本发明属于外泌体领域，具体涉及一种脐带间充质干细胞来源外泌体及其制备方法和其在原始卵泡体外激活中的用途。人脐带间充质干细胞外泌体及其制备方法和应用，制备方法包括以下步骤：采集人脐带组织，并提取得到脐带间充质干细胞；得到的脐带间充质干细胞进行离心处理，以提取得到外泌体。本发明HucMSC外泌体可以激活原始卵泡并促进新生小鼠卵泡发育，卵泡发育成熟后获得的成熟卵母细胞，其质量未受到影响。HucMSC外泌体可以改善老年小鼠生育功能，老年鼠卵巢包囊内注射外泌体后，与公鼠交配后，实验组小鼠产仔数明显高于对照组。

本发明公开了一种体外长期稳定培养鸡胚胎干细胞的方法。本发明提供了鸡胚胎干细胞的体外培养基，为在基础培养基中添加碱性成纤维细胞生长因子、干细胞因子和白血病抑制因子得到的培养基；所述碱性成纤维细胞生长因子、所述干细胞因子和所述白血病抑制因子在所述体外培养基的配比为1:1:1。本发明首次利用可传代的鸡胚成纤维细胞系DF‑1细胞系作为饲养层，通过外源添加人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF),重组小鼠干细胞因子(mSCF)和人白血病抑制因子(hLIF)三种细胞因子，从而可以实现在体外长期、稳定培养鸡胚胎干细胞且维持其自我更新能力。

先天发育畸形、肿瘤切除、创伤、难愈性伤口等因素导致的软组织缺损对患者的外形容貌、生活质量等都有严重影响；由于具有来源丰富、取材方便、安全可靠、成本低廉、无免疫排斥反应等优点，自体脂肪移植至今仍然是软组织缺损修复和重建的常用方法。然而，脂肪移植的远期吸收率较高，可达60%以上，这极大地影响了软组织修复的远期疗效，从而限制了脂肪移植在临床的广泛应用。研究表明，移植脂肪组织吸收率较高的原因主要有微循环不能及时建立导致早期血供不足，组织中脂肪细胞凋亡、去分化等导致成熟脂肪细胞数目减少。近年来，随着细胞治疗的出现，越来越多的研究将干细胞应用于脂肪移植。脂肪干细胞（Adipose-derived stem cells, ASCs)是较理想的可应用于脂肪再生和脂肪移植的种子细胞。富血小板血浆（platelet-rich plasma, PRP）是全血经过多次差速离心后的产物。除了高浓度的血小板，PRP激活后还可释放多种、大量的对细胞增殖、组织修复与再生等具有重要作用的生长因子。因此，越来越多的研究将PRP应用于组织修复和再生。针对脂肪移植后成活率低的问题，考虑到ASCs和PRP的诸多优势，本项目致力于研究了PRP复合ASCs对脂肪移植的影响，并进一步探索获得PRP促进脂肪移植存活的最佳用量等基础数据，有望为临床自体脂肪移植技术的改进提供了参考。

已成功构建Ad-GDF-5和Ad-GFP；已成功构建小肠粘膜下层和壳聚糖－聚己酸内酯支架；目前已完成动物椎间盘退变模型的制作，间充质干细胞的提取，分离，培养和鉴定；已制备转基因MSCs，完成转基因MSCs的细胞特性，其和支架之间的相互影响。

【项目来源】江苏省中医药局项目“癌痛平胶囊治疗癌性疼痛的研究”，编号：97004；江苏省教育厅项目“癌痛平胶囊治疗癌性疼痛的作用机理研究”，编号：04KJD360132；江苏省卫生厅项目“癌痛平胶囊的药学及主要药效学机理研究”，编号：KF2005001。 【成果鉴定】经江苏省科技厅组织专家鉴定，达到国内领先水平。 【类    别】中药新药六（2）类。 【剂    型】胶囊剂。 【处方来源】南京中医药大学中医内科学资深专家临床经验方。根据中医理论和临床实践，提出癌性疼痛的主要病机为癌毒内郁、痰瘀互结、经络壅塞，故治以解毒祛瘀、化痰通络法，并据此研制了中药新制剂-癌痛平胶囊。 【功能主治】解毒祛瘀，化痰通络。主治各种癌性疼痛。 【主要技术指标】 1．临床研究：临床治疗多种肿瘤癌性疼痛30例，临床治愈率为4%；临床治愈显效率为53%，总有效率为90%。在减轻疼痛的强度，减少疼痛发生次数，缩短疼痛持续时间和止痛作用起效时间，延长止痛作用维持时间，减少压痛、叩击痛指数，提高血浆β-内啡肽水平和降低血浆cAMP含量等方面，治疗前后相比均有显著性差异。 2．实验研究：癌痛平胶囊能减少乙酸刺激致小鼠扭体反应次数，能明显增强非特异性免疫功能和细胞免疫功能，具有一定的镇痛、抗癌、增强免疫的作用。 【推广应用前景】癌性疼痛是癌症患者最常见且最难控制的症状，也是影响患者生活质量的重要因素。全世界每年新发的癌症病人约700万，其中30~50%伴有疼痛。我国现有癌症病人200万，每年新发病人160万。据调查我国的癌痛发生率为51.5%，据世界卫生组织（WHO）报道，全世界每天约有350～400万癌症病人在忍受着疼痛的折磨，其中半数以上属中度或重度疼痛，它严重降低了患者的生存质量。疼痛的加剧和剧烈刺激，直接影响患者的食欲、睡眠、心理状况和治疗效果，是恶性肿瘤患者失去治疗信心以及生存欲望的重要原因之一。对癌痛进行积极治疗是WHO癌症综合规划中的四项重要内容之一。目前应用WHO大力推广的“三阶梯药物止痛法”控制癌痛的方案，疗效虽然比较确切，但长期使用镇痛剂毒副作用大，成瘾性、依赖性强，并受患者耐受性的限制，致使部分病人止痛效果欠佳，还不能满足广大患者的需要。根据中医理论及临床实践经验，针对癌性疼痛“癌毒内郁、痰瘀互结、经络壅塞”的病机特点，采用解毒祛瘀、化痰通络法，筛选有效方药，研制成中药新制剂－癌痛平胶囊，将在癌症的临床治疗领域得到积极的推广应用，并将极大地丰富癌痛“三阶梯药物止痛法”一、二阶梯（非吗啡类药物）治疗的内容，推广应用后有广阔的国内外市场和显著的社会效益和经济效益。 【进展情况】已完成临床前主要研究工作。Copyright©2005-20

项目进展情况：正进行

黄晓军教授创建并完善的国际原创单倍型相合移植体系--"北京方案"，解决供者来源缺乏问题，为"缺乏相合供者的可靠移植方案"，"实现人人都有造血干细胞移植供者"，"迎来造血干细胞移植快速发展的新时代"。

本发明提供了一种增强骨髓间充质干细胞移植后生存能力和血管新生能力的细胞体外培养基及处理方法，所述的培养基由常规细胞培养基中加入终浓度为500～2000μmol/L的DMOG制得；所述方法包括：将经传代培养稳定的骨髓间充质干细胞置于DMOG终浓度500～2000μmol/L的细胞培养基中，培养24～36小时，获得处理后的骨髓间充质干细胞用于细胞移植。本发明的有益效果主要体现在：通过DMOG预处理，可有效提高人骨髓间充质干细胞的生存能力和管腔形成能力，能提高人骨髓间充质干细胞移植修复组织损伤的疗效。

本发明提供地西他滨和奥沙利铂在制备治疗肾细胞癌组合药物中的应用，其中地西他滨和奥沙利铂的优选摩尔浓度比值为1:5～1:8，组合药是由地西他滨和奥沙利铂与药学上可接受的辅料制成。本发明经体内、外实验研究证明，地西他滨对奥沙利铂治疗肾细胞癌具有明显的协同作用，该结果扩大了它们临床应用的范围。本发明提供的组合药可增强奥沙利铂在肾细胞癌小鼠模型肿瘤细胞中的积聚，同时增强肾细胞癌小鼠模型对奥沙利铂的敏感性。