源的 ADI，处于临床三期试验。本项目从自然界筛选到产精氨酸脱亚胺酶的变形假单胞菌，在大肠杆菌实现 了该酶的重组表达，采用该重组 ADI 进行体外和小鼠体内抗癌活性研究，对肝癌细胞人肝癌细胞系 HepG2 和小鼠肝癌细胞系 H22 有显著抑制作用。基于简便灵敏的 96 孔板高通量筛选模型，筛选在体内生理条件下具有较高酶活以及底物亲和性的精氨酸脱亚胺酶突变株，采用随机突变、定点突变等非理性和半理性的蛋白质定向进化手段，获得了最适 pH 由 6.0 提高至 7.0，在生理中性条件下（pH 7.4）酶活力较野生型 ADI 提高了 33 倍以上的 ADI 突变株，比活力为 15－17 U/mg。该改造后的 ADI 的 PEG 化和小鼠实验正在进行中。 

中试阶段/n该项目研发基于液体活检的ctDNA甲基化肝癌早期诊断试剂盒、产品灵敏度高：扩增技术检出标本中极其微量的核酸，检测下限低至 ng 甚至 pg 级的痕量核酸，乃至一个细胞。能在细胞癌变之前检测出DNA甲基化异常，真正做到早期预警。也可用于手术后病人的个性化诊断DNA甲基化检测可以精确到单个碱基。CTC捕获和测序技术的飞速发展，保障了检测结果的精确性和特异性。(预期)成果的先进性或独特性：1.已经筛选得到了在肝癌组织中差异甲基化的DNA标志物。2.实验证实了该标志物的DNA甲基化