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一种结核杆菌融合蛋白及其制备方法和应用
本发明所构建的融合蛋白 EAMM 能在大肠杆菌中稳定大量表 达,经纯化得到纯度较高的蛋白;构建的亚单位疫苗免疫动物能产生 针对结核杆菌特定抗原(ESAT-6、Ag85B、Mtb8.4 和 PPD)的特异 性的细胞免疫和体液免疫应答,具有较强的免疫原性。EAMM 亚单 位疫苗加强免疫后的结核菌载量明显少于 PBS 组和仅 BCG 免疫组, 表明清除结核分枝杆菌的能力较强。从组织切片 HE 染色
兰州大学 2021-04-14
一种结核杆菌融合蛋白及其制备方法和应用
本发明所构建的融合蛋白EAMM能在大肠杆菌中稳定大量表达,经纯化得到纯度较高的蛋白;构建的亚单位疫苗免疫动物能产生针对结核杆菌特定抗原(ESAT-6、Ag85B、Mtb8.4和PPD)的特异性的细胞免疫和体液免疫应答,具有较强的免疫原性。
兰州大学 2021-01-12
一种枯草芽孢杆菌的简易迭代编辑工具及其应用
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种枯草芽孢杆菌的简易迭代编辑工具及其应用。该工具包括两个质粒:pQ‑Cas9n和pC‑TS。pQ‑Cas9n质粒包含Cas9n基因和诱导型启动子,用于表达Cas9n蛋白。pC‑TS质粒包含温敏性复制蛋白,可以实现质粒的温度筛选消除。该工具实现了高效的基因编辑,显著缩短了编辑周期,并支持多基因的快速打靶和编辑,满足了复杂基因组编辑的需求。同时,本发明采用双质粒系统,通过温敏性复制蛋白实现了质粒的温度筛选消除,简化了质粒消除和再引入的步骤,本发明支持多轮迭代编辑,在编辑完成一个基因后,可以快速消除质粒并引入新的质粒进行新的位点编辑,实现了高效的多轮编辑。
南京工业大学 2021-01-12
重组野生型鸡半胱氨酸蛋白酶抑制剂及其应用
本发明涉及重组野生型鸡半胱氨酸蛋白酶抑制剂及其应用。获得重组野生型 cC 的方法是:利用 pGAPZ α A 载体构建野生型 cC 的表达系统;重组野生型 cC 在毕赤酵母 X-33 中表达;重组野生型 cC 的分离纯化。对重组野生型 cC 对鲢鱼鱼糜凝胶劣化抑制作用的检测方法是:鱼糜样品的制作;对所取鱼糜样品进行温浴处理,加重组野生型 cC 和未加 cC 成为对照组;处理样品进行 SDS-PAGE ,观察结果。本发明验证了重组野生型 cC 可以直接加入鱼糜制品中,能明显抑制鱼糜制品的凝胶劣化,在加工过程中能较好的保持其弹性,且其安全、无毒,有着良好的应用前景
辽宁大学 2021-04-11
膀胱癌治疗用重组hIFN(人干扰素)-α-2b- BCG(卡介苗)
本 项 目 是 我 国 唯 一 拥 有 自 主 知 识 产 权 的 膀 胱 腔 内 灌 注 专 用 型 重 组hIFN-α-2b-BCG,是针对浅表性膀胱癌的预防肿瘤复发、治疗残留肿瘤和原位癌的免疫治疗专用,高效、低副作用的 I 类生物新药。
天津医科大学 2021-02-01
膀胱癌治疗用重组hIFN(人干扰素)-α-2b- BCG(卡介苗)
本 项 目 是 我 国 唯 一 拥 有 自 主 知 识 产 权 的 膀 胱 腔 内 灌 注 专 用 型 重 组hIFN-α-2b-BCG,是针对浅表性膀胱癌的预防肿瘤复发、治疗残留肿瘤和原位癌的免疫治疗专用,高效、低副作用的 I 类生物新药。应用范围:可应用于治疗膀胱原位癌和预防膀胱癌术后复发的新型生物制剂。效益分析:基于相关专利开发的在线高速分选矿用设备,具有分选速度快、系统集成度高、运行成本低等优点,其主要技术优势和性能指标如下: 一、主要技术优势 (1)一种重组干扰素卡介苗菌株,其特征在于该菌株利用基因工程技术构建 的 phIFN-α-2B 穿 梭 质 粒 , 转 导 到 丹 麦 I 型 BCG 菌 株 内 , 构 建 出rBCG-hIFN-α-2B 菌株,该卡介苗菌株可以分泌 hIFN-α-2B。 (2)既发挥 IFN-α-2b 的直接作用又可增强 BCG 介导的抗肿瘤效应,增强与放大了野生 BCG 预防与治疗高危浅表膀胱癌的临床效果,降低了 BCG 的灌注剂量和局部与全身严重并发症发生率,同时也节省了大剂量干扰素腔内灌注的昂贵费用。 (3)将重组人干扰素-α-2b-BCG 使用生物反应发生器进行大规模深层发酵培养,原位连接切向流中空过滤柱,离散洗涤菌体;经真空冷冻干燥成干粉剂。这样获得的菌苗活性率高,降低了生产过程中污染的可能性。 二、主要性能指标 (1)纯度:100%; (2)活菌量:≥60%; (3)体外和小鼠体内抗肿瘤活性优于 BCG 。
天津医科大学 2021-04-10
猪圆环病毒 2 型-副猪嗜血杆菌多联多价灭活疫苗
本成果是将人工合成的表达猪圆环病毒 2 型 Cap 蛋白的核苷酸 序列克隆到杆状病毒表达载体中,构建重组杆状病毒,接种 Sf9 昆虫细胞,经 过悬浮培养、收获、过滤,二乙烯亚胺 BEI 灭活病毒液后,加入适宜的佐剂混 合乳化制成。并利用自主分离鉴定副猪嗜血杆菌病多价流行菌株,通过优化培 养工艺,提高副猪嗜血杆菌培养密度,成功研制了猪圆环病毒 2 型-副猪嗜血杆 菌多联多价灭活疫苗。 
青岛农业大学 2021-04-11
结核杆菌蛋白酶体调控复合体ATPase作用机理
Mpa六聚体除了与真核生物蛋白酶体调节颗粒Rpt1-Rpt6蛋白六聚体以及古细菌PAN蛋白六聚体具有一定的结构同源性之外,还具有一些明显不同的结构特征:(1)结核杆菌Mpa具有形成双环的两个串联寡核苷酸/寡糖结合(OB)结构域,而古细菌蛋白酶体相关ATPase调控颗粒(PAN)和真核生物蛋白酶体ATPase调控颗粒复合体(Rpt1-6)每个蛋白亚基都只具有单个OB结构域;(2)Mpa在具有蛋白酶体活化功能的C末端之前具有一个泛素样的β-grasp结构域,而古细菌PAN和真核生物Rpt1-6蛋白复合体并不具有这样的一个β-grasp结构域 由于β-grasp结构域的存在,Mpa六聚体中各个蛋白亚基C末端被埋在结构核心中而没有暴露在蛋白复合体结构的表面,这就影响了C末端的GQYL基序与20S 蛋白酶体复合体的对接,从而阻碍了六聚化的Mpa与七次对称的28聚体的蛋白酶体相互作用。我们通过功能研究进一步解释了为什么单独的Mpa六聚体在体外情况下不能有效结合蛋白酶体核心颗粒并启动蛋白质特异性降解,结合晶体结构域功能研究,我们提出了结核杆菌蛋白酶体ATPase调控颗粒Mpa与20S蛋白酶体复合体这一分子量超过1100KDa蛋白质机器的作用模型
南方科技大学 2021-04-13
益生优良芽孢杆菌发酵关键技术研究开发与应用
益生优良芽孢杆菌是一类能对热、紫外线、电磁辐射等有强抗性的微生物。其独特优势可用来制成新型、高效、低残留的微生态制剂,广泛应用于工业、农业、医学等研究领域。目前,国内外益生芽孢杆菌产业化关键技术存在诸多问题。如:产品中活菌数低;有效期内活菌含量低造成货架期短;研发与生产脱节,研发单位工程技术应用相对滞后。针对当前问题,本技术攻克了芽孢杆菌发酵集成技术,包括: (1)N+离子诱变结合荧光探针追踪:利用低能离子注入技术对芽孢杆菌进行改良,筛选出性状优良的菌种。通过荧光探针追踪芽孢杆菌培养
南京工业大学 2021-04-14
双歧杆菌胞外多糖结构鉴定、功能评价及活性产品的研制
一、成果简介 “双歧杆菌胞外多糖结构鉴定、功能评价及活性产品的研制”受到国家高技术研究发展计划(863 项目)项目(编号:2008AA10Z324)与国家科技支撑计划项目(编号:2006BABO4A06)的资助。该研究以我国广西巴马百岁以上长寿老人肠道分离到的双歧杆菌及其胞外多糖(EPS)为材料,较系统、全面地进行了结构鉴定、功能评价及活性产品的研制。 
中国农业大学 2021-04-14
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